夏枯草属药材指纹特征聚类分析评价

目的:采用HPLC方法建立不同产地夏枯草属药材指纹图谱,并对其进行聚类分析评价。方法:建立高效液相指纹图谱分析方法,色谱柱为Alltima C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液梯度洗脱;流速为1.0ml/min;检测波长:280nm;进样量20μl;柱温为30℃。测定了3个品种不同产地的夏枯草属药材指纹图谱,并对其聚类分析。结果:不同产地药材指纹图谱特征有明显差异,湖北、安徽、江西、贵州、广西、四川产地药材归为1类;河南、江苏、浙江3个产地夏枯草归为1类。结论:建立的指纹图谱能明显的反应出各个产地药材的特征,且聚类分析有效的区分药材的归属性。     

中药炮制:反制与反佐制

文章追溯了中药炮制反制与反佐制炮制方法的理论渊源和历史沿革,根据文献记载对反制和反佐制法进行辨析,结合具体方剂实例,探讨了反制与反佐制的本义和实质,并针对中药炮制反制与反佐制的研究现状,提出了一些新的想法和建议。     

反相高效液相色谱法测定墨旱莲中齐墩果酸的含量

目的:建立测定墨旱莲中齐墩果酸的含量的高效液相色谱法。方法:采用Phenomene×C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(90:10),检测波长210nm,流速1.0ml/min,柱温为30℃,进样量为20μl。结果:齐墩果酸在0.569-3.414μg内峰面积与其质量浓度有良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为98.40%(RSD=2.44%)。结论:该方法简便、快速、准确,可作为墨旱莲质量控制的一个有效方法。     

人骨髓间充质干细胞在不同输注液中的生存和生长

背景: 间充质干细胞移植技术快速发展,需要异地移植病例不断增加,但是关于细胞保存运输条件的研究甚少.目的: 比较几种临床常用输注液及实验室配制的输注液对间充质干细胞生存和生长的影响.方法: 抽取健康志愿者髂骨骨髓,采用密度梯度离心和贴壁筛选相结合的方法,分离培养骨髓间充质干细胞.对骨髓间充质干细胞进行细胞形态、细胞表面标记和多向分化能力的鉴定.25℃条件下,用10%FBS-DMEM、细胞输注液和5种临床常用细胞输注液(9 g/L氯化钠注射液、50 g/L葡萄糖注射液、50 g/L葡萄糖氯化钠注射液、2%和5%的人血自蛋白溶液)保存第3代骨髓间充质干细胞,检测1,2,4和6 h细胞的存活率.然后4℃条件下,以细胞输注液保存骨髓间充质干细胞,检测2,4,8,12,24 h细胞的存活率和存活细胞的生长曲线.结果与结论: 第3代骨髓间充质干细胞呈均匀一致的长梭形,平行或旋涡状紧密排列.细胞表面标记CD44、CD105表达阳性,CD45表达阴性.成骨诱导3周后,长梭形骨髓间充质干细胞变成多角形,von Kossa染色可见典型的黑色钙化小结;成脂诱导2周后,细胞变成短梭形或椭圆形,油红O染色可见胞浆内密集的被染成红色的脂滴.在25℃条件下,细胞输注液中保存的骨髓间充质干细胞,其存活率远高于在上述5种临床常用输注液中所保存细胞;4℃条件下,细胞输注液和完全培养基中保存的骨髓间充质干细胞存活率和再生长能力基本相同.提示细胞完全培养基成分配制的输注液是维持间充质干细胞脱离培养环境后保持细胞活性,且延长细胞存活时间最适宜的溶液.     

助产士在职培训需求调查分析

目的调查助产士在职培训需求,为优化助产士在职培训计划及提高培训效率提供依据。方法选取2017年1—12月中山市各医院助产士253名为研究对象,采用自行设计的助产士在职培训需求调查表进行问卷调查。结果助产士在职培训需求迫切程度前4位为高危孕产妇产程中的管理、产科急救知识及技能培训、助产专业新内容与新进展、瘢痕子宫再次阴道分娩接生技术。不同层级助产士在职培训需求不同,N0级助产士对产科急救知识及技能培训需求最多,N1级助产士对高危孕产妇产程中的管理需求最迫切,N2级助产士对助产专业新内容与新进展需求最多,N3级助产士更关注高龄产妇心理问题及孕产妇的营养策略。结论通过助产士在职培训需求调查,为制定规范化、有针对性的助产专业培训提供依据,对快速提升专业素质和能力、适应时代需求、保障母婴安全具有积极作用。     

基于虚拟现实技术的脊柱三维仿真模型的建立及应用

目的 建立基于虚拟现实技术的计算机辅助三维立体脊柱虚拟模型,构建出适用于虚拟手术中实时复杂交互的脊柱三维仿真模型. 方法 对高分辨率的人体64排CT切片数据进行感兴趣区域图像分割和边缘提取,采用面绘制技术对提取的轮廓序列进行三维数据生成,对重建的模型根据实时交互的需要进行优化. 结果 重建出的脊柱模型保持了较高的几何分辨率和光滑性,读入虚拟手术系统后,在实时交互下能表现出较好的解剖精确性和实时绘制的真实感.结论基于人体切片数据重建出的三维模型可较好地适用于虚拟手术中的复杂交互操作.     

不同碘摄入量地区甲状腺自身抗体的流行病学五年随访研究

目的 利用不同碘摄入量的3个农村社区甲状腺疾病的流行病学随访研究资料，探讨甲状腺功能正常人群甲状腺自身抗体发生和转归的规律和意义，以及环境因素碘对其的影响。方法 1999年本研究组对轻度碘缺乏、超足量碘摄入和过量碘摄人的盘山、彰武和黄骅3个社区进行了甲状腺疾病的流行病学研究，2004年再次对同一人群进行了随访研究，前后采用同样方法采血清测定TSH、甲状腺过氧化物酶抗体（TPPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TgAb）和甲状腺球蛋白（Tg）水平，采尿样测定尿碘浓度及行甲状腺B超检查。结果 （1）初访时TSH正常人群5年后TPOAb的阳性率在彰武社区较前升高，TgAb的阳性率在黄骅社区较前升高（均P〈0．05）。（2）初访时TSH正常但TPOAb或TgAb阳性者多维持抗体阳性，且抗体水平越高随访抗体阳性维持率越高。（3）随访发现1999年TPOAb和（或）TgAb阳性者较抗体阴性者更易发生甲状腺功能异常（P〈0．01），黄骅和彰武社区的抗体阳性者5年随访发生甲状腺功能减低的比率显著高于盘山社区，以黄骅社区最高（P〈0．05）。（4）彰武社区TPOAb阳性的5年累积发生率在3个社区中最高。黄骅社区TgAb阳性的5年累积发生率在3个社区中最高，与盘山相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 甲状腺自身抗体阳性者发生甲状腺功能异常的比率显著高于抗体阴性者，而碘摄人量增加能增加抗体阳性者发生甲减的危险性。持续处于过量碘摄人状态使甲状腺自身抗体阳性的发生率增加。     

Effect of iodine intake on serum thyroglobulin——A five-year prospective epidemiological study

Objective To clarify the effect of iodine intake on serum thyroglobulin (Tg). Methods A 5-year prospective study was conducted in the 3 different iodine intake areas in China [Panshan (miht deficiency) ,Zhangwu (more than adequate) and Huanghua (excess)]. A total of 3 099 people with normal serum levels of Tg in 1999 were followed and 2 448 of these participants were feasible to be observed in 2004 and included in the present study. The serum levels of Tg, thyraglobulin antibody(TgAb), thyroid peroxidase antibody(TPOAb) and TSH, thyroid volume, family and personal histories of thyroid diseases were measured and inquried. The general linear model (GLM) was used to explore the determinants of Tg. Results Among the study population at baseline, serum Tg were significantly different in three areas [7.5 (4.4-13. 1) μg/L at Panshan, 6.8 (3.6-11.2)μg/L at Huanghua, 5.9 (3.2-10.7) μg/L at Zhangwu, P<0.01]. They were associated with age, sex and the rate of positive TgAb, abnormal thyroid volume, abnormal TSH and positive personal history of thyroid diseases, in order to control the effects of confounding factors, the data from 1856 subjects with thyroid-related indexes all in normal range and without personal history of thyroid diseases were analyzed to clarify the effect of iodine intake on Tg. The serum Tg among three areas were significantly different in both 1999 and 2004, they were all increased in 5 years with significant augment (△ Tg) among the three areas[3.1 (-0.2-8.0) μg/L at Panshan, 3.5 (0.5-9.0)μg/L at Huanghua vs 2. 5(0.3-6.1) μg/L at Zhangwu,P<0.01]. The GLM analysis revealed that age, Tg and TSH levels at baseline were the determinants of △Tg in addition to iodine intake. Conclusion Iodine intake is a dominant determinant of serum Tg. Age and TSH should also be considered while indicating iodine intake by serum Tg.     

局灶性脑缺血后神经干细胞增殖及GDNF表达变化的实验研究

目的研究局灶性脑缺血后大鼠脑内神经干细胞(NSCs)增殖情况及与胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达变化的关系。方法将24只SD大鼠随机分为假手术组和模型1组、模型2组、模型3组各6只,后三组用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备局灶性脑缺血模型,分别于术后3、7、14 d处死;假手术组除不以尼龙线阻塞大脑中动脉起始部外,其他操作与模型1组相同。采用免疫组化染色法观察5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记的细胞及巢蛋白(Nestin)、GDNF阳性细胞表达,BrdU/Nestin免疫荧光双标法观察NSCs变化。结果模型2组损伤侧脑室下层(SVZ)BrdU阳性细胞显著多于假手术组(P<0.05),模型3组与假手术组相似;模型2、3组皮层梗死灶周围BrdU阳性细胞均显著多于假手术组(P<0.01、0.05);模型1、2组皮层梗死灶周围Nestin阳性细胞均显著多于假手术组(P均<0.01),BrdU/Nestin免疫荧光双标显示BrdU阳性细胞几乎均为Nestin阳性;模型2、3组皮层梗死灶周围GDNF阳性细胞均显著多于假手术组(P均<0.05)。结论大鼠局灶性脑缺血后3～14 d内源性NSCs增殖加快,GDNF表达增加可能对其起促进作用。     

稳定表达膜结合型 CD40L 配体 CHO 细胞系的建立和鉴定

 目的 建立稳定表达膜结合型 CD40 配体（CD40L）的 CHO 细胞系。 方法 将编码膜结合型 CD40L 的重组质粒 pcDNA3.1- fCD40L 用 BgI Ⅱ 和 XhoⅠ 酶进行双酶切鉴定。电穿孔法向 CHO 细胞转染该重组质粒，G418 筛选抗性克隆，有限稀释法获取单克隆阳性细胞后扩大培养，获得 2 个整合了 fCD40L 基因的 CHO 细胞（CHO-fCD40L）克隆。用 RT-PCR、流式细胞仪分别从 RNA 和蛋白质水平对 2 个CHO-fCD40L 克隆细胞中膜结合型 CD40L 的表达进行检测；ELISA 法检测 2 个 CHO-fCD40L 克隆细胞培养上清液中可溶性 CD40L（sCD40L）的含量。 结果 重组质粒 pcDNA3.1-fCD40L 经双酶切和电泳检测到符合预期大小的基因片段。该重组质粒转染 CHO 细胞后经克隆化培养获得 2 个 CHO-fCD40L 克隆，分别命名为 C10、E11。RT-PCR 检测显示 C10、E11 细胞中有膜结合型 CD40L mRNA 的转录；流式细胞仪检测显示 C10、E11 细胞表达 CD40L 蛋白达 90% 以上；ELISA 法检测到显示 C10、E11 细胞培养液上清中有 sCD40L 蛋白表达。 结论 成功获得稳定表达膜结合型 CD40L 的 CHO 细胞系，为比较膜结合型 CD40L 与 sCD40L 的生物学功能奠定了良好基础。