抗人CD154单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析

目的:克隆抗人CD154抗体轻重链可变区基因,并分析其核苷酸序列,为基因工程抗体的构建奠定基础。方法:从分泌能抑制免疫反应的抗人CD154单克隆抗体杂交瘤细胞株 7E8中提取总RNA,合成cDNA第一链后,经PCR扩增获得抗人CD154单抗轻链可变区 (VL)和重链可变区 (VH)基因,分别克隆入pUC18载体,并进行序列分析。结果:①抗体的轻链可变区基因全长为 341bp,编码113个氨基酸,归属于Ig的Vκ2基因,氨基酸序列分析结果显示轻链可变区含有明确的 4个骨架区和 3个抗原决定簇互补区,在第 2 3位和第 93位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸;②抗体的重链可变区基因全长为 354bp,编码118个氨基酸,归属于小鼠IgVH基因,D、J区基因分别属于DSP2.9和JH2,氨基酸序列分析结果显示,重链可变区含有明确的 4个骨架区和 3个抗原决定簇互补区,在第 2 3和第 97位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸。结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别为抗体的轻、重链可变区基因.     

慢性乙型肝炎患者肝胆湿热证和肝郁脾虚证的决策树诊断模型初探

目的 建立基于临床数据的慢性乙肝患者典型证候的诊断模型,探索与慢性乙肝典型证候相关的症状、体征和实验室指标组合。 方法 对1 004例慢性乙肝患者进行证候学调查和实验室检测,包括 88项症状、舌脉象、20项体征和 14项实验室指标。然后选取典型证候的临床数据,联合采用Logistic回归、决策树、贝叶斯网络方法进行数据分析,构建能够有效区分不同证候的诊断模型。 结果 1 004例慢性乙肝患者中最为典型的证候为肝胆湿热证（340例,占33.86%）与肝郁脾虚证（366例,占36.45%）。首先采用Logistic回归分析得到具有统计学意义的16项症状与体征及3项实验室指标,然后采用决策树方法构建能够区分肝胆湿热证、肝郁脾虚证的诊断模型（辨证诊断准确率=74.36%）,发现苔白、淡红舌、巩膜黄染、两目干涩、丙氨酸转氨酶（ALT）和 HBeAg是鉴别两证型的有效指标组合。采用贝叶斯网络分析的结果也验证了上述指标的重要性。 结论 本文建立了一种能够有效判别慢性乙肝患者肝胆湿热证、肝郁脾虚证的决策树诊断模型,为将基于经验的中医辨证转向基于数据模型的辨证提供了方法,有助于促进证候的客观化诊断。     

心肺复苏后大鼠神经细胞Caspase-3表达与细胞凋亡关系的实验研究

目的 探讨心肺复苏后大鼠脑组织Caspase-3表达与细胞凋亡的关系.方法建立窒息联合冰氯化钾致大鼠心脏骤停/心肺复苏(CA/CPR)的动物模型,于各时相点断头留取脑组织,采用免疫组化的方法观察CPR后脑组织Caspase-3蛋白的表达,TUNEL检测神经细胞凋亡.结果对照组脑组织内仅有少量TUNEL阳性细胞;ROSC后3 h出现表达阳性细胞,ROSC后6 h表达开始增多,ROSC后12 h进一步上升(P<0.05),其后各组均处于高水平表达.Caspase-3表达均在ROSC后24 h显著增加,直至ROSC后72 h,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),Spearman等级相关检验Caspase-3表达与细胞凋亡明显相关(r=0.909).结论CA/CPR后大鼠脑线粒体Caspase-3蛋白高表达可能是细胞凋亡增加的原因之一.     

结直肠癌肿瘤干细胞研究进展

结直肠癌为人类消化道常见恶性肿瘤,在西方国家发病率较亚、非洲高,但在我国的流行病调查研究发现,结直肠癌的发病率呈逐年上升趋势,其中男性较女性发病率高[1]。肿瘤干细胞是一群具有自我更新和多向分化潜力的细胞,与肿瘤的复发、转移密切相关;而结直肠癌患者的癌细胞转移和术后复发是威胁生命的主要原因,因此,从肿瘤干细胞的角度深入研究结直肠癌的生物学特征,可为结直肠癌患者的防治指引方向。现将其相关研究作一综述。     

高血压病合并心力衰竭时使用硝苯地平、氨氯地平治疗的对比观察

目的　观察高血压病合并心衰时使用硝苯地平、氨氯地平治疗时对心脏影响。　方法　 4 7例高血压病合并心衰患者 ,分为硝苯地平治疗组 (30 mg/d,n=2 5 )及氨氯地平 (5 m g/d,n=2 2 )治疗组。观测 2 4 h平均血压、平均心率 ,脉压 ,左室射血分数 (L VEF)、舒张早期减速度 (Dct)、左室等容舒张时间 (IVRT)。　结果　血压、心率、L VEF两组差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;平均脉压、IVRT硝苯地平组大于氨氯地平组 (P<0 .0 1) ;硝苯地平组 Dct小于氨氯地平组 (P<0 .0 1)。　结论　高血压合并心衰时使用硝苯地平增大脉压差 ,并影响心脏的舒张功能。     

激光近形制造钛合金试件力学性能的初步研究

目的 比较激光近形制造技术和铸造技术制作的钛合金试件的材料性能,探索激光快速成形此新工艺在口腔修复领域中的应用.方法 以-200～325目气雾化法制备的球形钛合金粉末为原料,应用激光近形制造技术制作钛合金试件,测试其在拉伸试验中的抗拉强度、屈服强度,三点弯曲试验中的弯曲弹性模量、抗弯强度,以及维氏显微硬度,并与铸造技术制作的钛合金试件进行对比;观察两种不同加工方法制作的钛合金试件的组织结构,以及拉伸断口的微观形貌特征.结果 激光近形制造技术制作钛合金试件,成形速度快,成形件无缺陷,其抗拉强度、屈服强度、弯曲弹性模量、抗弯强度、维氏显微硬度分别为(1 056.92±61.69)N/mm2、(62.65±61.91)N/mm2、(133 722.62±3 618.18)MPa、(2 313.42±129.16)MPa、376.24±14.88.激光近形制造试件的抗拉强度、屈服强度显著高于铸造钛合金试件.金相显微镜显示激光近形制造钛合金试件的组织为针状细枝晶的微晶结构,拉伸断口呈现均匀细致的韧窝形貌,发生韧性断裂.结论 激光近形制造技术可以满足口腔修复的加工要求,但需要进一步研究其成形性能及提高精度.     

双硫仑反应诱发急性非ST段抬高型心肌梗死1例报告

2011年11月我科收治1例因应用抗生素期间饮酒导致双硫仑反应并诱发急性非 ST段抬高型心肌梗死患者,现将诊疗过程报告如下。     

通心络胶囊佐治后循环缺血性眩晕和预防复发的疗效观察

目的观察通心络佐治后循环缺血性眩晕(PCIV)的临床疗效和对眩晕复发的预防作用。方法将126例PCIV患者随机分为2组,在常规治疗基础上,治疗组和对照组分别口服通心络和甲磺酸倍他司汀治疗,疗程均为15 d,比较2组临床疗效和治疗前后经颅多普勒超声指标,以及药物不良反应、血压、肝功能、肾功能情况。在出院的患者中选择90例随机分为3组(各30例),分别给予小剂量通心络、敏使朗预防治疗以及无药物治疗,观察3年内眩晕的复发情况。结果治疗组痊愈率、总有效率明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗组在改善椎—基动脉的平均血流速度、降低动脉指数和血管阻力指数、频谱图改善等方面明显优于对照组(P均<0.05)。不良反应2组比较差异无统计学意义(P>0.05),且治疗后血压、肝肾功能无变化。在随访观察的3年中,眩晕复发率通心络预防治疗组<对照组<空白对照组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络在佐治PCIV和预防眩晕复发方面均有良好效果。     

神经内镜在经蝶窦垂体瘤切除手术中的应用

目的探讨神经内镜在经蝶手术中的临床意义。方法回顾性总结及分析我科自2004年5月~2009年1月5年间神经内镜下经蝶窦垂体瘤切除手术56例患者的临床资料,术前均行影像学（CT和MRI）及血液内分泌激素检查,且均在内镜下经鼻蝶手术切除病变。50例获得6~24个月的随访。结果肿瘤全切例39例（69.6%）,次全切除12例（21.4%）,部分切除5例（9%）。术后临床症状改善50例（89.2%）。50例随访病人中,4例在术后2年内复发。结论内镜经鼻蝶手术治疗垂体瘤,创伤小,切除肿瘤相对完全,术后病人反应轻,住院时间短。神经内镜下经蝶窦垂体瘤切除手术是一种有效的微侵袭手术方法。     

中药循经烫疗联合穴位刺激对膝关节前交叉韧带保残重建术后本体感觉的影响

目的探讨中药循经烫疗联合膝关节周围穴位刺激对膝关节前交叉韧带保残重建术后本体感觉的影响。方法选取75例膝关节前交叉韧带断裂患者为观察对象,利用随机数字表法将患者随机分为3组(对照1组、对照2组及观察组),每组25例,均在关节镜下利用自体肌腱(股薄肌肌腱和半腱肌肌腱)重建前交叉韧带。术后对照1组采取常规康复方法,对照2组采取常规康复加本体感觉训练方法,观察组采取常规康复加中药循经烫疗及膝关节周围穴位刺激方法。术后4个月,应用CPM机完成测试及Lysholm评分。结果所有患者均获得随访。观察组、对照2组Lysholm评分均高于对照1组,差异均有统计学意义(P0.05);观察组与对照2组比较,差异无统计学意义(P0.05)。在膝关节被动角度重现差异方面,对照1组患侧膝关节三阶段偏差与健侧比较,差异有统计学意义(P0.05);对照2组患侧膝关节三阶段偏差与健侧比较,差异无统计学意义(P0.05);观察组患侧膝关节三阶段偏差与健侧比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论中药循经烫疗联合膝关节周围特定穴位的按压能促进膝关节前交叉韧带重建术后早期本体感觉的恢复。