miR-570对胃癌细胞B7-H1蛋白表达的抑制作用

B7-H1是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用。本文研究miR-570对B7-H1表达的调控作用。首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-H1表达阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435,以流式细胞术检测B7-H1分子表达情况;然后构建pcDNA/B7-H1表达质粒与miR-570共转染CHO细胞,以流式细胞术检测CHO细胞上B7-H1分子的表达情况;最后分别构建含B7-H1基因3-UTR片段和含miR-570作用靶点序列的荧光素酶表达载体与miR-570共转染CHO细胞,用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果显示miR-570能显著抑制SGC-7901细胞和B7-H1基因转染细胞膜上B7-H1蛋白的表达,并能显著抑制荧光素酶表达载体表达的荧光素酶蛋白,而且anti-miR-570能上调MDA-MB-435细胞上B7-H1表达。本研究证明miR-570能显著抑制B7-H1蛋白表达,为通过抑制B7-H1信号通路以增强机体抗肿瘤免疫力的治疗途径奠定了基础。     

尿液综合分析在临床中的应用

目的探讨尿液分析的标准化应用,对尿液分析仪器的干扰因素造成的假阳性结果进行分析。方法采用UF-50全自动尿沉渣分析仪和尿干化学仪联机后结果与显微镜镜检结果进行分析比较。结果UF-50全自动尿沉渣分析仪所测红细胞和管型假阳性率较高,分别为38．84％和32．94％;白细胞和上皮细胞假阳性率较低,分别为7．23％和10．34％。结论通过UF-50全自动尿沉渣分析仪、尿干化学仪和显微镜三交叉互检,可排除假阳性结果,使尿液分析标准化,为临床提供可靠依据。     

四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的作用

背景:一些实验证明多糖在感染、炎症、细胞间黏附和信号传导、免疫识别、细胞增殖分化及维持细胞正常结构和功能生理、病理等方面均起重要作用。但植物多糖对胃肠道黏膜的保护作用有待进一步研究。目的:观察不同浓度的四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。设计:观察对比实验。单位:广东省中医院中心实验室。材料:①细胞株:正常大鼠小肠上皮细胞株IEC-6(ATCCCatalogNo.RL-1592)由美国ATCC(AmericanTypeCultureCollection)购得,主要来源于小肠隐窝细胞。②试剂和药品:DMEM培养基,牛胰岛素,庆大霉素,胎牛血清,DPBS均为GIBCO公司产品;细胞增殖试剂盒(MTT)为Roche公司产品;消炎痛为Sigma公司产品。四君子汤总多糖按药典处方比例取党参,白术,茯苓和甘草适量,加水浸泡后,煮沸提取4h,重复1次,合并提取液,减压浓缩,高速离心除去不溶物,提取液置玻璃纸中逆向流水透析2h,再于提取液中加乙醇至浓度约80%,保存过夜后分取沉淀,合并所有沉淀,采用Sevag法除去粗多糖中的蛋白,冻干后得到的总多糖。方法:①将IEC-6细胞株于干冰中取出,迅速放入37℃水浴中解冻后,加入已装有DMEM培养液的T-150培养瓶后放入CO2培养箱中,于37℃,饱和湿度,体积分数为0.05的CO2环境下培养。细胞隔天换液1次,每5～7天进行传代,传代比例为1∶7。第15～20代细胞用于实验。②IEC-6细胞以1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板上,接种后6h,各培养孔内依次加入浓度为50,100,200mg/L四君子汤总多糖,即为四君子汤总多糖3个剂量组。每天定时取出1板,按试剂盒说明书以MTT法进行细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。③将IEC-6细胞按1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板中,接种后次日更换以无血清培养液DMEM,24小时后,各培养板中分别加入消炎痛以及四君子汤总多糖,其中,消炎痛使用浓度为40mmol/L,即为消炎痛组。四君子汤总多糖使用3个剂量分别为50,100,200mg/L,即为四君子汤总多糖50,100,200mg/L组。药物作用20h后,按试剂盒使用说明书进行MTT法细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在各相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。主要观察指标:MTT法测定四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞生长的影响结果;MTT法测定四君子汤总多糖对消炎痛所致的IEC-6细胞生长抑制的影响结果。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用;IEC-6细胞在给予消炎痛40mmol/L作用24h后,细胞增殖的吸光度明显低于正常对照组(0.17±0.02,0.31±0.03;P<0.01)。当四君子汤总多糖使用浓度为100mg/L时,IEC-6细胞的吸光度明显高于消炎痛组(0.25±0.04,0.17±0.02;P<0.01),虽然未达到正常IEC-6细胞吸光度的水平,但与正常组无明显差异(P>0.05)。结论:四君子汤总糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。     

依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中的临床观察

目的探讨依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中的疗效。方法 112例急性脑卒中患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组46例。对照组给予依达拉奉,观察组联合应用硫酸镁、大剂量纳洛酮。比较两组神经功能缺损评分、血液流变学指标及疗效。结果观察组总有效率为86.96%(40/46),对照组为60.87%(36/46),比较差异有统计学意义(P<0.01);两组治疗后NDS评分和血液流变学指标均显著下降(P<0.05),观察组较对照组下降更为显著,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组均无不良反应。结论依达拉奉联合硫酸镁和大剂量纳洛酮治疗急性脑卒中能更快改善神经功能,促进血液循环,显著提高疗效,且无不良反应。     

慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是呼吸系统常见的严重的疾病,具有病情迁延,反复发作,逐渐加重等特点。随着病情的进展,患者肺血管发生改变,肺实质受到破坏,外周阻力增大,进而引起肺动脉高压,最终发展为肺源性心脏病。肺动脉高压作为COPD发展至肺心病的重要病理环节,该文通过对COPD合并肺动脉高压的发病机制、病理生理、实验室检查、治疗和等研究进展进行综述。     

范炳华教授枕下三角区推拿临证举例

范炳华教授是浙江省名中医,从事中医推拿学的临床、教学、科研工作30余年,对由颈源性因素所致的眩晕、偏头痛、耳鸣有着自己的独特见解,医术精湛,经验丰富。范师临证善将中医基本理论与现代解剖学相结合灵活运用,根据不同的疾病临床表现,选择枕下三角区内不同的作用点和作用力方向进行手法治疗,每每收效奇佳。笔者有幸随师侍诊,对其在枕下三角区灵活运用推拿的体会颇深,现将所视浅述于下。     

不同切制法对葛根中葛根素含量的影响

目的 研究测定不同切制方法 切制葛根后葛根素的含量差异,确定葛根的最佳切制方法 .方法 对葛根采用鲜切法和干切法切制,用HPLC测定葛根素含量.结果 葛根鲜切品中葛根素含量为5.14%,干切品中葛根素含量为4.91%.结论 本方法 简便、准确,重现性好,适用于葛根中葛根素含量的测定.葛根鲜切品较干切法中葛根素含量高.     

黄柏中小檗碱乙醇提取工艺优选

目的 用正交试验法优选黄柏乙醇回流提取的最佳工艺.方法 采用高效液相色谱法,以小檗碱的提取率为评价指标,以正交试验法优选提取工艺参数.结果 影响黄柏提取工艺因数的顺序为提取次数>乙醇的浓度>提取时间>乙醇体积倍数,黄柏的最佳提取工艺为A1B2C2D2,即8倍量的55%乙醇回流提取2次,每次1.5小时.结论 提取次数、乙醇回流浓度是影响黄柏中小檗碱提取的主要因素,该工艺方法 简单,适合工业化生产.     

原花青素的降血糖作用及急性毒性研究

目的 研究原花青素的降血糖作用及其对小鼠的急性毒性.方法 观察原花青素对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血糖及正常大鼠糖耐量的影响;小鼠24 h内4次ig给药,连续观察7 d,用bliss法计算原花青素的半数致死量(LD50).结果 原花青素可明显降低糖尿病大鼠血糖,提高正常大鼠糖耐量(P<0.05)f小鼠ig给药的LD50为2.75 g/kg.结论 原花青素可降低糖尿病模型大鼠血糖,ig给药安全.     

王樟连教授针药结合治疗腰椎间盘突出症经验介绍

王樟连教授是国家级名老中医,浙江中医药大学附属第三医院针灸科主任,教授,主任医师,中国针灸学会理事,中国针灸文献学会理事,浙江针灸学会常务理事、副秘书长。长期从事中医针灸的教学、科研、临床工作,积累了丰富的临床诊疗经验。