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目的研究早产儿视网膜病(ROP)的发生率、高危因素。方法对2010年1~12月南京儿童医院新生儿重症监护室(NICU)收治的符合ROP筛查标准的早产儿,于生后4周或纠正胎龄32周开始由资深眼科医师开始行间接眼底镜检查眼底。结果 178例早产儿发生ROP11例,发生率为6.18%。对178例早产儿行单因素分析得出,胎龄、出生体重、窒息、机械通气、输血史、呼吸暂停、PDA与ROP的发生有相关性(P<0.05)。Logistic回归分析显示出生体重、吸氧、呼吸暂停及机械通气是影响ROP发生的主要因素。结论早产是ROP发生的根本原因,预防早产,防治早产儿的各种并发症、规范氧疗是预防ROP的关键。     

产前应用地塞米松和沐舒坦对胎鼠及仔鼠肺组织Toll样受体4表达影响的比较

目的 比较产前单次应用小剂量地塞米松与联合应用地塞米松加盐酸氨溴索(沐舒坦)对胎鼠及仔鼠肺Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因及蛋白表达的影响. 方法 54只SD孕鼠随机分为3组:地塞米松组(干预组1)、地塞米松加沐舒坦组(干预组2)和生理盐水对照组.妊娠17 d,腹腔注射给药,干预组1予地塞米松0.2 mg/kg,干预组2予地塞米松0.2 mg/kg加沐舒坦100 mg/kg,对照组予等体积生理盐水.分别在妊娠19d及生后3、7d取胎(仔)鼠肺组织,通过逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹技术检测各组胎(仔)肺组织中TLR4基因转录水平及蛋白表达差异.统计学方法 采用方差分析和独立样本t检验. 结果 (1)孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4 mRNA在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.26±0.18,干预组1:0.39±0.21,t=5.866,P＜0.05;对照组:0.27±0.22,干预组2:0.46±0.13,t=9.572,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4 mRNA在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.59±0.23与0.47±0.24,t=2.295,P＜0.05;生后7 d:0.52±0.12与0.35±0.17,t=4.219,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.45±0.22与0.44±0.14,t=0.128,P＞0.05;生后7 d:0.40±0.16与0.36±0.12,t=1.365,P＞0.05).(2)免疫组织化学:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.20±0.29,干预组1:0.35±0.32,t=7.179,P＜0.05;对照组:0.20±0.29,干预组2:0.39±0.25,t=10.764,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.55±0.32与0.37±0.18,t=7.121,P＜0.05;生后7d:0.41±0.29与0.25±0.24,t=6.355,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.40±0.21与0.37±0.18,t=0.683,P＞0.05;生后7 d:0.28±0.31与0.25±0.24,t=0.462,P＞0.05).免疫印迹法:孕19 d,2个干预组分别与对照组相比,TLR4蛋白表达量在胎鼠肺组织中的表达均明显增加(对照组:0.15±0.12,干预组1:0.27±0.20,t=7.835,P＜0.05;对照组:0.16±0.18,干预组2:0.34±0.16,t=10.470,P＜0.01).生后3d和7d干预组2与对照组相比,TLR4蛋白表达量在仔鼠肺组织中的表达均明显增加(生后3 d:0.37±0.20与0.25±0.22,t=6.379,P＜0.05;生后7 d:0.35±0.15与0.24±0.13,t=5.152,P＜0.05),但干预组1与对照组比较,差异无统计学意义(生后3 d:0.32±0.26与0.25±0.16,t=1.167,P＞0.05;生后7 d:0.29±0.19与0.24±0.10,t=1.248,P＞0.05). 结论 小剂量地塞米松可能参与调控大鼠胎肺中TLR4表达的上调,这可能是糖皮质激素促胎肺成熟的重要机制之一;小剂量地塞米松联合沐舒坦产前应用可能不仅参与调控大鼠胎肺组织中TLR4表达的上调,也上调生后大鼠肺中TLR4的表达.     

前白蛋白对重症坏死性小肠结肠炎的诊断价值

目的 了解重症新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)的临床特点,探究前白蛋白(PA)对于重症NEC的诊断价值。方法 对40例NEC新生儿(Ⅱ期29例、Ⅱ期11例)的临床资料及血常规、血生化结果进行研究,采用多因素logistic回归分析以及ROC曲线判断PA在重症NEC诊断中的价值。结果 多因素logistic回归分析发现PA对于重症NEC(≥Ⅱ B期)的诊断具有参考价值。ROC曲线分析显示在重症NEC(≥Ⅱ B期)的诊断中,PA拥有较高的灵敏度(0.870)及特异度(0.647)。结论 PA对重症NEC(≥Ⅱ B期)具有较高的诊断价值。     

产前应用地塞米松对早产仔鼠脑发育的影响

目的 探讨产前孕鼠使用地塞米松不同次数对早产仔鼠脑发育的影响. 方法 孕SD大鼠分为产前地塞米松3剂组(3只):于妊娠第16、17、18天给予地塞米松0.8 mg/(kg·d)生理盐水稀释至4 ml腹腔注射;地塞米松1剂组(3只):于妊娠第16,17天腹腔注射4 ml生理盐水,第18天腹腔注射等体积的地塞米松0.8 mg/(kg·d);对照组(3只):于妊娠第16、17、18天各腹腔注射生理盐水4 ml.孕19 d处死大鼠,取仔鼠称体重及脑重,免疫组织化学法检测脑组织特异性烯醇化酶(NSE)表达,电镜观察脑超微结构.组间差异比较采用ANOVA. 结果 (1)地塞米松3剂组体重、脑重、脑重/体重分别为(1.543±0.052)g、(88.80±7.12)mg和(5.75±0.38)0A,1剂组分别为(1.584±0.035)g、(98.21±3.71)mg和(6.20±0.26)%,均低于对照组[(1.696±0.076)g、(111.53±6.29)mg和(6.59±0.48)%](P<0.01或P<0.05);且地塞米松3剂组低于1剂组(P<0.01或P<0.05).(2)地塞米松3剂组脑皮质及海马区NSE表达强度分别为0.223±0.054和0.192±0.054,1剂组分别为0.381±0.041和0.359±0.046,均低于对照组(0.590±0.064和0.529±0.068)(P均<0.01).(3)地塞米松组早产仔鼠脑超微结构可见神经元核膜断裂、线粒体空泡变性、核仁消失、神经纤维丝断裂. 结论 产前使用地塞米松可损伤早产仔鼠脑发育,且多次使用比单次使用对脑组织的损伤更大.     

表皮生长因子对外周血间充质干细胞原代克隆形成的影响及其传代后多向分化潜能

背景：目前已有很多实验证明外周血中存在间充质干细胞,但由于所用分离筛选方法、培养条件的不同导致了结果的多样性,且实验可重复性较差。目的：观察表皮生长因子对体外分离培养的原代小鼠外周血间充质干细胞克隆形成的影响,以及外周血间充质干细胞传代后的多向分化潜能。设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-10/2008-09在南京医科大学骨与干细胞研究中心完成。材料：雄性成年C57BL/6J小鼠16只,购于南京医科大学骨与干细胞研究中心实验动物中心。重组人表皮生长因子为Sigma公司产品。方法：无菌条件下从小鼠心脏采血,裂解红细胞后应用贴壁法分离外周血间充质干细胞,通过传代进行纯化和扩增。将原代细胞分2组进行体外培养,实验组向α-MEM培养液中加入10μg/L表皮生长因子,对照组给予不含表皮生长因子的α-MEM培养液,16d后行亚甲基蓝染色,计算克隆面积。取第3代外周血间充质干细胞,以1&#215;10^4/cm^2密度接种后,分别向成骨和脂肪方向诱导分化。主要观察指标：外周血间充质干细胞的生长特性,外周血间充质干细胞体外诱导成骨、成脂能力。结果：倒置相差显微镜下,外周血间充质干细胞贴壁生长,形态类似于骨髓间充质干细胞,呈成纤维细胞样;但其形成克隆的时间较骨髓间充质干细胞有所推迟,且原代细胞克隆形成率低于骨髓间充质干细胞;亚甲基蓝染色结果示实验组外周血间充质干细胞克隆形成率明显高于对照组（P〈0.05）。外周血间充质干细胞成骨诱导后,碱性磷酸酶染色、总胶原染色及茜素红染色均呈强阳性;成脂诱导后油红染色呈阳性,有一定数量的脂滴形成。结论：外周血中存在少量的间充质干细胞,能自我增殖,表皮生长因子可有效促进原代外周血间充质干细胞克隆的形成;体外分离培养的外周血间充质干细胞具备成骨和成脂分化特性。     

小鼠非黏附骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的 探讨小鼠非黏附骨髓间充质干细胞(non-adherent bone marrow-derived mesen-chymal stem cell,NA-BM-MSC)在体外、体内尤其是缺血损伤的脑内向神经元样细胞分化的能力.方法 传代纯化后的NA-BM-MSC经表皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子诱导后,通过甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色检测神经元特异性核蛋白和神经中间丝蛋白的表达情况;将来自β-半乳糖苷酶转基因小鼠的NA-BM-MSC在立体定位仪下移植到小鼠缺血损伤的脑内,8周后通过LacZ组织化学染色和免疫组织化学染色检测供体细胞在缺血脑内微环境中存活以及神经元特异性核蛋白的表达情况. 结果 NA-BM-MSC经过诱导能够表达神经元特异性核蛋白和神经中间丝蛋白并有尼氏体形成;移植到损伤脑内后,LacZ组织化学染色发现在缺血侧供体细胞能够存活,免疫组织化学单、双染显示在缺血坏死区及周围都检测到了β-半乳糖苷酶阳性的供体细胞,其中的部分阳性细胞还同时表达神经元特异性核蛋白. 结论 NA-BM-MSC在体外能够分化成神经元样细胞,在小鼠缺血损伤的脑组织内也能够存活、迁移,部分细胞还能分化为神经元样细胞.     

单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液治疗早产儿脑室周围白质软化有效性研究

目的 探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂钠注射液(GM1)在早产儿脑室周围白质软化的治疗效果.方法 将确诊为脑室周围白质软化的56例早产儿分为GMl治疗组30例及对照组26例.在常规治疗的基础上,治疗组另给予GM1治疗,动态观察头颅B超的变化情况并进行随访.结果 经头颅B超的动态观察,治疗组30例均较对照组好转,差异有显著意义(P＜0.01).结论 GM-1可减轻脑室周围白质软化及持续性病变的发生,改善预后.     

早期干预对新生儿缺氧缺血性脑病预后的影响

目的探讨早期干预对中、重度新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿预后的影响。方法将74例中、重度HIE患儿分为干预组(39例)及对照组(35例),两组基本情况差异无显著性。对干预组进行系统的早期干预。结果经3、6、9、12、18、24、36个月随访,干预组平均智能发育指数(MDI)及运动发育指数(PDI)高于对照组(P<0.01);对照组后遗症发生率明显高于干预组(χ2=4.4095,P<0.05);MDI及PDI<80分、语言落后、社交异常干预组患儿明显低于对照组(P<0.05~0.01)。结论早期干预能改善HIE的预后,降低脑瘫及智能发育落后。     

先天性TORCH感染的治疗预后探讨

目的 探讨先天性TORCH感染的预后，提出防治措施。方法 对51例确诊HCMV、HSV、EBV、TOXO感染-甲组(各31、6、1及13例)分别采用α-干扰素(α-IFN)加静脉用人体免疫球蛋白(IVIG)治疗或用螺旋霉素及阿奇霉素治疗。另选30例足月正常新生儿为对照Z组。随访体格、神经系统发育。结果治疗结束后3或6个月复查血清相关TORCH IgM IgG或／和FQ DNA PCR均转阴性。甲组体格发育明显低于正常儿，精神及运动发育各低于乙组22分及21分。小头、智力低下、脑瘫各为9，19，17例。结论 所述疗法对先天性HCMV，HSV，TOXO感染是有效而安全的。血清相关TORCH抗体及FQ DNA PCR治疗后转阴性，但不能完全修复宫内已形成的脑损伤及发育落后。     

新生儿肺出血的早期诊断(附150例临床分析)

本文对我院经确诊的肺出血150例作一分析。原发病中感染及非感染性疾病各占62％及38％，早产儿61．3％，足月儿34．7％，入院体重≤2500g者66．7％，发病于生后1日内者54．7％，～≤7日者34．7％。诱发因素窒息异常分娩、低体温、破肿、感染各占50．7％、34．7％、80％、41．3％、62％。文童根据本组资料从高危因素、临床特点、及早气管插管吸出血性分泌物及胸部X线表现，提供肺出血的早期诊断线索，并对肺出血的预防提出7点意见。