内毒素血症幼年大鼠胃黏膜pS2 TGF-α和PCNA表达变化及意义

目的：胃黏膜上皮的生长、更新和修复的过程是受到严格调控的,其修复能力可能与肽类物质的表达水平有关。该文探讨急性胃黏膜损伤修复中乳癌相关肽（pS2）、转化生长因子-α(TGF-α)及增殖细胞核抗原(PCNA) 的作用。方法：18日龄Wistar大鼠,随机分为实验组（LPS组）和对照组,分别腹腔注射内毒素（5 mg/kg）及生理盐水,每一时相点8只,注射后1.5, 3, 6, 24, 48, 72 h 观察胃黏膜损伤情况,苏木精-伊红染色观察形态学改变,免疫组化SP法检测胃黏膜pS2、TGF-α及PCNA蛋白表达变化。结果：LPS组6 h胃黏膜损伤最重,黏膜表面可见大片糜烂、出血、条索状坏死,与胃纵轴平行;光镜下黏膜表面上皮广泛脱落,黏膜内有出血,炎性细胞浸润,核碎裂、固缩,凋亡小体出现,腺体受损。LPS组的PCNA在3,6,24,48 h 胃黏膜组织细胞核表达较对照组明显减低（P<0.01）;pS2在1.5 h胃黏膜组织细胞浆表达低于对照组,3 h 恢复正常,6,24,48,72 h 明显高于对照组（P<0.01）;TGF-α在6,24,48 h 胃黏膜组织细胞浆表达较对照组明显增强（P<0.01）。结论：PCNA表达变化反映了胃黏膜损伤和修复过程中胃黏膜细胞的增殖活性;pS2表达上调,可能通过介导细胞增殖参与急性胃黏膜细胞保护作用;TGF-α表达增强,可能促进了胃黏膜上皮的代谢和生长,参与胃黏膜的修复。     

卵巢上皮源性肿瘤与Wnt信号途径相关性的研究

目的:研究Wnt信号途径相关蛋白 Wnt-1蛋白、β-连环蛋白(β-catenin)及c-myc蛋白在卵巢上皮源性肿瘤中的表达及意义.方法:应用免疫组化SP法检测26例正常卵巢组织、24例卵巢上皮良性肿瘤及60例卵巢癌的石蜡包埋组织中Wnt-1、β-catenin以及c-myc的表达.结果:Wnt-1在卵巢癌组织组中表达水平与上皮良性肿瘤组和正常卵巢组织组相比,差异有统计学意义,P＜0.05;β-catenin在卵巢癌组织组中的异位表达水平显著高于正常卵巢上皮组织,差异有统计学意义,P＜0.05;β-catenin与卵巢癌的组织学分型及分化程度具有相关性,P＜0.05.c-myc在卵巢上皮癌组织中表达与卵巢上皮良性肿瘤和正常卵巢组织相比,差异有统计学意义,P＜0.05;c-myc与卵巢癌分化程度相关,P＜0.05.在卵巢癌组织中,β-catenin异位表达与c-myc表达有相关性,P＜0.05.结论:Wnt信号可能是卵巢癌演变过程中的重要途径之一,并为卵巢癌的个性化治疗策略提供新的靶点.     

血小板活化因子在幼年大鼠肠道免疫屏障功能损伤中的作用

目的：胃肠功能障碍与严重感染引起的肠屏障功能破坏密切相关。血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)可引起肠损伤。该文应用PAF受体拮抗剂研究PAF对幼年大鼠肠黏膜免疫屏障功能损伤作用。方法：18日龄Wistar大鼠,随机分为LPS组和PAF受体拮抗剂组(预防组和治疗组)及对照组。LPS组和对照组分别腹腔注射内毒素5mg/kg及生理盐水1mL/kg,每一时相点8只,分别于注射后1.5,3,6,24,48,72h取回肠。预防组和治疗组分别于每一时相点注射LPS前、后30min腹腔注射PAF受体拮抗剂BN520215mg/kg。应用双抗体PEG放免法测定肠黏膜中分泌型IgA(secretoryIgA,sIgA)含量。苏木精伊红染色作形态学检查,并称湿(W)干(D)重,按照WD/W,以其%计算湿干比。结果：1.5,3,6,24hLPS组可见回肠绒毛水肿,固有层血管充血,间质淋巴管扩张,肠腔炎性渗出,拮抗剂组仅见绒毛水肿。实验组各时相点湿干比均较对照组升高,拮抗剂组较LPS组略低。LPS组1.5,3,6,24,48hsIgA均较对照组明显降低P<0.01。拮抗剂组各时相点sIgA均较LPS组高,预防组较治疗组sIgA略低。结论：PAF在肠黏膜的免疫屏障功能损伤中起一定作用,预防和治疗性应用PAF受体拮抗剂BN52021可减轻肠损伤。     

姜黄素与卡铂联合用药对鼠卵巢癌转基因细胞系的影响

目的探讨姜黄素与卡铂联合用药对鼠卵巢癌转基因细胞系T1、T2、T3的影响。方法采用MTT法检测卡铂、姜黄素单独及联合用药对鼠卵巢癌转基因细胞系增殖的影响,RT-PCR及Western blot检测各组细胞中K-RAS、PI3K、AKT的表达水平。结果通过MTT法检测细胞增殖抑制率,各浓度卡铂单独作用于鼠卵巢癌转基因细胞系T1、T2、T3的增殖抑制率<30%,与姜黄素联用后,增殖抑制率均>30%(P<0.05),对转染了AKT的T2、T3作用更明显。联合组T1、T2、T3细胞的K-RAS、PI3K(p-PI3K)、AKT(p-AKT)的mRNA及蛋白表达量低于卡铂单用组。结论鼠卵巢癌转基因细胞系T1、T2、T3对卡铂具有耐药性。姜黄素可逆转其对卡铂的耐药性,且对含有AKT的T2、T3作用更加明显。姜黄素的逆转作用可能与抑制K-RAS、PI3K、AKT的表达有关,其也可能直接抑制PI3K/AKT信号通路。     

P-GSK3β、P-Akt在卵巢癌中的表达及与卵巢癌耐药关系的研究

目的：研究磷酸化糖原合酶激酶-3β（P-GSK3β）和磷酸化Akt（P-Akt）蛋白在卵巢上皮癌中的表达情况及其与卵巢癌化疗原发耐药的关系。方法：应用MTT比色分析法检测卵巢癌细胞对紫杉醇（PTX）、表阿霉素（EADM）、顺铂（CDDP）和卡铂（CBP）4种临床常用化疗药物的敏感性。采用免疫组织化学二步法检测10例卵巢上皮良性肿瘤、10例卵巢上皮交界性肿瘤及70例卵巢癌的石蜡包埋组织中P-GSK3β和P-Akt的表达,并分析它们与临床病理因素的关系。结果：65例卵巢癌标本进行体外药敏试验,25例失败,可评价标本为40例。卵巢癌组织中P-GSK3β蛋白的阳性率为57.50%（23/40）,P-Akt蛋白的阳性率为65%（26/40）,二者呈正相关（r=0.535,P〈0.05）。P-GSK3β蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均显著下降,其中CDDP、PTX两种药物的平均抑制率差异均显著（t=2.573和t=2.174;P=0.014和P=0.036）。P-Akt蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均显著下降,其中CDDP、CBP两种药物的平均抑制率差异均显著（z=-2.201和z=-2.298;P〈0.05和P〈0.05）。70例卵巢癌组织中P-GSK3β、P-Akt的阳性表达率分别为60%（42/70）、67.14%（47/70）,二者呈正相关（r=0.546,P〈0.05）;P-GSK3β和P-Akt蛋白在卵巢癌组织组中的表达水平均显著高于卵巢上皮交界性、良性肿瘤,差异有统计学意义,P〈0.05,P-GSK3β蛋白的表达与卵巢癌的分化程度及临床分期密切相关,P〈0.05,而与卵巢癌的组织学分型无显著相关性。P-Akt与卵巢癌的分化程度密切相关,P〈0.05,而与卵巢癌的组织学分型及临床分期无显著相关性。结论：P-GSK3β和P-Akt的过表达在卵巢癌的发展中具有重要的作用,卵巢癌耐药的产生可能与P-Akt结合GSK-3β使其失活有关。     

凋亡相关基因bcl-2和bax在大鼠自体移植静脉中的动态表达及意义

目的　探讨移植静脉中细胞凋亡及相关基因表达的动态变化及意义。方法　建立 10 0只Wistar大鼠自体颈静脉移植于肾下腹主动脉模型。采用原位DNA片断末端标记 (TUNEL)和免疫组织化学法 ,检测移植静脉血管平滑肌细胞 (VSMCs)凋亡及相关基因bcl 2和bax的表达。结果　术后 1～ 8周 ,移植静脉凋亡的VSMCs多于对照静脉 (P<0 .0 1) ;术后 2周为凋亡高峰 ,其凋亡细胞达 ( 2 8.5± 16 .6 ) % ,4～ 8周逐渐下降至 ( 8.1± 2 .8) % ;与对照静脉〔( 0 .5± 0 .2 ) %〕相比差异有显著性意义 (P<0 .0 1)。术后 1～ 2周 ,bcl 2表达增多〔( 2 2 .1± 5 .4 ) %〕 ,与对照组〔( 4 .3± 2 .1) %〕及 4～ 8周组间比较差异有显著性意义 (P<0 .0 1) ;移植后 1～ 6周 ,bax表达显著高于对照组〔( 5 .5± 2 .3) %〕及术后 8周组〔( 8.2± 2 .9) %〕 ,P<0 .0 1。结论　bcl 2与bax基因与移植静脉VSMCs的凋亡密切相关 ;VSMCs凋亡是移植静脉重塑和狭窄的重要因素     

PI3K/Akt信号通路与卵巢癌耐药关系的研究

目的研究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和磷酸化Ak(tp-Akt)蛋白在卵巢上皮癌中的表达情况及其与卵巢癌化疗原发耐药的关系。方法采用免疫组织化学方法检测PI3K和p-Akt蛋白在40例原发性上皮性卵巢癌组织中的表达情况;应用MTT比色分析法检测卵巢癌细胞对紫杉醇(PTX)、表阿霉素(EADM)、顺铂(CDDP)和卡铂(CBP)4种临床常用化疗药物的敏感性。结果65例卵巢癌标本进行体外药敏试验,25例失败,可评价标本为40例。卵巢癌组织中PI3K蛋白的阳性率为60%(24/40),p-Akt蛋白的阳性率为65%(26/40),二者呈正相关(r=0.578,P<0.01)。PI3K蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均下降,耐药率均升高,其中CDDP的平均抑制率差异显著(z=-3.567,P<0.01)。p-Akt蛋白表达阳性组和阴性组相比,化疗药物的平均抑制率均下降,耐药率均升高,其中CDDP、CBP两种药物的平均抑制率差异均显著(z=-2.201和z=-2.298;P<0.05和P<0.05)。结论在卵巢上皮癌组织中,铂类药物的原发性耐药可能与PI3K/Akt信号通路异常活化有关。     

内毒素血症幼年大鼠胃黏膜上皮细胞、壁细胞超微结构变化及血小板活化因子受体拮抗剂对其影响

目的 探讨内毒素血症时幼年大鼠急性胃黏膜损伤、胃黏膜上皮细胞、壁细胞超微结构变化及血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂对其影响.方法 将18日龄Wistar大鼠随机分为对照组、内毒素(LPS)组、PAF受体拮抗剂预防组和治疗组.对照组和LPS组分别腹腔注射生理盐水1 ml/kg和LPS(O55:B5脂多糖)5 mg/kg,PAF受体拮抗剂预防组和治疗组分别于LPS注射前、后0.5 h给予注射PAF受体拮抗剂BN52021(GinkgolideB)5 mg/kg.分别于注射后1.5、3、6、24、48、72 h观察胃黏膜损伤情况,按Guth标准积分计算溃疡指数(UI);HE染色,光镜观察胃黏膜细胞形态学改变;钠、铅双染色透射电镜下观察胃黏膜上皮细胞、壁细胞超微结构变化;计算胃组织湿干比,即(湿重-干重)/湿重.结果 LPS组LPS注射后6h胃黏膜损伤最重,黏膜表面可见大片糜烂、出血、条索状坏死.与胃纵轴平行;UI记分最高,与对照组、预防组、治疗组比较差异均有非常显著性(P＜0.01);光镜下黏膜表面上皮广泛脱落,黏膜内有出血,炎性细胞浸润,腺体受损;电镜下表面上皮细胞细胞间隙增宽,腔膜面破坏,细胞间紧密连接不连续,短小的微绒毛减少,线粒体严重肿胀,嵴断裂甚至消失,呈空泡变性,核固缩、核膜间隙增宽;壁细胞肿胀,盐酸小管扩张,部分有破坏呈空泡样改变,线粒体增多,部分空泡样改变.PAF受体拮抗剂预防组及治疗组改变轻微.结论 内毒素血症时幼年大鼠急性胃黏膜损伤,胃黏膜上皮细胞、壁细胞超微结构发生变化;PAF受体拮抗剂可明显减轻其改变.PAF可能是引起内毒素血症时急性胃黏膜损伤的重要因素.     

自噬及AKT在姜黄素增强卵巢癌细胞卡铂敏感性的机制研究

目的 本实验拟研究蛋白激酶B (AKT)、自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及肿瘤坏死因子受体相关蛋白1 (TRAP1)在姜黄素逆转卡铂耐药中的机制.方法 培养卵巢癌转基因细胞T2,使用质粒法敲减AKT.采用CCK-8法检测细胞增殖,Western blot检测姜黄素及卡铂作用前后各指标的变化....