青蒿琥酯抗人食管癌作用与调控CDC25A、TGFβ有关

目的:观察青蒿琥酯(Art)对人食管癌Eca109细胞株及裸鼠移植瘤的抑瘤作用,探讨Art诱导肿瘤细胞周期阻滞与CDC25A、TGFβ表达的关系。方法:利用MTT法测定不同浓度Art对Eca109细胞及正常人外周血单个核细胞(hPBMC)增殖的影响;流式细胞术(FCM)测定肿瘤细胞的细胞周期变化;观察Art对裸鼠人食管癌移植瘤的抑制情况;RT-PCR方法检测CDC25A mRNA表达情况,Western blot方法检测CDC25A和TGFβ蛋白表达情况。结果:Art能显著抑制Eca109细胞的增殖,IC50为(68.80±0.76)μmol/L,而对hPBMC的增殖则没有明显抑制作用。低浓度Art可将细胞阻滞于G0/G1期,S期细胞显著减少,当浓度达到100μmol/L时,Art可将细胞阻滞于G2/M期。Art各用药组肿瘤的体积及质量均明显小于模型组,体积抑瘤率最高可达76.4%,质量抑瘤率可达63.2%。Art可显著抑制Eca109细胞CDC25A mRNA及蛋白表达,同时显著上调TGFβ的蛋白表达水平。结论:Art可抑制肿瘤细胞生长,其机制可能为通过上调TGFβ的表达来抑制CDC25A的表达,进而调控细胞周期。     

食管上皮癌变过程中端粒长度、hTERT含量的定量研究

目的:研究端粒DNA长度、hTERT蛋白定量表达与食管上皮细胞癌变的关系。方法:对84例食管上皮脱落细胞分别应用流式荧光原位杂交检测端粒DNA长度,细胞免疫荧光流式定量法检测hTERT蛋白含量。结果:①正常食管上皮脱落细胞组、重度增生组和癌组增殖指数(PI)分别为11.51±4.08,19.04±5.39和29.46±5.50,癌组细胞增殖活性显著高于重度增生组(P<0.01),重度增生组高于正常组(P<0.01),PI值与细胞学分级呈正相关(r=0.80,P<0.01)。②正常食管上皮脱落细胞组、重度增生组和癌组的端粒长度Q-FISH值分别为50.83±8.86、36.96±8.02和27.81±6.59,癌组端粒长度明显短于重度增生组(P<0.01),重度增生组短于正常组(P<0.01)。端粒长度与细胞学分级呈负相关(r=-0.73,P<0.01)。③正常组、重度增生组和癌组hTERT蛋白荧光指数(FI)分别为0.95±0.14、1.47±0.22和1.75±0.19,癌组hTERT蛋白含量高于重度增生组(P<0.01),重度增生组高于正常组(P<0.01)。hTERT含量与细胞学分级呈正相关(r=0.81,P<0.01)。重度增生组和癌组hTERT蛋白阳性表达率分别为91.43%(32/35)和96.77%(30/31),二者都明显高于正常组(P<0.01)。结论:端粒DNA长度缩短、hTERT蛋白含量升高与食管上皮癌变密切相关。     

尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞凋亡及Survivin和Caspase-3表达的影响

目的:观察环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响,研究其对凋亡抑制蛋白Survivin和Caspase-3表达的影响,探讨尼美舒利诱导Eca-109细胞凋亡的作用机制.方法:尼美舒利作用Eca-109细胞后,MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;电子显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测Eca-109细胞Survivin mRNA表达变化,Western blot检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化.结果:尼美舒利(50～400μmol/L)对Eca-109细胞生长有抑制作用,随浓度升高、时间延长抑制作用增强,并诱导Eca-109细胞凋亡,呈剂量-时间效应关系;尼美舒利可降低Survivin mRNA和蛋白表达,增加Caspase-3蛋白表达.结论:尼美舒利可诱导人食管癌细胞株Eca-109凋亡,其机制可能与下调Survivin表达及激活Caspase-3表达有关.     

青蒿琥酯抗食管鳞癌作用机制的研究

目的探讨细胞分裂周期素25A(CDC25A)在食管癌发生发展中的作用及青蒿琥酯(Art)抗食管癌作用和机制。方法利用RT-PCR方法检测44例临床上同个体食管癌、癌旁组织、正常黏膜中CDC25AmRNA的表达。建立食管癌荷瘤裸鼠动物模型,腹腔注射药物,用药两个疗程结束后2d处死裸鼠,取出瘤组织,分两份,一份采用流式细胞术检测细胞周期和CDC25A蛋白的表达,一份用于RT-PCR检测瘤组织中CDC25AmRNA的表达水平。结果RT-PCR方法检测结果CDC25A在食管癌组织中表达较正常黏膜高。动物实验结果显示,Art组裸鼠移植瘤的体积及体质量小于对照组,Art组与对照组相比细胞周期在G0～G1期高,S期明显减少(P<0.05),而且CDC25AmRNA及蛋白值低于对照组(P<0.05)。结论Art具有抑制食管癌生长的作用,CDC25A在Art抗食管癌作用中起一定作用,使食管癌组织中CDC25A下降而使肿瘤细胞停滞在G0～G1期,从而起到抑瘤作用。     

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette transporer G2,ABCG2)基因在食管癌组织中的表达及其意义。方法采用RT-PCR方法检测44例原发性食管癌患者的癌组织、癌旁组织(距离癌2cm)及食管切缘正常黏膜(距离癌5cm以上)ABCG2的mRNA表达。结果ABCG2在食管癌原发灶组织中有较高程度的表达,其表达量为0.77±0.11,而正常食管黏膜中的表达量为0.66±0.12;其在食管癌中的表达显著高于正常黏膜(P<0.01)。ABCG2在低分化鳞癌中的表达显著高于中-高分化鳞癌(P<0.05)。食管癌中ABCG2在年龄和性别间表达无显著性差异(P>0.05)。结论ABCG2在食管癌组织中高表达可能在某种程度上参与了食管癌原发性耐药及化疗中多药耐药的形成。其可作为一种新的引起多药耐药的分子,指导临床上食管癌的化疗。     

CK1δ与COX-2在食管鳞状细胞癌的表达及其意义

目的：探讨CK1δ与COX-2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达与食管癌临床病理特征之间的关系。方法：用免疫组织化学方法（SP法）检测了63例食管鳞状细胞癌手术切除的癌组织、癌旁组织（30例正常食管上皮、19例羟度不典型增生、14例重度不典型增生组织）中的CK1δ与COX-2的蛋白的表达。并采用流式细胞术对其中随机选取的40例癌组织、18例轻度不典型增生组织、12例重度不典型增生组织和20例正常食管上皮组织进行上述两种蛋白的定量分析，采用SPSS11．5软件进行统计学处理。结果：在正常食管上皮组织中CK1δ和COX-2蛋白的表达显著低于轻度不典型增生组织、重度不典型增生组织和癌组织（P〈0．01），轻度不典型增生组织显著低于癌组织（P〈0．01），轻度不典型增生组织与重度不典型增生组织比较差异无显著（P〉0．05）．重度不典型增生组织和癌组织的比较差异无显著性（P〉0．05）。在癌组织中。淋巴结转移组中CK1δ蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组（P〈0．01）．CK1δ蛋白的表达与分化程度和有无纤维膜的侵及无关（P〉0．05）；淋巴结转移组中COX-2蛋白的表达显著高于无淋巴结转移组（P〈0．01），有纤维膜侵及组中COX-2蛋白的表达显著高于无纤维膜侵及组（P〈0．01），COX-2蛋白的表达与分化程度无关（P〉0．05）。在食管鳞癌组织中CK1δ蛋白与COX-2蛋白之间呈显著正相关（r=-0．482，P〈0．01）。结论：CK1δ、COX-2蛋白的异常表达可能共同参与了食管鳞癌的发生、发展与转移，有望成为评价食管癌恶性程度和转移的指标。     

Livin蛋白在表皮肿瘤中的表达及其意义

[目的]观察Livin蛋白在皮肤基底细胞癌、脂溢性角化病等表皮肿瘤中的表达情况。[方法]采用免疫组化和流式细胞术检测Livin蛋白在30例脂溢性角化病和15例皮肤基底细胞癌皮损中的表达情况,以20例正常皮肤组织作为对照。并采用流式细胞术对标本进行Livin蛋白定量分析。[结果]Livin蛋白在基底细胞癌中表达（86．67％）高于在脂溢性角化病组织（53．33％）和正常皮肤组织（5％）的表达（P〈0．05）,在30例脂溢性角化病皮损中,Livin蛋白阳性表达量高于在正常20例皮肤组织中的表达（P〈0．05）。[结论]脂溢性角化病和皮肤基底细胞癌的发生发展可能与Livin蛋白的异常表达有关。     

Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ在脂溢性角化病中的表达及其意义

目的：观察Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在皮肤脂溢性角化病（ＳＫ）皮损中的表达情况,探讨其发病机制及与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化的方法联合检测Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在３０例ＳＫ皮损中的表达情况,并以２０例正常皮肤组织作为对照。结果：在３０例ＳＫ皮损中,１９例Ｓｕｒｖｉｖｉｎ蛋白阳性表达,正常２０例皮肤组织中无１例表达,有显著性差异（Ｐ＜０.０５）;３０例ＳＫ皮损中,１７例ＰＴＥＮ阳性表达,正常２０例皮肤组织中１３例ＰＴＥＮ表达,二者差异无显著性（Ｐ＞０.０５）。Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在ＳＫ中的的表达与患者年龄、皮损大小、病程长短有关（Ｐ＜０.０５）,而与患者性别、发病部位、皮损数目无关（Ｐ＞０.０５）;Ｓｕｒｖｉｖｉｎ和ＰＴＥＮ蛋白在ＳＫ中的的表达呈显著负相关（Ｐ＜０.０５）。结论：ＳＫ的发生可能与Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因表达上调有关;ＰＴＥＮ基因表达可能参与了ＳＫ的保护,二者之间在ＳＫ的发生发展中可能存在拮抗作用。检测二者有一定的参考价值。     

细胞周期及其相关蛋白在食管上皮癌变中的 表达及其意义

 目的研究细胞周期调控因子细胞分裂周期素25A(cell division cycle 25 A,CDC25A )、转化生长因子-β（transforming growth factor-β, TGF-β）和Smad3蛋白在食管上皮癌变过程中的表达及其意义。方法利用流式细胞术检测38例同个体的食管癌、食管正常黏膜组织的细胞周期以及CDC25A、TGF-β、Smad3蛋白的表达。结果流式细胞术结果显示,食管癌与正常黏膜相比,增殖指数 (proliferation index,PI)显著增高（P<0.05）,CDC25A蛋白显著增高（P<0.05）,TGF-β、Smad3蛋白显著下降（P<0.05）。这些蛋白的表达量与年龄和性别无关（P>0.05）,与组织学分级有关,低分化鳞癌与中高分化鳞癌相比,CDC25A蛋白显著增高（P<0.05）,TGF-β、Smad3蛋白显著下降（P<0.05）。结论CDC25A、TGF-β、Smad3的表达失衡与食管癌的发生有密切关系,可作为食管癌的诊断指标。     

表皮肿瘤survivin和PTEN蛋白的表达及其意义

目的观察survivin和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌（BCC）、脂溢性角化病（SK）等表皮肿瘤中的表达情况,探讨其发病机制。方法采用免疫组化和流式细胞术检测survivin和PTEN蛋白在30例SK和15例皮肤BCC皮损中的表达情况,并以20例正常皮肤组织作为对照。结果（1）在30例SK皮损中,19例survivin蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中无1例表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;30例SK皮损中,16例PTEN蛋白阳性表达,正常20例皮肤组织中14例有PTEN表达,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）在15例BCC中,13例survivin蛋白阳性表达,高于正常组织（20例中均无survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中19例有survivin蛋白阳性表达）（P〈0.05）;而PTEN蛋白仅在4例BCC中有表达,低于正常组织（20例中有13例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）和SK（30例中有17例PTEN蛋白阳性表达）（P〈0.05）。（3）survivin和PTEN蛋白在SK、BCC中的表达呈显著负相关（r=-0.546,P〈0.05）。结论皮肤SK和BCC的发生、发展可能与survivin基因和PTEN基因的异常表达有关。