安氏隐孢子虫热休克蛋白编码基因的克隆、表达和分析

目的 克隆、表达和分析安氏隐孢子虫Mr 70 000热休克蛋白（CaHSP70） 的部分编码基因。 方法 依据公布的CaHSP70基因序列设计引物，以江苏徐州安氏隐孢子虫（XZ-BOV）总RNA为模板，反转录PCR（RT-PCR）扩增目的编码基因。PCR产物经TA克隆后，亚克隆入pET28a原核表达载体，构建重组质粒pET28a-CaHSP70，转化感受态大肠埃希菌BL21（DE3），异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达并获得纯化的重组蛋白（简称为rCaHSP70）。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、蛋白质印迹（Western blotting）和ELISA对该重组蛋白进行分析和鉴定。采用相关生物信息学软件对序列进行分析。 结果 根据克隆的目的基因序列推导的氨基酸序列与GenBank登录的CaHSP70一致。SDS-PAGE和Western blotting分析显示，重组蛋白（rCaHSP70） Mr约为43 000（含6个组氨酸），以包涵体的形式存在，可被辣根过氧化物酶标记的抗组氨酸抗体、安氏隐孢子虫感染的小鼠血清、微小隐孢子虫感染的儿童血清和rCaHSP70免疫小鼠血清识别。rCaHSP70存在多个功能位点和潜在的抗原决定簇。种系发生分析表明XZ-BOV与安氏隐孢子虫进化关系最近。ELISA检测结果表明，rCaHSP70免疫的C57BL/6小鼠与BALB/c小鼠血清特异性抗体滴度均显著高于免疫前。 结论 XZ-BOV HSP70部分编码基因的克隆获得成功，研究获得的重组蛋白具有一定的免疫原性和免疫反应性。     

William综合征2例

Ｗｉｌｌｉａｍ综合征是一种较为少见的先天性心脏病。 1991年 6月至 2 0 0 1年 12月我们手术治疗 2例 ,效果满意 ,现报道如下。临床资料　病例 1,男 ,13岁。自幼发现心脏杂音。查体 :主动脉瓣区闻及ＩＶ Ⅵ喷射性收缩期杂音。辅助检查 :心电图示左室肥厚 ;Ｘ线检查大致正常 ;心脏彩超报告 ,主动脉瓣上重度狭窄 (跨瓣压差 10 2ｍｍＨｇ)。病例 2 ,男 ,16岁。自幼发现心脏杂音。查体 :主动脉瓣区闻及ＩＶ Ⅵ杂音 ,伴震颤。辅助检查 :心电图、胸片大致正常 ;心脏彩超示主动脉瓣上局限性环型狭窄 ,跨环压差 92ｍｍＨｇ(1ｍｍＨｇ =0 133ｋＰａ…     

微小隐孢子虫卵囊DNA提取及用于PCR检测

目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法 微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因序列(L16996)设计一对寡核苷酸引物,分别对3种方法制备模板进行PCR扩增分析。Chelex-100提取的DNA也用于观察PCR检测的敏感性。结果3种方法制备的微小隐孢子虫卵囊模板用于PCR检测均获得1条446 bp条带,Chelex-100提取的DNA用于PCR检测的敏感性至少达0.5个卵囊。结论3种方法提取的微小隐孢子虫卵囊DNA均可用于PCR检测,Chelex-100法是一种高效而快速的微量提取DNA方法,适用于对隐孢子虫DNA的检测。     

姜黄素在大鼠心肌缺血再灌注中的作用研究

目的观察姜黄素在大鼠心肌缺血再灌注中的作用及效果。方法建立在体大鼠心脏缺血再灌注模型,将60只大鼠随机分成3组:缺血再灌注(IR)组、姜黄素(CUR)组、空白对照(CON)组。测定各组血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的浓度。结果与IR组比较,姜黄素有明显保护缺血再灌注心肌的作用,CUR组血清中CK、LDH的浓度明显降低(P0.05)。结论姜黄素在心肌缺血再灌注中能起到一定的保护作用。     

非ST段抬高急性冠脉综合征早期介入治疗前应用替罗非班的临床研究

目的：探讨盐酸替罗非班对非ST段抬高急性冠脉综合征（NSTE-ACS）患者早期介入治疗的疗效和安全性。方法：选择NSTE-ACS的中高危患者95例,随机分为替罗非班试验组（n=48）和对照组（72=47）,均于入选后72h内接受早期PCI治疗。比较两组间基础临床资料、PCI前后病变血管血流TIMI分级、术后12h血清肌钙蛋白（cTnT）和肌酸激酶同工酶（CK—MB）水平、出血事件和血小板减少以及30d主要心血管事件（MACE）的发生率。结果：试验组和对照组最终分别入选了47例和44例患者。两组间基础临床资料无统计学差异,试验组应用替罗非班后PCI术前病变血管前向血流达到TIMI3级的比率高于对照组（61．7％VS47．7N,P〈O．05）,术后TIMI3级血流获得率试验组较对照组高（95．7％VS88．6％）,但未达到统计学差异;术后试验组cTNT和CK－MB升高发生率较对照组明显减低（10．6％VS20．5％,P〈0．05）。两组出血事件和血小板减少以及30dMACE发生率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：NSTE-ACS患者早期介入治疗术前应用盐酸替罗非班是安全有效的,能够提高PCI术前病变血管前向血流,并减少PCI术后的心肌损伤。     

T载体的构建及日本血吸虫肌动蛋白基因PCR产物的快速克隆

目的构建快速高效克隆PCR产物的克隆载体(T载体),并对日本血吸虫肌动蛋白全长编码基因PCR产物进行快速克隆.方法日本血吸虫肌蛋白全长编码基因的扩增采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法.质粒pGEM5Zf ( )经限制性内切酶EcoR V 酶切,在仅含有脱氧胸苷三磷酸(dTTP)的PCR缓冲液中于70 ℃作用2 h,在每个片段的3'端加上一个脱氧胸苷(dT)碱基,构建成T载体.根据PCR扩增产物3'端存在一个非模板依赖的脱氧腺苷(dA)原理,将扩增产物直接克隆入T载体并测序.结果阳性克隆经琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切分析、PCR及DNA序列测定等均证实克隆获得成功,且效率很高.与曼氏血吸虫肌动蛋白比较,核苷酸和推断的氨基酸的同源性分别是92.5%和99.7%.结论构建的pGEM5Zf-T载体对日本血吸虫肌动蛋白编码基因的PCR产物直接克隆既经济、简便,又快速、高效,所构建的T载体由于在插入位点两侧具有pUC/M13测序引物序列,可直接测定重组质粒中插入片段的核苷酸序列.所获得的日本血吸虫(大陆株)肌动蛋白编码基因与曼氏血吸虫有极高的同源性.     

颈动脉粥样硬化超声检查在脑梗死患者诊治中的应用

目的 探讨颈动脉粥样硬化超声检查在脑梗死患者诊治中的应用.方法 选择临沂市人民医院2017年10月至2019年12月期间确诊的脑梗死患者70例为超声组,选择同期体检健康者70例为对照组,对两组进行颈动脉粥样硬化超声检查,比较两组斑块检出情况,并对两组斑块形状、血流参数、颈动脉狭窄程度进行比较.结果 超声组患者检测出斑块...     

粟粒性脑结核病的MRI特征

目的 回顾性总结和分析粟粒性脑结核病的MRI表现特点。方法 对22例粟粒性脑内结核病患者的MRI特点，包括病灶大小，形态，分布情况及MR平扫与增强扫描的区别进行回顾性总结分析。结果 粟粒性脑结核多发生于大脑半球灰白质交界区，病灶直径≤3mm,平扫多不能显示，钒喷替酸葡甲胺（GD-DTPA）增强扫描呈明显结节状强化。结论 MR增强检查是早期发现粟粒性脑结核病的有效方法。     

医学职称英语考试模拟试题(8)

Ｉ.阅读理解 :阅读下列短文 ,然后回答文章后面的问题 ,从四个供选择的答案中挑出正确的一个。Ａｌｌｅｒｇｙｓｈｏｔｓ’ｂｅｎｅｆｉｔｓｍａｙｌａｓｔｙｅａｒｓＨａｙｆｅｖｅｒｓｕｆｆｅｒｅｒｓｗｈｏｔａｋｅａｌｌｅｒｇｙｓｈｏｔｓｆｏｒｓｅｖｅｒａｌｙｅａｒｓｍａｙｓｔａｙｓｎｅｅｚｅ ｆｒｅｅｌｏｎｇａｆｔｅｒｔｈｅｓｈｏｔｓｓｔｏｐ ,ａｓｔｕｄｙｓｈｏｗｓ Ｔｈｅｓｔｕｄｙ ,ｉｎＴｈｕｒｓｄａｙ’ｓＮｅｗＥｎｇｌａｎｄＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ ,ｉｓｅｖｉｄｅｎｃｅｔｈａｔｔｈｅｏｌｄ ｆａ…     

妊娠高血压综合征患者的剖宫产问题探讨

妊娠高血压综合征（妊高征）是产科常见的并发症，若处理不当，母婴均可发生意外。近年来，以剖宫产终止妊娠逐渐成为治疗的重要手段。2002-2004年，我院收治142例妊高征患者，其中以剖宫产终止妊娠的39例，治疗体会报告如下。