TNF-α对凝血酶引起的肥大细胞蛋白酶激活受体表达的影响

目的:探讨TNF-α对凝血酶引起的P815肥大细胞上蛋白酶激活受体表达的影响。方法:用或不用TNF-α预处理肥大细胞后,以不同浓度凝血酶激发P815肥大细胞,用流式细胞术检测肥大细胞上PAR-1,2,3,4表达的变化情况。结果:TNF-α不影响凝血酶作用肥大细胞P815后PAR-1表达;TNF-α预处理后凝血酶作用肥大细胞P815后,PAR-2,3,4表达较基础培养液对照组和非TNF-α处理组增强。结论:促炎因子TNF-α能够调节凝血酶引起的肥大细胞PAR表达进而参与肥大细胞相关的炎症反应。     

沈阳农村支气管哮喘临床特点与用药情况流行病学调查

目的 了解沈阳农村支气管哮喘临床特点与用药的流行病学情况。方法 以随机抽样方法，抽取31965人，根据病史、体征、肺功能检查诊断哮喘患。单因素分析用于评价哮喘的危险因素。结果 人群总累积患病率为1．933％(618：31965)，男女比例为1：1．58；农村哮喘患的主要症状为阵发性喘息、咳嗽、夜间干咳和憋气；部分患肺部可闻及哮鸣音，少数患可闻及湿啰音；肺功能损害轻度、中度和重度分别为31．1％、33．0％和35．9％。618名哮喘患中，56．0％服用平喘药，8．4％用青霉素等抗生素治疗；平喘药以喘静、茶碱和百喘朋为主，抗炎治疗则以含激素的七种药物粉末最为常见。结论 我国北方农村地区支气管哮喘的临床特点与用药情况的有关资料可为今后哮喘的群防群治及相关研究提供依据。     

德国小蠊变应原BgGSTD1的抗原表位特征及三维结构建模

目的:通过生物信息学方法了解德国小蠊变应原BgGSTD1的结构特征,为蟑螂变态反应性疾病的诊断和治疗提供线索.方法:在NCBI数据库中获得BgGSTD1蛋白序列,Blast得到其相似序列,并应用Clustalx 1.83构建同源进化树,联合应用DNA Star多种方法预测其抗原表位,在Scan Prosite数据库中进...     

一种高效表达和快速纯化重组人IL-10的原核载体系统

目的 探讨一种在大肠杆菌中高效表达和简单纯化重组人白细胞介素10(IL-10)的方法。方法 构建重组人IL-10表达载体pBAD／Thio-TOPO-IL10，它编码1个Mr34700融合蛋白即硫氧还蛋白-IL10。含表达质粒pBAD/Thio-TOPO-IL10的工程菌经阿拉伯糖诱导、37℃培养，上述融合蛋白得到表达，表达产物经固化Ni^2 树脂亲和层析纯化，用肠激酶从融合蛋白中切下靶蛋白IL-10。结果 硫氧还蛋白-IL10融合蛋白在大肠杆菌中的表达效率达50%，并且可从细菌粗提物中一步纯化融合蛋白。结论 它为大批量用细菌表达真核蛋白及纯化提供了一种快速简便而又切实可行的方法。     

葎草及豚草过敏原嵌合基因的创建及其抗原性评价

目的 构建一种嵌合过敏原，同时保有葎草和豚草过敏原的特征，而其抗原性得到改变。方法 以业经克隆到葎草和豚草过敏原基因片段的混合物为模板，利用桥式PCR和重叠引物法，扩增得到嵌合基因，利用测序、蛋白表达及抗原性分析软件对所得嵌合基因编码蛋白与MHCⅡ类分子的结合表位进行评价。结果 通过以上方法获得嵌合基因3例，序列分析表明，3例嵌合基因AL03-1、AL03-2及AD03-4分别与原始克隆LCM9、LCS13（LCM20）及D03具有较高的同源性，而其抗原性分别比相似的原始克隆略强、略强及明显增强，融合表达带型与原始克隆的也基本一致。结论 采用桥式PCR及重叠引物法，嵌合基因及其表达载体得到成功构建，所得的嵌合基因将满足不同体质或不同免疫力的人群、不同免疫治疗阶段的脱敏治疗的临床需要。     

白细胞介素10超家族的研究进展

白细胞介素 10 (IL 10 )是一种具有抗炎和免疫调节作用的细胞因子。最近发现的IL 19、 2 0、 2 2、 2 4、 2 6、 2 8和 2 9等与IL 10具有相似的结构 ,它们同属于一个IL 10相关的细胞因子超家族。但其功能各异 ,IL 2 0诱导角质细胞增殖 ,与牛皮癣的发生有关 ;IL 2 2诱导急性期反应蛋白的表达 ;IL 2 4对肿瘤生长有抑制作用 ;IL 2 8和IL 2 9具有抗病毒活性 ;而IL 19和IL 2 6的功能还有待进一步研究。这些细胞因子可能在炎症、变态反应性疾病及肿瘤等的治疗方面有着潜在的应用前景     

GM-CSF对肥大细胞P815蛋白酶激活受体表达的影响

目的 蛋白酶激活受体(PARs),为G蛋白偶联受体(GPCR)家族中的新成员,参与过敏反应的发生,粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)具有调节免疫应答的功能,然而GM-CSF对肥大细胞PARs表达的影响还不甚清楚.因此本研究探讨GM-CSF对肥大细胞P815 PARs表达的影响情况.方法 肥大细胞P815激发后,收集各时间点的细 .胞.细胞处理后采用实时定量PCR和流式细胞术的方法在信使核糖核酸(mRNA)和蛋白水平检测PAR-1、PAR-2、PAR-3和PAR-4表达情况.结果 GM-CSF上调PAR-2蛋白和mRNA在肥大细胞P815上的表达;GM-CSF上调PAR-1和PAR-3 mRNA在肥大细胞P815的表达;GM-CSF抗体的应用可以阻断GM-CSF对PARs蛋白表达的调节作用.结果 GM-CSF能够调节肥大细胞PARs表达,二者可能在过敏反应和炎症中存在更加复杂的相互作用.     

类胰蛋白酶的检测及临床意义

类胰蛋白酶是主要由肥大细胞分泌的一种炎症介质,具有多重生物活性效应,可启动多种疾病反应的进程,并与其发生和发展有关.在很多肥大细胞相关疾病中,血清类胰蛋白酶都伴随肥大细胞的脱颗粒过程而升高.检测此类疾病时类胰蛋白酶血清水平的变化,有望为疾病的临床诊断和治疗提供重要的依据.     

革兰阳性菌肽聚糖对人嗜碱性粒细胞中TLR3、TLR9mRNA的上调作用

目的:探讨Toll样受体(TLR)的配体肽聚糖(PGN)、聚肌苷酸_聚胞苷酸(PolyI_C)、脂多糖(LPS)和含有去甲基化的寡核苷酸序列(CpGDNA)对嗜碱性粒细胞中TLR2～4和TLR9mRNA表达的调节作用。方法:用实时定量_逆转录聚合酶链反应检测PGN、PolyI_C、LPS和CpGDNA刺激人嗜碱性粒细胞系(KU812)后,TLR2～4和TLR9mRNA表达的变化。结果:PGN刺激KU812细胞后,TLR3和TLR9mRNA的表达与未刺激组比有统计学意义(P<0.05);而PolyI_C、LPS和CpGDNA刺激KU812细胞后,细胞中TLR2～4和TLR9的mRNA与未刺激组比无统计学意义(P>0.05)。结论:革兰阳性菌的感染可能增加人嗜碱性粒细胞对病毒或其它细菌感染的敏感性。