异常糖链糖蛋白在肿瘤发生发展中的作用及检测进展

异常糖链糖蛋白是蛋白质糖基化异常——糖蛋白糖链结构或糖基转移酶活性的变化而形成的,蛋白质翻译后加工修饰异常与疾病发生、发展存在密切关系,而在多种多样的蛋白质翻译后加工中,糖基化修饰是最普遍的一种,糖基化生物合成状态比蛋白质的改变能更有效地提示疾病状态。因此,异常糖链糖蛋白检测使肿瘤在发生早期即可作出诊断,并为疾病进展的动态监测提供可能。     

急性白血病并发弥散性血管内凝血患儿早期及干预后血凝指标变化

目的:探讨急性白血病(AL)患儿并发弥散性血管内凝血(DIC)早期及干预后血凝指标变化。方法:本实验分3组即健康对照组;AL组;AL并发DIC组,均于清晨抽取空腹血检测D-二聚体(DD)、纤维蛋白原水平(FBG)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)。对AL并发DIC组患儿应用低分子肝素治疗,比较治疗前后各指标变化,采用SPSS10.0软件将各组进行统计学分析。结果:AL组与健康对照组比较,PT延长,FBG降低,DD明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),AL并发DIC组与AL组比较,DD明显升高,AT-Ⅲ降低,差异有统计学意义(P<0.05),且与AL组相比,AL并发DIC组DD、AT-Ⅲ阳性率明显升高,且在DIC发病的不同临床阶段均保持在较高水平(80%以上),DD检测阳性率在血栓形成期高达100%。经肝素抗凝治疗后,AT-Ⅲ及FBG明显升高,DD降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AL并发DIC患儿存在凝血、纤溶系统的激活,AT-Ⅲ及DD可作为DIC早期诊断的指标,低分子肝素应用有助于改善DIC患儿的预后。     

干扰素α-2b对人类早幼粒白血病细胞株HL-60细胞的抑制增殖与促进凋亡的作用

背景:儿童急性白血病复发的主要根源是微小残留白血病细胞的存在,在试图清除微小残留病的众多治疗方法中,免疫生物治疗越来越受重视。以前的研究发现干扰素α-2b能有效抑制神经母细胞瘤和恶性淋巴瘤患儿体内肿瘤细胞的增长,其能否抑制白血病细胞的增长?目的:通过体外实验观察干扰素α-2b对白血病细胞的影响。设计:以人类早幼粒白血病细胞株HL-60为观察对象,对比观察实验。单位:青岛大学医学院附属医院儿科研究所细胞培养室、免疫实验室、细胞室。材料:HL-60细胞系由山东省医学科学院基础所提供。干扰素α-2b购自Megagene公司,FITC-兔抗鼠Ig工作液(CatEK001)和CD13抗人单克隆抗体工作液(Cat.DK013Y)购自协和干细胞基因工程有限公司。方法:体外建立HL-60细胞培养体系,调整细胞浓度为1×10~9 L~(-1),分为对照组和实验组,各实验组中加入终含量分别为5×10~5,1×10~6,2×10~6,5×10~6,1×10~7U/L的干扰素α-2b,对照组加入等量生理盐水,继续培养48 h。光镜下采用瑞氏染色观察HL60细胞的形态变化,采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞凋亡,通过CD13蛋白表达测定观察细胞膜抗原表达及成熟分化,通过MTT实验检测HL-60细胞增殖活性。主要观察指标:根据HL-60细胞核染色质是否均匀一致及着色情况,判断细胞是否发生凋亡;根据酶标仪检测的吸光度(A值)判断HL-60细胞增殖情况;根据CD13阳性细胞数量判断HL-60细胞成熟程度。结果:①HL-60细胞凋亡:培养48h,当干扰素α-2b为5×10~5U/L时,以早期凋亡细胞为主,当干扰素α-2b含量为1×10~7 U/L时,以晚期凋亡细胞为主,HL-60细胞凋亡率均高于对照组,差异有显著性意义(X~2= 23.79.29.57,P<0.01)。②HL-60细胞增殖情况:当干扰素α-2b含量为2×10~6 U/L和1×10~7 U/L时,A值均低于对照组,差异有显著性意义(t=5.65,11.31,P<0.01)。③HL-60细胞成熟程度:当干扰素α-2b含量为1×10~6U/L和1×10~7 U/L时,CD13~ 细胞百分比均低于对照组,差异有显著性意义(x~2=6.89,14.73,P<0.01)。结论:干扰素α-2b有促进HL-60细胞凋亡、抑制HL-60细胞增殖和促进分化成熟的作用。     

同型半胱氨酸对人单核细胞组织因子表达的影响

目的：探讨同型半胱氨酸(HC)是否诱导人外周血单核细胞(Mn)表达组织因子(TF)，并且观察叶酸对其作用的影响。方法：将Mn暴露于不同浓度HC、叶酸一定时间后，采用RT—PCR、流式细胞术和Western Blot检测其TF表达。结果：HC可以诱导Mn表达TF，并且呈时间和剂量依赖性，而且这种诱导作用不能被叶酸抑制。结论：HC可以诱导Mn表达TF，从而在血栓形成中起重要作用。     

精神行为异常、行走不稳、昏迷

1　病例摘要患者 ,男性 ,2 3岁 ,农民。因间歇性精神行为异常、行走不稳 3个月 ,加重 5天 ,昏迷 2天于 2 0 0 1年 3月 2 4日入院。患者于 3个月前受凉后出现低热 ,体温 38℃ ,伴咽痛、头胀痛 ,按急性上呼吸道感染治疗 ,口服感冒药 7天后体温正常 ,症状好转。 15ｄ后出现行为异常 ,头顶被子 ,口中自语 ,走路不稳 ,不能与家人进行交谈 ,遂就诊于精神病院 ,诊为“精神分裂症” ,给予 5 氟利多、奋乃静等。症状略好转 ,能与家人作交谈 ,但行走时呈轻度醉酒步态 ,双手不自主震颤 ,饮食少 ,治疗 15ｄ后停药。入院前 5天患者头顶被子在卧室内行走 …     

组织因子途径抑制物2抑制卵巢癌细胞浸润转移的体外研究

组织因子途径抑制物 2 (TFPI 2 )是新近发现的一种相对分子质量为 32 0 0 0的丝氨酸蛋白酶抑制物 ,在维持细胞外基质 (ECM )结构完整 ,调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。本研究将TFPI 2基因真核表达载体转染卵巢癌细胞株A2 780细胞 ,探讨其对卵巢癌细胞体外浸润转移能力的影响。一、材料和方法1.材料 :RPMI 16 4 0 ,新霉素G4 18,Trizol试剂 ,脂质体转染试剂盒Lipofectamine 2 0 0 0购自美国Gibco公司 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)一步法试剂盒购自美国Promega公司 ,基质胶Matrigelmatrix购自美国BD公司。TFPI 2真核表…     

半相合供者淋巴细胞输注抗急性非淋巴细胞性白血病的实验研究

目的 :阐明半相合供者淋巴细胞 (HRDLs)体外抗急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)的机制。方法 :通过预实验 ,确定白血病细胞培养过程中加入HRDLs产生移植物抗白血病效应 (GVL)的最佳时间及最佳浓度 ,并在此条件下检测白血病细胞培养过程加入去CD8+ 和去CD4 + HRDLs后白血病细胞凋亡率及培养液中白细胞介素 2(IL 2 )浓度。结果 :在白血病细胞培养 2 4h(最佳时间 )后 ,加入浓度为 2 .5× 10 8/L(最佳浓度 )的去CD8+ HRDLs混合培养 ,其白血病细胞凋亡率 (17.0± 2 .5 ) %与对照组 (4 .4± 1.1) % (未加入HRDLs)及加入去CD4 + HRDLs组的白血病细胞凋亡率 (4 .8± 1.6 ) %相比较差异有统计学意义 ,但与加入未去CD8+ 和CD4 + HRDLs组的白血病细胞凋亡率 (17.4± 0 .6 ) %比较则差异无统计学意义。同时 ,去CD8+ HRDLs组培养液中IL 2浓度显著高于对照组和去CD4 + HRDLs组。结论 :CD4 + HRDLs在抗白血病效应中可能起着比CD8+ HRDLs更重要的作用 ,临床使用中 ,选择性去除CD8+ HRDLs,可以减少或减轻移植物抗宿主病 (GVHD) ,而不影响GVL效应 ,同时IL 2在GVL效应过程中也可能起着重要作用     

艾曲波帕在儿童严重血小板减少血液系统疾病中的临床疗效观察

目的 探讨艾曲波帕在伴有严重血小板减少的血液系统疾病(免疫性血小板减少症(ITP)、重型再生障碍性贫血(SAA)、造血干细胞移植后血小板减少(PT)中的疗效与安全性。方法 回顾性分析2020年9月—2022年3月在青岛大学附属医院应用艾曲波帕治疗的23例患儿临床资料,其中ITP 10例,SAA 8例,PT 5例,评估治疗有效率及不良反应。结果 23例患儿治疗前血小板计数在(1-25)×10⁹/L,治疗前病程在0.25-60个月。ITP治疗有效率为9/10,SAA治疗有效率为5/8,PT治疗有效率为4/5,总有效率为18/23(78%)。23例患儿中仅有1例出现转氨酶升高,给予对症治疗后降至正常。结论 艾曲波帕治疗儿童严重血小板减少的血液系统疾病疗效确切,不良反应少。     

组织因子途径抑制物2对卵巢癌细胞迁徙和浸润能力的影响

目的组织因子途径抑制物2(tissuefactorpatlawayinhihitor-2，TFPI-2)是一种新近发现的丝氨酸蛋白酶抑制物，可抑制纤溶酶、胰蛋白酶、基质金属蛋白酶在内的多种蛋白酶。而对尿激酶、组织型纤溶酶原激活剂以及凝血酶没有抑制作用。研究发现在多种肿瘤发生、发展过程中，TFPI-2常表达减少。本研究旨在探讨TFPI-2表达与卵巢癌细胞迁徙、浸润之间的关系。方法脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-cite-neo／TFPI-2转染卵巢癌细胞系A：，8。，用G418筛选阳性细胞，经逆转录聚合酶链反应，Westernblot技术检测转染前后卵巢癌细胞中TFPI-2mRNA以及相应蛋白质表达水平；利用Boyden小室检测转染前后卵巢癌细胞穿膜的细胞数，此细胞数作为评价卵巢癌细胞迁徙、迁移浸润能力的指标。结果转染成功的卵巢癌细胞证实有TFPI-2mRNA和相应蛋白质的表达；与未转染的细胞相比，转染TFPI-2的细胞体外浸润能力显著下降(穿膜细胞数为59．3±6．5vs109．75．5，P<0．01)；而迁徙能力无明显变化(穿膜细胞数为114．78．6vs127．3±7．1，P>0．05)。结论TFPI-2表达可显著抑制卵巢癌细胞的浸润，为进一步开展肿瘤基因治疗提供实验依据。     

胸腺五肽对肿瘤病儿化疗停药后免疫功能影响

目的 探讨胸腺五肽(TP-5)对肿瘤病儿化疗停药后免疫功能、感染和用药安全性的影响.方法 随机选取20例肿瘤化疗停药病儿为治疗组,给予TP-5肌肉注射(<30 kg病儿每次10 mg,每周1次;≥30 kg病儿每次10 mg,每周2次);另随机选取20例肿瘤化疗停药病儿作为对照组,不做任何免疫调节治疗.于停药后3个月检查CD3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8、CD56及IgG、IgM、IgA的水平.定期检测肝肾功能、心电图、血常规.结果 治疗组治疗前与对照组细胞免疫水平、NK细胞及体液免疫水平比较差异无显著性(P>0.05);治疗组治疗3个月与同期对照组比较,细胞免疫水平无明显差异(P>0.05),而NK细胞及体液免疫水平较对照组明显提高(t=7.34～9.86,P<0.01).治疗组治疗3个月间病儿感染发生率和感染控制时间明显小于对照组(χ2=9.23,P<0.01;t=5.40,P<0.01).治疗组治疗3个月间仅1例出现注射局部疼痛,两组均未出现肝肾功能及心电图的改变.结论 TP-5具有改善肿瘤化疗停药后病儿免疫功能的作用,可降低感染发生率,且临床应用安全.