富血小板血浆诱导犬骨髓间充质干细胞的体外成骨*

背景：富血小板血浆中含有大量骨再生所需的生长因子,且各生长因子的比例是机体自身形成的,具有良好的协同作用。 目的：探讨富血小板血浆体外诱导犬骨髓间充质干细胞成骨的效果。 设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2007-06/2008-02在中南大学湘雅医院中心实验室完成。 材料：健康12月龄雄性比格犬,由中南大学湘雅医学院实验动物部提供。 方法：收集第3代犬骨髓间充质干细胞,分为4组：对照组加入标准培养基;成骨诱导培养基组向培养板孔内加入含胎牛血清、地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C的高糖DMEM培养基;富血小板血浆组根据预实验结果,向培养板内加入含体积分数为6.25%富血小板血浆的低糖DMEM培养基;联合组向培养板内加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C、体积分数为6.25%富血小板血浆的高糖DMEM培养基。 主要观察指标：细胞内碱性磷酸酶活性,免疫细胞化学染色检测Ⅰ型胶原的表达,改进Von Kossa染色标记钙结节形成情况,RT-PCR检测诱导后骨钙素mRNA的表达。 结果：各组碱性磷酸酶活性均随诱导时间的延长而逐渐增高,联合组升高幅度最为明显(P < 0.05)。诱导7,14 d后,成骨诱导培养基组、联合组Ⅰ型胶原均呈阳性表达,富血小板血浆组、对照组Ⅰ型胶原始终呈阴性表达。诱导14 d后,成骨诱导培养基组、联合组可见卵圆形钙结节。诱导7,14 d后,对照组与富血小板血浆组之间骨钙素mRNA表达水平无明显差异(P > 0.05),此2组骨钙素mRNA表达水平均明显低于成骨诱导培养基组、联合组(P < 0.05);成骨诱导培养基组骨钙素mRNA表达水平明显低于联合组(P < 0.05)。 结论：经成骨条件培养基诱导培养的骨髓基质干细胞,富血小板血浆能在体外显著诱导其成骨指标的表达。     

儿童后中侧和后外侧移位肱骨髁上骨折和肘内翻畸形之间的关系

目的探讨儿童后中侧和后外侧移位肱骨髁上骨折和肘内翻畸形之间的关系。方法对2008年6月至2010年6月于我院行闭合复位克氏针内固定术的206例肱骨髁上骨折患儿进行回顾性分析,其中16例出现肘内翻畸形,分为后中侧移位组10例和后外侧移位组6例,观察比较两组的肘内翻角度和肘关节功能。结果肱骨髁上骨折并发肘内翻畸形者占7.8%,后中侧移位组术后肘内翻平均角度为16.2°±3.9°,后外侧移位组术后肘内翻平均角度为8.6°±4.1°,前组较后组患儿肘内翻畸形更加明显,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。根据Flynn标准,所有患儿均未出现肘关节活动受限。结论完全移位的肱骨髁上骨折即使手术治疗达到解剖复位,随患儿的功能恢复和生长发育也可能发生肘内翻畸形。其中,后中侧骨折移位发生的肘内翻畸形较后外侧骨折移位明显,对肘功能影响更大。     

马凡综合征FBN1基因单倍型连锁分析

目的　探讨FBN1基因微卫星检测对Marfan综合征 (MFS)症状前诊断的应用价值。方法　应用 15号染色体FBN1基因侧翼区的 4个微卫星为遗传标记 ,联合运用荧光标记引物的聚合酶链反应和毛细管电泳技术 ,对 4个MFS家系及 4 0名正常人进行单倍型分离分析。结果　所测定的 4个微卫星的单倍型分离分析结果与该 4个MFS家系中患者的发病情况相符。结论　所测定的 4个MFS家系 ,证实其致病基因与FBN1连锁。所采用的毛细管电泳技术检测PCR扩增产物简便、易行。     

人胚及胎儿皮肤中郎格罕细胞的发生:HLA-DR和OKT-6决定基的表达

本文作者对胚胎发育中表皮内的郎格罕细胞(LC)进行了一系列的研究。根据病史及对胎儿的测量来决定估计胎龄(EGA),EGA在10周或10周以内的为胚胎,10周以上的为胎儿。取35例EGA为45～170天的人胚胎及胎儿下肢皮肤,制成表皮片,用三磷酸腺苷酯酶(ATPase)染色证实在胚胎及胎儿的表皮中有LC存在。EAG至少为45天时LC才出现。用HLA-DR和ATPase单标或双标技术证实:EAG45天时的LC呈现HLA-DR~+,在EAG为50～100天时,HLA-DR~+细胞的密度平均100/mm~2。虽然表皮LC的密度在胚胎与胎儿发育期间,统计学上是相等的,但由于胚胎表皮中的LC较胎儿表皮中的为     

测序技术在临床诊疗中的应用

20世纪70年代以SANGER等[1]的DNA双脱氧测序技术为代表的第1代测序平台的快速发展和成熟,为人类基因组计划提前完成立下赫赫战功,而如今以Roche公司454 GS系列的焦磷酸测序技术、以Illumina公司的Solexa Genome Analysis System的单分子阵列原位扩增测序技术,以及以ABI公司的SOLID测序仪的支持寡核苷酸链接和检测的测序技术为代表的第2代测序平台,正快速占领高端科研市场,这些测序平台成为后基因组计划相关研究中最重要的工具.     

中西医结合治疗原发性肾病综合征临床观察

近年来 ,笔者采用中西医结合方法治疗原发性肾病综合征 (ＰＮＳ) 5 2例 ,并设西药对照组 5 1例进行疗效观察。现报告如下。1　临床资料1 1　一般情况全部病例随机分为两组 :治疗组 5 2例中 ,男 30例 ,女 2 2例 ;年龄 132 5岁者 13例 ,2 6 5 0岁者 39例 ;病程 <14天者 38例 ,15 40天者 14例。对照组5 1例中 ,男 2 8例 ,女 2 3例 ;年龄 132 5岁者 12例 ,2 6 5 0岁者 39例 ;病程 <14天者 36例 ,15 40天者 15例。1 2　诊断标准全部病例均可见大量蛋白尿 (尿蛋白定量试验>3 5ｇ/ 2 4ｈ)、血浆蛋白明显降低 (血浆白蛋白 <30ｇ/Ｌ)、浮肿、血脂增高…     

清热化湿活血剂治疗慢性肾小球肾炎43例

目的：观察清热化湿活血剂治疗慢性肾小球肾炎疗效。方法：对照组31例予服雷公藤多甙片、潘生丁、卡托普利等药物，治疗组43例加用清热化湿活血剂（黄芩、黄柏、栀子、鱼腥草、白花蛇舌草、猪苓、茯苓、泽泻、白术、苍术、丹参、鬼箭羽、小蓟、生甘草），比较两组疗效。结果：对照组总有效率67．7％，治疗组总有效率88．4％，差异有显著意义（P〈0．05）。结论：在西医常规治疗的基础上加用清热化湿活血剂治疗慢性肾小球肾炎有较好的疗效。     

角蛋白17对大鼠胰腺纤维化模型的影响

目的:探讨角蛋白17(KRT17)对大鼠胰腺纤维化模型的影响。方法:健康SD雄性大鼠20只,随机分为对照组、模型组,其中模型组又分为4组(n=4)。模型组大鼠腹腔内注射10%的二乙基二硫代氨基甲酸盐(DDC)溶液,隔日1次,对照组大鼠腹腔内注射同等体积生理盐水。分别于实验后第7、15、22、30天,腹腔内注射麻药并处死各组大鼠。颈动脉采血,留取胰腺组织。用免疫组化法测定胰腺组织中Ⅰ型胶原表达水平;采用Western blot法检测胰腺组织中KRT17蛋白的表达;并用血细胞分析仪检测白细胞的含量,用分立式自动生化分析仪检测血浆中生化指标。结果:第15、22、30天组胰腺组织中I型胶原表达水平高于对照组(P<0.05);第22、30天组胰腺组织中I型胶原表达水平高于第7、15天组(P<0.05)。第15、22、30天组胰腺组织中白细胞计数、淋巴细胞绝对值、葡萄糖含量高于对照组(P<0.05);第22、30天组胰腺组织中白细胞计数、淋巴细胞绝对值、葡萄糖含量高于第7天组(P<0.05);第22天组胰腺组织中葡萄糖含量高于第15天组(P<0.05);第30天组胰腺...     

两种方法治疗儿童僵硬性马蹄内翻足的中期效果评价

目的：评价 Ponseti 方法和足后内侧软组织松解手术治疗儿童僵硬性马蹄内翻足的中期效果。方法对本院2005年4月至2010年6月收治的僵硬性马蹄内翻足病例资料进行回顾性研究。按照治疗方法的不同，分为 Ponseti 方法组和足后内侧软组织松解手术组。按 Pirani 系统进行评分。术后使用 Laaveg 和 Ponseti 功能评分系统（FRS）进行效果评价。结果共43例（55足）纳入研究，23例（28足）采用 Ponseti 方法治疗，随访时间50～82个月，平均67个月。20例（27足）采用后内侧软组织松解术治疗，随访时间56～90个月，平均75个月。治疗开始时两组 Pirani 评分之间无显著差异（P ＞0．05）。两组治疗前后 Pirani 评分显著减小（P ＜0．05）。Ponseti 方法组有更高的 FRS 评分（P ＜0．01）。Ponseti 方法组的最大被动背伸活动度评分更高（P ＜0．01）。两组影像学结果相似。但 Ponseti 方法组的复发率较软组织松解手术组的复发率低。结论与后内侧软组织松解术相比，Ponseti 方法治疗儿童僵硬性马蹄内翻足的中期效果更好。