轻型再生障碍性贫血43例疗效分析

目的分析轻型再生障碍性贫血(MAA)患儿的转归。方法回顾性分析1996年1月-2009年1月在我院治疗的43例MAA患儿的临床资料。所有患儿诊断后均按照患儿家长意愿选择以下三种治疗方案中的一种:中药组(Ⅰ组,3例):只接受中药治疗;雄激素+中药组(Ⅱ组,10例):接受中药联合康力龙[0.1 mg/(kg.d)]治疗;环孢菌素A+雄激素+中药(Ⅲ组,30例):接受环孢菌素A、康力龙[0.1 mg/(kg.d)]及中药治疗。中位随访时间为42个月(5～116个月)。结果在随访时间内,Ⅰ组3例患儿中仅有1例获得部分缓解,1例在随访73个月时进展为重型再生障碍性贫血(SAA),1例无效;Ⅱ组10例患儿中有3例(30%)获得部分缓解,其余7例(70%)均无效,无一例进展为SAA;Ⅲ组30例患儿中有9例(30%)获得完全缓解,5例(17%)获得部分缓解,1例(3%)在随访至11个月时进展为SAA,其余15例(50%)无效。结论早期给予干预的MAA患儿进展为SAA比率较低。     

Vogt-小柳-原田综合征黄斑中心凹脉络膜厚度分析

目的　分析Ｖｏｇｔ-小柳-原田综合征患者急性期与恢复期黄斑中心凹下方脉络膜厚度（ｓｕｂｆｏｖｅａｌｃｈｏｒｏｉｄａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓ,ＳＦＣＴ）变化。方法　３０例Ｖｏｇｔ-小柳-原田综合征患者６０眼纳入研究,其中男１４例,女１６例,年龄（４５．３８±１０．１９）岁。所有患者均行眼前节检查、最佳矫正视力、眼底彩色照相、眼底血管荧光造影（ｆｕｎｄｕｓｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ,ＦＦＡ）及频域光学相干断层扫描（ｓｐｅｃｔｒａｌｄｏｍａｉｎｏｐｔｉｃａｌｃｏｈｅｒｅｎｃｅｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ,ＳＤ-ＯＣＴ）等检查确诊。经糖皮质激素口服治疗前及治疗２周、６个月、１２个月后应用ＳＤ-ＯＣＴ对Ｖｏｇｔ-小柳-原田综合征患者进行深度加强扫描（ｅｎｈａｎｃｅｄｄｅｐｔｈｉｍａｇｉｎｇ,ＥＤＩ）测量ＳＦＣＴ。与正常同龄人群ＳＦＣＴ值进行比较。结果　患眼与正常同龄人群ＳＦＣＴ值（２８７．８５±２７．７０）μｍ比较,糖皮质激素治疗前,患眼ＳＦＣＴ厚度（４３７．４６±３０．１４）μｍ明显增加,差异有统计学意义（ｔ＝３．５９１,Ｐ＜０．０１）。治疗２周后,患眼ＳＦＣＴ厚度为（３５２．５０±６０．３７）μｍ,较治疗前显著下降,差异有统计学意义（ｔ＝２．５６７,Ｐ＜０．０５）。治疗６个月及１２个月后,患眼ＳＦＣＴ厚度分别为（２９９．３２±２０．１２）μｍ、（２９７．６１±２１．８９）μｍ,与正常人群ＳＦＣＴ值比较,差异均无统计学意义（ｔ＝１．３６２、１．２７２,均为Ｐ＞０．０５）。结论　Ｖｏｇｔ-小柳-原田综合征患者急性期ＳＦＣＴ较正常同龄人群明显增厚,恢复期与同龄正常人群比较无明显差别。     

玻璃体手术治疗增生性糖尿病视网膜病变的时机选择

目的探讨玻璃体手术治疗增生性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy，PDR）的时机及疗效。设计回顾性、对照干预研究。研究对象118例（120眼）PDR患者，其中88例（90眼）行玻璃体手术，30例（30眼）行常规全视网膜光凝（panretinal photocoagulation，PRP）。方法患者分为三组，第一组为Ⅳ期PDR合并玻璃体积血50例（52眼），其病程在3个月以内行玻璃体手术者35例（37眼），病程≥6个月行玻璃体手术者15例（15眼）；第二组为Ⅴ期PDR无玻璃体积血60例（60眼），其中30例行玻璃体手术，30例行PRP治疗；第三组Ⅵ期PDR8例（8眼）行玻璃体手术。主要指标视力和术中、术后并发症。结果随访3～48个月，第一组中Ⅰ型糖尿病患者病程在3个月以内和6个月以上手术者相比，术后视力〉0．1者分别为10眼（83．3％）和2眼（33．3％），差异有显著性（P〈0．05）。2型糖尿病患者术后视力〉0．1者分别为9眼（36％）和3眼（33％），无显著性差异（P〉0．05）；第二组均为2型糖尿病患者，接受手术者术后视力〉0．1的10眼（33．3％），与术前比较差异有显著性（P〈0．01）。接受PRP者治疗前、后视力比较差异不显著；第三组手术前、后视力比较，差异无显著性。术中首要并发症为视网膜医源性裂孔，术后并发症为玻璃体再出血、视网膜脱离。结论PDR患者尤其是进行性加重者，早期行玻璃体手术联合PRP，视力预后优于保守治疗者。     

地塞米松对液氮深低温保存猪角膜浸润细胞的影响

目的：本实验结合液氮深低温冻存技术与地塞米松预处理方法,研究其对猪角膜免疫原性影响情况及可能机制。

方法：选择新鲜猪角膜,以13mm直径环钻制取角膜标本,依次放入四种冷冻保护液中冷平衡,“简化四步法”程序降温后放入液氮中保存,使用前40℃水浴复温。地塞米松作用组以同法制备植片,前三步冷平衡同前,最后分别放入含0.01,0.03,0.05mg/mL地塞米松保护液中4℃孵育18h,再程序降温液氮冻存。BALB/c小鼠50只,随机分为阳性对照组(新鲜组)、程序冻存组、地塞米松程序冻存组Ⅰ、地塞米松程序冻存组Ⅱ和地塞米松程序冻存组Ⅲ,每组10只。各组角膜植入到BALB/c小鼠背部皮下,术后14d取出,做石蜡包埋,HE染色、CD25和FasL免疫组化染色,光镜观察。

结果：术后14d剖取角膜植片,见植片与周围组织粘连,植片明显肿胀,半透明,色微黄。HE染色结果：新鲜组角膜植片全层有大量淋巴细胞浸润; 程序冻存组角膜浸润细胞较新鲜组减少,多位于内皮和上皮层分布; 地塞米松作用各组细胞浸润数最少。免疫组化显示：新鲜组植片CD25⁺和FasL⁺浸润细胞数最多,与程序冻存组、各地塞米松作用组比较有明显统计学差异。程序冻存组CD25⁺和FasL⁺浸润细胞数多于各地塞米松作用组,比较有显著性差异。各地塞米松作用组CD25⁺和FasL⁺浸润细胞数差异比较无统计学意义。

结论：地塞米松作用组角膜免疫原性最低。各地塞米松作用组角膜免疫原性在0.01～0.05mg/mL范围内无浓度依赖效应。     

Leflunomide therapy for adult patients with steroid-dependent minimal change disease or primary focal segmental glomerulosclerosis

<正>     

姜黄素抑制翼状胬肉成纤维细胞增生的研究

目的观察姜黄素对体外培养人翼状胬肉成纤维细胞(HPF)增生和凋亡的影响,寻找辅助治疗和预防翼状胬肉复发的新方法。方法用0～160μmol/L姜黄素作用体外培养的HPF,24～96h后观察不同浓度姜黄素对HPF的影响。MTT法及免疫组织化学染色增生细胞核抗原(PCNA)检测细胞生长活性,流式细胞仪测定细胞周期时相变化。结果在20～160μmol/L浓度作用24～72h范围内,姜黄素可剂量和时间依赖性的抑制HPF增生(P<0.05)。20,40,80,160μmol/L姜黄素作用24h后,流式细胞仪检测结果发现,姜黄素作用组均出现典型的亚二倍体凋亡峰,G0/G1期细胞百分比上升(P<0.05),S期细胞百分比下降(P<0.05),说明细胞阻滞于G0/G1期。当姜黄素的浓度在20～160μmol/L范围内能浓度依赖性地抑制细胞表达PCNA(P<0.05)。结论姜黄素可显著抑制翼状胬肉成纤维细胞增生,使细胞周期停滞于G0/G1期,并诱导其凋亡,作用呈时间和剂量依赖性。     

密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症模型角膜和泪腺组织中TNF-α,IL-1β表达的影响

目的:探讨密蒙花总黄酮对去势雄鼠干眼症动物模型角膜及泪腺组织炎症因子表达的影响与组织损伤的关系。方法:选取150只健康1月龄Wistar雄性大鼠随机分为5组(正常组、假手术组、手术对照组、雄激素治疗组、密蒙花总黄酮治疗组,分别用A,B,C,D,E组表示),每组30只。将C,D,E三组实验鼠切除双侧睾丸及附睾;B组只切开阴囊,不切除睾丸,作为假手术对照组,A组不作处理。自造模后1wk,待伤口基本愈合开始用药。A,B,C组以生理盐水灌胃,1次/d;D组用丙酸睾酮注射液大腿肌肉注射,3d1次;E组以密蒙花提取物生理盐水混悬液灌胃,1次/d。各组实验动物分别于用药1,3,5mo后随机取10只,行SchirmerⅠ试验、泪膜破裂时间(break-up time,BUT)及角膜荧光素染色检查并处死各组动物,取双眼泪腺、角膜组织采用免疫组织化学方法观察各组角膜和泪腺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α),白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)蛋白的表达。结果:A与B组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达均不明显;C组泪腺、角膜上皮细胞中TNF-α,IL-1β阳性表达的细胞数明显高于D,E组(P<0.05);D,E各组间差异不显著(P>0.05)。结论:去势雄鼠干眼症角膜和泪腺组织局部炎症反应可能是角膜损伤和泪腺分泌功能丧失的原因之一,TNF-α,IL-1β表达增加与其炎症反应有关。密蒙花总黄酮能够下调去势雄鼠角膜和泪腺局部TNF-α,IL-1β蛋白的表达,可能是其治疗干眼症的关键机制之一。     

视网膜新生血管动物模型的制备

目的制备视网膜新生血管动物模型,为今后的视网膜新生血管相关疾病的研究提供稳定的模型.方法以出生7d的C57BL/6J小鼠56只,雌雄兼有,随机将28只放入75%±2%高氧环境,控制室温23℃±2℃,日光照明,5d后返回空气环境;另一组28只置于23℃±2℃空气环境中饲养作为对照.随机于出生后12、14、17、21、22、25d取高氧组和空气组小鼠行视网膜铺片、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)免疫组化染色,观察VEGF的表达情况,并对出生后17d小鼠的视网膜铺片、石蜡切片HE染色、VEGF免疫组化染色.结果高氧诱导组出生后17d视网膜无血管区面积,穿过视网膜内界膜细胞核计数明显高于空气组.血管内皮细胞VEGF的表达从出生后14d开始有阳性表达,阳性表达逐渐增强,出生后17d达到高峰,之后逐渐下降,持续至出生后21d.结论该模型为一种合适的视网膜新生血管动物模型.     

视网膜母细胞瘤高迁移率族蛋白A、MIB-1标记指数和let-7的表达及其相关性分析

目的 观察分析视网膜母细胞瘤(RB)肿瘤组织中高迁移率族蛋白A (HMGA)1和HMGA2、MIB-1标记指数(LI)及let-7的表达及其相关性.方法 44例RB肿瘤组织标本纳入研究.其中,低分化组织标本11例,高分化组织标本33例.侵袭性肿瘤组织标本8例,非侵袭性肿瘤组织标本36例.采用免疫组织化学染色方法检测RB肿瘤组织标本中HMGA1、HMGA2及MIB-1 LI的表达.HMGA1、HMGA2表达判定标准:以0为无表达,1％～10％为低度表达,11％～50％为中度表达,＞50％为高度表达;MIB-1 LI表达判定标准:以0为无表达,1％～40％为低度表达,＞40％为高度表达.采用逆转录聚合酶联反应检测let-7的表达;以≥80％为无明显下降,60％～79％为中度下降,＜60％为高度下降.结果 44例标本中,HMGA1无表达14例,占32％;低度表达11例,占25％;中度表达10例,占23％;高度表达9例,占20％.低分化组织标本的HMGA1表达率高于高分化组织标本,差异有统计学意义(x2=11.3,P＜0.01).侵袭性与非侵袭性肿瘤组织标本的HMGA1表达率比较,差异无统计学意义(x2=5.9,P＞0.05).HMGA2无表达11例,占25％;低度表达11例,占25％;中度表达9例,占20％;高度表达13例,占30％.低分化组织标本的HMGA2表达率高于高分化组织标本,差异有统计学意义(x2=20.9,P＜0.05).侵袭性肿瘤组织标本的HMGA2表达率高于非侵袭性肿瘤组织标本,差异有统计学意义(x2=8.7,P＜0.05).MIB-1 LI无表达4例,占9％;低度表达18例,占41％;高度表达22例,占50％.低分化组织标本的MIB-1 LI表达水平高于高分化组织标本,差异有统计学意义(t=5.2,P＜0.05).侵袭性肿瘤组织标本的MIB-1 LI表达水平高于非侵袭性肿瘤组织标本,但差异无统计学意义(t=-1.1,P＞0.05).let-7表达无明显下降27例,占61％,中度下降8例,占18％,高度下降9例,占21％.相关性分析结果显示,MIB-1 LI表达与HMGA1和HMGA2表达呈显著正相关(r=0.327、0.602,P＜0.05);let-7表达与HMGA1、HMGA2表达及MIB-1 LI表达均呈负相关(r=-0.247、-0.310、-0.392,P＜0.05).结论 在RB肿瘤组织中HMGA1、HMGA2和MIB-1 LI均呈现高表达,let-7表达下降.let-7有可能抑制HMGA1和HMGA2的表达.     

POAG患者血管内皮功能和血液流变学指标变化及其危险因素分析

目的：探讨原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)患者血管内皮功能及血液流变学指标变化及危险因素分析。

方法：POAG患者86例作为研究对象(观察组),依据视野缺损程度分为轻度组(n=27)、中度组(n=29)和重度组(n=30),另选取正常健康体检者30例作为对照组,分析POAG的危险因素及各组间血管内皮功能及血液流变学水平。

结果：单因素分析结果指出,对照组与观察组间患者性别比例、平均年龄、酗酒史及心血管病史比较,差异无统计学意义(P>0.05),吸烟史、高血压史、糖尿病史及家族史比较,差异均具有统计学意义(P<0.05); 观察组一氧化氮(nitric oxide,NO)水平显著低于对照组,且重度组水平显著低于中度组,重度组及中度组NO水平均显著低于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05); 与对照组水平相比,观察组内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、血浆粘度(plasma viscosity,PV)、红细胞压积(hematocrit,HCT)及纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)水平均显著升高,且重度组ET-1、HCT水平显著高于中度组,重度组及中度组ET-1、HCT水平均显著高于轻度组,重度组PV及FIB水平显著高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05); Logistic回归分析结果表明,吸烟史、高血压史、糖尿病史、家族史、ET-1、PV、HCT及FIB是原发性青光眼的危险因素,NO是保护因素(P<0.05)。

结论：POAG患者存在血管内皮功能损伤及血液流变学异常,吸烟史、高血压史、糖尿病史、家族史均与POAG的发生有关。