肺腺癌A549细胞CD133~+CD44~+表型在裸鼠体内成瘤能力的研究

目的 探讨肿瘤标志物CD133和CD44的表达与人肺腺癌A549细胞株在裸鼠体内形成肿瘤能力的关系.方法 使用单细胞克隆的方法 ,筛选出能够持续增殖分裂的肿瘤细胞,应用免疫荧光方法 和流式细胞仪检测CD133和CD44在具有增殖分裂能力的A549细胞和普通A549肿瘤细胞的表达情况;按表达结果 对A549细胞进行分组,应用单克隆方法 对各组细胞进行培养,并按不间密度注射于裸鼠皮下,观察各个组别的成瘤能力.结果 (1)在倒置显微镜下观察肿瘤细胞生长情况,发现多数细胞死亡,1周后仅有4.11%的细胞能够增殖分裂形成克隆.(2)具有增殖分裂能力肿瘤细胞的免疫荧光结果 :CD133阳性率为19.0%,CD44阳性率为57.0%;普通A549肿瘤细胞免疫荧光结果 :CD133阳性率为2.5%,CD44阳性率为34.0%;具有分裂增殖能力的肿瘤细胞CD133和CD44阳性表达率显著高于普通A549肿瘤细胞(P<0.01).(3)裸鼠体内成瘤能力实验提示:CD133~+CD44~+(A组)细胞成瘤能力显著高于CD133~-CD44~-(B组)、CD133~-CD44~+(C组)和CD133~+CD44~-(D组)细胞(P<0.05);裸鼠瘤块病理检查证实均为腺癌,各脏器检查未发现转移:在接种CD133~+CD44~+(A组)细胞的瘤块组织中发现除了有CD133~+CD44~+细胞外,还有CD133~-CD44~-细胞.结论 肺腺癌A549细胞株中CD133~+CD44~+细胞在裸鼠体内的成瘤能力显著高于其他细胞.     

颞下锁孔入路手术治疗基底动脉顶端动脉瘤

目的探讨经颞下锁孔入路手术治疗基底动脉顶端动脉瘤的疗效及手术技巧。方法自2002年7月至2010年4月收治基底动脉顶端动脉瘤患者7例,均在神经内镜辅助下经颞下锁孔入路手术治疗。入院时Hunt-Huess分级0和1级各1例,Ⅱ级3例,Ⅲ和Ⅳ各1例。结果 6例完全夹闭,1例部分残留。无手术死亡病例;术后出现术侧动眼神经麻痹3例,均在6月内恢复。术后随访8月至6年,恢复工作或生活自理5例,一侧肢体偏瘫1例,植物生存1例。结论经颞下锁孔入路手术治疗基底动脉顶端动脉瘤效果良好,尤其对于动脉瘤瘤颈位于后床突下方或瘤体后突者;神经内镜是必不可少的辅助手段。     

2005年北京市大兴区性病流行病学分析

目的 了解大兴区性病发病趋势和流行特点,为制定防治策略提供科学依据.方法 对全区的性病疫情年(季)报表汇总分析.结果 2005年大兴区累计报告非淋菌性尿道炎(NGU)、淋病、尖锐湿疣、梅毒、生殖器疱疹等5种性病443例,较2004年下降10.87%.疾病流行谱发生变化,尖锐湿疣位居首位;男女性病病种的构成不完全相同,男性以淋病最多,女性以梅毒最多;20-39岁性活跃人群的性病报告病例数最多,占病例总数的70.65%.结论 2005年大兴区的性病报告数较2004年有所下降,但部分病种仍呈现上升趋势,尤其是生殖器溃疡性性病,应引起重视.     

RP-HPLC法测定复肝口服液中大黄素的含量

目的:建立以反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定复肝口服液中大黄素含量的方法。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(85∶15),检测波长为430nm,柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1。结果:大黄素进样量在0.075 2～0.376 0mg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 96);平均回收率为99.77%,RSD=1.03%(n=6)。结论:本方法简便、快速、重现性好,可用于复肝口服液的质量控制。     

樟芝菌粉三萜类化合物含量的测定

目的:测定樟芝发酵菌粉三萜类化合物含量.方法:以齐墩果酸为对照品,以5%香草醛-冰醋酸和高氯酸为显色剂,采用分光光度法在550 nm测定样品的吸光度.结果:总三萜在20～140 μg范围内呈良好的线性关系,其回归方程为:Y=0.004 9X-0.018 4,R2=0.997 8.樟芝菌粉三萜类化合物含量为1.73%.结论:该方法操作简单,灵敏度高且比较准确.     

RNAi抑制Layilin表达对肺腺癌A549细胞体外侵袭和荷瘤鼠体内淋巴转移的影响

背景与目的：透明质酸参与了多种肿瘤细胞的侵袭行为，Layilin是一种新发现的特异性透明质酸受体。本研究在发现Layilin表达于人肺腺癌A549细胞株的前期工作基础上，观察用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术抑制Layilin表达后，对人肺腺癌A549细胞体外侵袭和体内淋巴道转移的影响。方法：构建能表达针对Layilin的小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）的RNAi质粒（Layilin siRNA plasmid）和表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照RNAi质粒（control siRNA plasmid），分别转染A549细胞，新霉素抗性筛选得到Layilin表达受抑制的A549-siLayilin细胞和Layilin表达未受影响的A549-siControl细胞。针对非转染（A549-nontransfection）、A549-siLayilin、A549-siControl3组细胞，分别采用RT—Realtime PCR和Western blot技术检测Layilin表达，用Boyden小室实验检测细胞体外侵袭能力，用爪垫皮下种植淋巴结转移模型检测淋巴转移能力。结果：与A549-nontransfection组和A549-siControl组相比，A549-siLayilin组细胞Layilin表达减少，体外侵袭能力降低，体内淋巴转移率下降。结论：通过RNAi抑制Layilin表达后，能有效抑制透明质酸所诱导的A549细胞体外侵袭和裸鼠移植瘤淋巴转移。本研究为通过RNAi手段抑制Layilin表达，进而抑制肺腺癌淋巴转移提供了有益的思路．     

肿瘤多药耐药和大分子载体抗癌药的提高渗透及潴留效应*

肿瘤多药耐药是导致肿瘤化疗失败的最主要原因,现以大分子载体抗癌药聚N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-多柔比星(PK1)为例,说明大分子载体抗癌药的提高渗透及潴留(EPR)效应可特异性地克服肿瘤细胞的多药耐药.介绍了PK1的药动学、Ⅰ期临床研究概况及同类型药物净司他丁(zinostatin,Smancs(R))和培门冬酶(pegaspargase,Oncaspar(R))的研究概况,为新型抗肿瘤药物研发提供-个新方向.     

TLC-UV法测定祖师麻熏洗液中祖师麻甲素的含量

目的:建立以TLC-UV法测定祖师麻熏洗液中祖师麻甲素含量的方法。方法:采用硅胶G薄层板,以甲苯-甲酸乙脂-甲酸(5∶4∶1)为展开剂,氨气显色定位分离,用95%乙醇-0.1mol·L-1盐酸(10∶1)洗脱,测定波长为328nm。结果:祖师麻甲素在1.04~5.20mg·mL-1浓度范围内与吸收度呈良好的线性关系(r=0.9999);加样回收率为98.89%,RSD=0.84%。结论:本方法简便、快速、重现性好,可用于祖师麻熏洗液的质量控制。     

阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌后ICAM-1表达的影响

目的探讨阿托伐他汀钙对大鼠脑缺血再灌后脑组织中ICAM-1蛋白表达的影响。方法采用大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌模型,参考Longa的5分制法在动物麻醉清醒后进行评分,应用免疫组化法检测ICAM-1蛋白表达,运用HE染色观察多形核白细胞(PMNLs)浸润情况。结果大鼠脑缺血再灌注后缺血脑组织中ICAM-1蛋白阳性血管数表达增加(P<0.01),24 h达高峰;予他汀干预治疗后能减少缺血脑组织中ICAM-1蛋白阳性血管数表达(P<0.05),抑制PMNLs渗出(P<0.05),减少神经功能缺损评分(P<0.05)。结论阿托伐他汀钙能抑制大鼠脑缺血再灌后脑组织中ICAM-1蛋白表达,减少炎症细胞渗出,减轻缺血再灌损伤。