红细胞同工酶ADA－EAP一AK_1同步电泳分型方法的建立

综合、改良了分别分型的方法，建立了红细胞同工酶ＡＤＡ一ＥＡＰ一ＡＫ１同步电泳分型方法，为ＡＤＡ，ＥＡＰ和ＡＫ１３种红细胞同工酶在法医学鉴定中更广泛的应用，提供了一种可靠、经济、实用的方法。     

运动性疲劳中医肾虚证的辨证分型及其诊断标准

目的：阐明运动性疲劳中医肾虚证的主要证候及辨证标准。 方法：于2003-07／2004-01选择湖南省水上运动训练基地的皮划赛艇运动员和省体工大队的田径运动员共199名为研究对象。将中医辨证理论方法与流行病学调研疗法有机结合，统一诊断标准和资料处理方法，分析肾虚各证候构成比，进行聚类分析，观察单一症状出现频次、症状组合出现频次。 结果：纳入受试对象199名，均进入结果分析。①肾虚常见证候有腰脊酸痛，头晕目眩，精神疲倦，四肢乏力，胫膝酸软，气短自汗，五心烦热，口干少津，畏寒肢冷，小便清长，夜尿频多，少寐多梦。②肾虚各证候构成比：肾气虚（51．26％）、肾阴阳两虚（37.69％）、肾阳虚（6.53％）、肾阴虚（4．52％）。③聚类分析：第一类为腰脊酸痛，精神疲倦，四肢乏力，气短自汗；第二类为头晕目眩，胫膝酸软，畏寒肢冷，小便清长，夜尿频多；第三类为五心烦热，口干少津；第四类为少寐多梦。④参与组合频次大于50％的症状主要是：精神疲倦、四肢乏力、腰脊酸痛、头晕目眩、气短，这5个症状也是单个症状频次大于80％的。 结论：运动性疲劳中医肾虚证的常见证候为肾气虚、肾阴阳两虚、肾阳虚、肾阴虚。而肾气虚是运：动性疲劳中医肾虚的主要证候。精神疲倦、四肢乏力、腰脊酸痛、头晕目眩、气短这5个症状可以作为运动性疲劳肾气虚辨证标准中的主要症状。     

大鼠室旁核内催产素免疫阳性细胞树突棘样结构在脱水状态下的改变

树突棘，室旁核，催产素，脱水，免疫组化，大鼠下丘脑内催产素大细胞神经分泌细胞与水盐代谢的调节有关，并伴有细胞形态的改变如细胞体积的增大及细胞膜与细胞膜间接触的增加和多突触的形成等。本文用免疫组化法发现在脱水状态下室旁核的催产素免疫阳性神经元上树突棘样结构有所增加。光镜观察并计算室旁核前大细胞亚核、内侧大细胞亚核及后大细胞亚核中含树突棘样结构的催产素神经元百分数变化，显示正常大鼠室旁核神经元树突棘样结构多位于树突干上，少数在胞体上。前大细胞亚核含树突棘样结构的细胞百分数为２１．２７％，内侧大细胞亚核为３０．２２％，后大细胞亚核为２０．２２％。轻度脱水大鼠室旁核含树突棘样结构细胞百分数显著增加（前大细胞亚核：２８．６５％，Ｐ＜０．０５；内侧大细胞亚核：３５．５３％，Ｐ＞０．０５；后大细胞亚核：３４．７８％，Ｐ＜０．０１）。细胞上树突棘样结构数也增加，其体积略为增大。重度脱水大鼠室旁核中树突棘样结构细胞百分数增加较小，仅后大细胞亚核内有显著变化（２７．１３％，Ｐ＜０．０５）。不同程度脱水组之间无显著变化。结果说明脱水可引起神经元膜结构的改变。树突棘样结构数变化是否与新突触的形成有直接关系？尚待进一步证实。     

人免疫球蛋白受体FcγRⅡa的基因克隆及在K562细胞的表达

目的 将外源人免疫球蛋白IgGFe段Ⅱ型受体CD32a分子表达于K562细胞表面，为构建人工抗原递呈细胞提供蓖要前提。方法 自U937细胞RTPCR得到CD3h的cDNA基因，与T载体连接后亚克隆入表达载体pcDNA3．1（＋）。经测序后利用脂质体介导的转染将CD32a分子表达在K562细胞的表面。结果 构建的T载体测序后，Genebank比对证实为CD32a的cDNA分子，免疫荧光和流式细胞仪结果均说明CD32a分子在K562细胞得到表达（96．9％）。结论 获得的人工构建的表达人免疫球蛋白IgGFe受淬的K562细胞。完成人工抗原递呈细胞制备的首要步骤。     

缺血－再灌注兔心肌肌浆网自由基的测定

应用电子自旋共振波谱仪（ＥＳＲ）直接检测了缺血－再灌注兔心肌肌浆网自由基的变化，以探讨肌质网系统与氧自由基的关系。实验中将２０只兔随机分为再灌注对照组、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）组、ＡＴＰ－氯化镁组和人参皂甙Ｒｅ组。实验结果，ｇ值２．００４６处为半醌自由基波谱，其相对浓度各组依次为７８．９４±２．１２６，１４．４６±２．８６，２０．６５±７．６５，１４．６６±３．６７（ｘ±ＳＤ），对照组与用药组均有显著性差异（Ｐ＜０．０５），表明缺血－再灌注兔心肌肌浆网产生大量的自由基，用ＥＳＲ可以直接检测到半醌自由基，外源性高能磷酸盐制剂ＡＴＰ－氯化镁及人参皂甙Ｒｅ与超氧化物歧化酶一样，发挥清除兔心肌肌浆网自由基的作用。     

肝功能衰竭大鼠脑水通道蛋白-4表达与MR扩散加权成像的相关性研究

目的研究水通道蛋白-4（AQP-4）在急、慢性肝功能衰竭时脑组织中的表达规律，应用MR扩散加权成像（DWI）探讨脑水肿的分子生物学机制。方法雄性SD大鼠65只采用数字表法随机分为急性组（25只）、慢性组（25只）和对照组（15只），分别诱发急、慢性肝功能衰竭。行DWI观察异常信号分布情况，测量顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度。处死后进行血氨检测，取与DWI检查对应的大脑层面切片行病理观察、免疫组织化学及逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）检测，检测AQP-4蛋白表达水平，并进行统计学分析。结果急性组肝细胞坏死及脑水肿明显，慢性组呈肝硬化改变，脑水肿不明显。血氨浓度急性组、慢性组和对照组分别为（516±46）、（158±26）和（148±32）μmol／L，差异有统计学意义（F=188．325，P〈0．01）。顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度对照组分别为516±160、727±183和656±181；急性组分别为1766±438、1223±503和1216±446；慢性组分别为700±213、820±263和713±243，差异均有统计学意义（F值分别为44．612、3．422和5．581，P值均〈0．05）。相应区域AQP-4蛋白表达水平（用平均灰度值表示）对照组分别为7379±1617、8104±2093和4851±2178；急性组分别为9580±2616、11057±2334和2949±1735；慢性组分别为12137±2332、11135±3102和7688±2925，3组间差异均有统计学意义（F值分别为11．414、4．602和7．002，P值均〈0．05）。急性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度有相关性（r=0．756，P〈0．05），慢性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度无相关关系（r=0．236，P〉0．05）。结论在急、慢性肝功能衰竭中血氨增高是导致脑内能量代谢异常、星形胶质细胞内AQP-4mRNA和蛋白表达增加的主要因素；DWI技术发现的信号异常可很好的反映脑水肿、AQP-4蛋白表达异常的范围、程度。