肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定

目的 构建表达人源肽抗生素hPAB-β的重组毕赤酵母,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法 用PCR及引物延伸法得到天然及优化的hPAB-β序列,克隆入pPIC9K质粒,转化DH5α大肠埃希菌,用酶切和核苷酸测序鉴定.重组质粒经SalⅠ酶线性化,整合入毕赤酵母GS115中,在DNA,mRNA及蛋白水平鉴定阳性重组子.结果 构建的含天然及优化序列的重组质粒酶切均可得到相应大小的插入片段,与预期相符,测序结果表明序列和阅读框均正确.线性化的重组质粒转入GS115后,得到7个不同的高拷贝阳性转化子,均能表达重组肽并具有良好的抑菌活性.结论 本研究成功构建含天然及优化hPAB-β序列的重组毕赤酵母工程菌,能够用于肽抗生素hPAB-β的制备.     

2005年云南不明原因猝死的家庭和村庄聚集性研究

目的 探讨云南不明原因猝死的家庭和村庄聚集性.方法 选择2005年该病的52例监测病例作为研究对象,并采用Poisson分布和β-二项分布拟合病例在家庭中的分布,用Poisson分布和负二项分布拟合病例在村庄中的分布.结果 病例在家庭中的分布服从β-二项分布(x2=0.25,P=0.62),尤其是在人口数较少的家庭,但不服从Poisson分布(x2=46.01,P＜0.001);在村庄中的分布服从负二项分布(X2=0.05,P=0.58),但不服从Poisson分布(X2=110.57,P＜0.001).结论 云南不明原因猝死具有家庭和村庄聚集性.     

旋转细胞培养系统模拟微重力环境对小鼠成纤维细胞lncRNA表达的影响

目的 研究旋转细胞培养系统(RCCS)模拟微重力环境对小鼠成纤维细胞株L929 lncRNA表达的影响.方法 体外培养L929细胞,随机分为模拟微重力组(SMG组)和正常重力组(NG组),每组3个样本.SMG组回转器轴心与地面平行旋转,NG组回转器轴心与地面垂直旋转,两组转速一致.RCCS培养7d,收集样本,提取样本总RNA,进行荧光标记和芯片杂交.利用Agilent Mouse lncRNA芯片分别检测SMG组和NG组L929细胞的lncRNA和mRNA表达,筛选差异表达显著的lncRNA,RT-qPCR验证芯片结果;利用GO和Pathway分析差异表达lncRNA的功能分布,结合mRNA差异表达谱,进行lncRNA-mRNA联合分析.结果 lncRNA芯片检测分析发现,RCCS模拟微重力环境下小鼠成纤维细胞L929共有238条差异表达的lncRNA,其中134条表达上调,104条表达下调;差异表达的mRNA共有237条,其中53条表达上调,184条表达下调.获取差异表达lncRNA的聚类分析图,对差异表达显著的4条lncRNA芯片结果进行RT-qPCR验证,结果相吻合.GO分析结果显示差异表达的lncRNA与巨噬细胞分化、伤口愈合的负性调节等生物学过程相关,Pathway分析结果显示差异表达的lncRNA与系统性红斑狼疮、TGF-β等信号通路相关.同时成功构建了lncRNA-mR-NA-TF可视化网络图.结论 RCCS模拟微重力环境显著影响L929细胞的lncRNA及mRNA表达谱,基于芯片技术的ln-cRNA靶基因预测和功能富集分析可为失重应激损伤机制探讨和修复措施建立提供理论依据.     

首发与复发抑郁症患者的过度概括化自传体记忆比较

目的探索复发性抑郁症与首发抑郁症患者过度概括化自传体记忆（OGM）的差异,以及过度概括化自传体记忆对抑郁症状的影响。方法对34例首发性抑郁症患者以及31例复发性抑郁症患者,采用自传体记忆测评（autobiographicalmemorytest,AMT）评定过度概括化自传体记忆水平、汉密尔顿抑郁量表测评（HAMD-17）及贝克抑郁量表（BDI）评定抑郁严重程度。结果①复发性抑郁症组OGM总分显著高于首发抑郁症组[分别为（3．90±1．65）分,（3．10±1．57）分,t=2．035,P〈O．05];②复发性抑郁症组积极线索词诱导的OGM总分显著高于首发抑郁症组[分别为（2．40±1．36）分,（1．70±1．08）分,t=2．308,P〈0．05];③OGM与BDI总分、HAMD总分以及认知障碍因子、迟缓因子呈高度的正相关性（r=0．497,P〈0．05;r=0．552,P〈0．05;r=0．631,P〈0．05;r=0．553,P〈O．05）。结论与首发性抑郁症患者相比,复发性抑郁症患者的OGM更为严重,抑郁症患者的OGM亦能够增加抑郁症的复发频率,加重认知障碍、迟缓症状。     

铜绿假单胞菌噬菌体PaP3整合位点的鉴定

目的：确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP3在宿主菌基因组中的整合位点.方法：利用在噬菌体PaP3基因组中无酶切位点的Pst Ⅰ对溶原性细菌全基因组进行酶切,获得含有噬菌体PaP3全基因组及部分宿主菌DNA序列的大片段;然后进行第二次酶切,获得噬菌体基因组与宿主菌基因组的交界点序列,并进行克隆、测序,鉴定出杂合位点attR.根据λ噬菌体的整合机制,利用PCR反应扩增出另一杂合位点attL,根据测序结果及Blast检索确定attP与attB的位置和DNA序列.结果：经序列比对发现,attP及attB的核心位点分别位于噬菌体PaP3基因组中的t-RNAPro基因及铜绿假单胞菌PA3基因组中的t-RNALys基因中,其核心位点的DNA序列为21 bp（5＇-GGTCGTAGGT-TCGAATCCTAC-3.）.在核心位点的两侧存在正向重复序列及反向重复序列.结论：该研究为铜绿假单胞菌噬菌体的整合酶及整合机制的研究奠定了基础.     

抑制Blimp-1表达导致浆细胞去分化

目的探讨转录因子Bhmp-1在浆细胞发育中的作用。方法应用慢病毒载体稳定表达针对Blimp-1的siRNA,抑制骨髓瘤细胞J558L中Blimp-1的表达。采用免疫荧光及流式细胞技术观察Blimp-1抑制前后细胞的免疫表型变化,半定量RT-PCR检测XBP-1、J-chain、c-myc、BCMA的变化。结果Blimp-1抑制后,浆细胞表面标志CD138表达显著下降,B淋巴细胞免疫标志CD19表达增加。同时,与浆细胞功能及存活密切相关的XBP-1、J-chain、BCMA基因表达下降,而促进B淋巴细胞增殖发育的c-myc表达上升。结论浆细胞中Blimp-1被抑制后,浆细胞发育程序出现再编程,发生了去分化现象,返回到更早期的发育阶段,提示Blimp-1特异性shRNA有可能用于浆细胞相关疾病的治疗。     

头针结合康复训练治疗小儿脑性瘫痪40例

目的:观察头针结合康复训练治疗小儿脑性瘫痪的临床疗效。方法:选择2012年5月—2015年5月在本院儿科以及针灸科就诊的脑性瘫痪患儿40例,按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组20例。治疗组给予头针结合康复训练治疗,对照组给予康复治疗。结果:治疗组患儿治疗后自理能力、认知力、运动能力评分与对照组比较,有统计学意义(P0.05);治疗组有效率为70%,对照组有效率为40%,两组有效率比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:头针结合康复训练治疗小儿脑性瘫痪疗效显著。     

Meridian Tropism of Polygoni Avicularis Herba by Tissue Distribution of Avicularin in Rats

Objective To observe the meridian tropism of Polygoni Avicularis Herba by tissue distribution of avicularin in rats.Methods Tissue distribution of avicularin in rat following a single iv administration...     

结直肠癌肝转移患者行全腹腔镜与腹腔镜辅助同期切除手术的疗效观察

目的 探讨结直肠癌肝转移(CRLM)患者采用全腹腔镜与腹腔镜辅助同期切除术治疗的临床疗效比较.方法 选取2010年2月至2015年4月间大连大学附属新华医院收治的68例CRLM同期切除患者,采用随机数表法分为辅助组和全镜组,每组34例.辅助组患者采用腹腔镜结直肠癌(CRC)根治术联合开腹CRLM切除术治疗,全镜组患者采...     

曲美他嗪对非ST段抬高急性冠脉综合征患者心肌缺血和心率变异的影响

目的:观察曲美他嗪对非ST段抬高的急性冠脉综合症(NSTEACS)患者疗效及心率变异(HRV)的影响,评价其心肌保护作用。方法:选择NSTEACS患者74例,随机分为两组:一组使用阿司匹林、单硝酸异山梨酯、氟伐他汀、美托洛尔等常规治疗,另一组在常规治疗基础上加用曲美他嗪治疗。总观察疗程为8周,观察患者用药前后心率、血压、胸痛发作频率及持续时间、硝酸甘油每天含服次数、心肌缺血的范围及程度以及24 h动态心电图变化,进行疗效评定和HRV分析。结果:曲美他嗪组(有效率94.4%,显效率72.2%),疗效明显优于常规治疗组(有效率65.8%,显效率36.8%)(P<0.05或P<0.01)。SDNN、SDANN、rMSSD、PNN50均升高,低频谱功率(LF)、低频/高频谱功率比值(LF/HF)均降低,有统计学差异(P均<0.05)。高频谱功率(HF)升高,但无统计学差异(P<0.05)。结论:曲美他嗪能有效改善NSTEACS患者心肌缺血及HRV。