LncRNA ABHD11-AS1在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其机制

［摘要］目的： 探讨长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)α/β 水解酶结构域蛋白11的反义链1(α/β hydrolase domain containing protein 11 antisense strand 1,ABHD11 AS1)在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法: 通过GEPIA平台分析ABHD11 AS1在胰腺癌中的表达和患者预后。采用荧光实时定量PCR(qRT PCR)检测人胰腺癌PANC1、MIApaca 2和PaTu8988细胞中ABHD11 AS1表达,CCK8法计算Erastin半数抑制浓度(IC50)。在PANC1细胞中过表达ABHD11 AS1,分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1 ABHD11 AS1质粒;在PaTu8988细胞中干扰ABHD11 AS1表达,分别转染siControl、siRNA1、siRNA2,qRT PCR检测转染效率,分别予以对照(0 μmol/L Erastin)、Erastin(IC50浓度)处理,CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测丙二醛和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;另在pcDNA3-1-ABHD11-AS1和siRNA1组加入Erastin的同时加入铁死亡挽救剂Ferrostatin 1,坏死挽救剂Necrostatin-1或凋亡挽救剂Z-VAD-FMK,CCK8法检测细胞活性;免疫印迹法检测5组胰腺癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)表达水平。结果: 胰腺癌组织中ABHD11-AS1表达水平明显高于癌旁组织,高表达ABHD11-AS1组患者预后较差(P<0.05)。ABHD11-AS1相对表达量由低到高依次是人胰腺癌PANC1、MIApaca 2和PaTu8988细胞,Erasin IC50趋势与ABHD11 AS1表达量相同,依次是2.245、11.760、17.120 μmol/L。与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1 ABHD11 AS1组细胞活性及GSH含量明显增高,而丙二醛含量明显降低(P<0.05);与siControl组相比,siRNA1组和siRNA2组细胞活性及GSH含量明显降低,丙二醛含量明显增高(P均<0.05)。仅Ferrostatin-1可以挽救pcDNA3.1-ABHD11 AS1和siRNA1组细胞活性(P<0.05)。过表达ABHD11 AS1可促进mTOR活化,增强GPX4表达(P<0.05);而干扰ABHD11 AS1则相反。结论: LncRNA ABHD11 AS1可通过活化mTOR促进GPX4表达,从而促进胰腺癌细胞铁死亡抵抗。     

超声心动图评价急性心肌梗死Ⅱ期心脏康复前后心功能及同步性

目的： 应用超声心动图评价急性心肌梗死患者行Ⅱ期心脏康复前后心功能及同步性改变。方法: 对20例急性心肌梗死患者Ⅱ期心脏康复前后使用脉冲多普勒结合心电图计算主肺动脉射血前时间差,即心室间机械延迟时间(IVMD)。于心尖四腔心切面,使用M型超声心动图,计算出三尖瓣环收缩期位移(TAPSE)。使用实时三维超声心动图获取心尖四腔心全容积图像,在Qlab 9.0软件下获得心率、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末容积(LVEDV)、左房最大容积(LAVmax)和左房射血分数(LAEF)。软件自动计算出左室16节段达收缩期最小容积点时间最大时间差(Tmsv16 Dif)心率校正值,即LVTmsv16 Dif/R R(%),以及左房16节段达收缩期最小容积点时间最大时间差(Tmsv16 Dif)心率校正值,即LATmsv16 Dif/R R(%)。结果: 急性心肌梗死患者Ⅱ期心脏康复后心率、LATmsv16 Dif/R R(%)明显低于康复前(P<0.001和P<0.05),LVEF、LAEF明显高于康复前(P<0.001和P<0.05),康复前后IVMD、TAPSE、LVEDV、LAVmax、LVTmsv16 Dif/R R(%)比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论: 急性心肌梗死患者行Ⅱ期心脏康复后左心收缩功能及左房同步性较康复前改善。     

抗乙酰胆碱受体单链抗体对致病性抗体结合活性的抑制作用

为探讨单链抗体 (ScFv )对重症肌无力 (MG )的特异性免疫治疗作用 ,从分离自MG患者胸腺的抗乙酰胆碱受体(AchR )抗原结合片段Fab6 37构建单链抗体ScFv6 37。应用放射免疫测定法测定了ScFv6 37与刺激抗原人AchR的特异性结合活性以及与相关抗原大鼠AchR和电鳐AchR的交叉反应 ,应用竞争性ELISA测定抑制致病性抗AchR完整抗体IgG6 37与人AchR结合活性。结果发现ScFv6 37只能与人AchR结合 ,不能与大鼠和电鳐的AchR结合。对IgG6 37与人AchR结合的抑制率为 17 5 %～ 32 9%。表明单链抗体对AchR具有一定的“保护”作用。     

在活体上进行关节内压力测量的实验技术

引言有关关节润滑问题的文章论述仅介绍了关于关节外的变化,如:载荷,和总括的运动的测量,但对于润滑的机理讲的并不清楚。在关节润滑中的两个最重要的参数,即液膜的厚度和压力分布状态,并不能由载荷和运动的测量推导得出。McCutchen对猪的弦骨软骨与玻璃之间的摩擦力进行了测量,并推导出液体流出软骨的情况。Walker等〔8〕对人的软骨小型试样与玻璃之间的受压膜性质进行了研究,并得出了液体流入软     

神经元性一氧化氮合酶活性在app/ps1双转基因AD模型小鼠皮质和海马的分布

本实验用 4～ 5月龄和 15～ 16月龄的 app/ ps1dtg小鼠各 5只 ,同龄野生型小鼠每个年龄组各 5只 ,用β-NADPH组织化学染色显示神经元一氧化氮合酶活性 ,刚果红组织学染色显示神经炎性斑 ,无偏性体视学计量皮质和海马神经炎斑的总体积 ,研究神经元一氧化氮合酶活性在 app/ ps1双转基因 (app/ ps1dtg) AD模型小鼠大脑皮质和海马的异常分布 ,探讨其在该模型小鼠及 AD患者脑内病理改变中的作用。结果显示 ,n NOS阳性神经元在各组小鼠皮质和海马内的分布没有区别 ,4～ 5月龄 app/ps1dtg小鼠皮质和海马可见神经炎斑 (NP)和营养不良性 NOS阳性神经突 (DTN) ;15～ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质和海马内NP的体积分别是 4～ 5月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质 NP的 5倍 (P<0 .0 0 5 )和 8倍 (P<0 .0 0 1) ;15～ 16月龄 app/ ps1dtg小鼠皮质内 DTN的体积明显增大 (P<0 .0 1) ;且伴有 NOS阳性神经元形态的改变及海马 CA1 区 NOS阳性神经元数量的减少 (P<0 .0 5 ) ,DTN的形成与 NP呈正相关关系 (r=0 .85 ,P<0 .0 5 )。本实验结果表明 ,app/ ps1dtg小鼠能够模拟 AD患者脑内 NOS阳性神经元的病理改变 ,DTN的形成可能与 Aβ的毒性作用有关 ,DTN产生的 NO可能参与 app/ ps1dtg小鼠和 AD的神经病理过程。     

太空发育鸡胚的前庭感受器细胞形态学研究

为了探讨太空微重力对鸡胚前庭感觉上皮细胞的形态发育的影响 ,选取在航天飞机 (STS-2 9)发育鸡胚和地面发育鸡胚各两只 ,利用计算机显微测量技术分别测量椭圆囊和球囊的毛细胞、支持细胞核的切面面积、周长、形状系数。太空发育鸡胚的球囊支持细胞核的切面面积、周长显著大于地面组 ,形状系数无差异 ;太空发育鸡胚的椭圆囊支持细胞核的切面面积、周长、形状系数以及椭圆囊和球囊毛细胞的切面面积、周长与地面发育鸡胚相比无明显差异。微重力可能对球囊支持细胞核的体积发育有影响 ,对椭圆囊和球囊的毛细胞以及椭圆囊支持细胞核的形态发育无影响。     

Race and the response to adrenergic blockade with carvedilol in patients with chronic heart failure

BACKGROUND: The benefits of angiotensin-converting-enzyme inhibitors and beta-blockers may be smaller in black patients than in patients of other races, but it is unknown whether race influences the response to carvedilol in patients with chronic heart failure. METHODS: In the U.S. Carvedilol Heart Failure Trials Program, 217 black and 877 nonblack patients (in New York Heart Association class II, III, or IV and with a left ventricular ejection fraction of no more than 0.35) were randomly assigned to receive placebo or carvedilol (at doses of 6.25 to 50 mg twice daily) for up to 15 months. The effects of carvedilol on ejection fraction, clinical status, and major clinical events were retrospectively compared between black and nonblack patients. RESULTS: As compared with placebo, carvedilol lowered the risk of death from any cause or hospitalization for any reason by 48 percent in black patients and by 30 percent in nonblack patients. Carvedilol reduced the risk of worsening heart failure (heart failure leading to death, hospitalization, or a sustained increase in medication) by 54 percent in black patients and by 51 percent in nonblack patients. The ratios of the relative risks associated with carvedilol for these two outcome variables in black as compared with nonblack patients were 0.74 (95 percent confidence interval, 0.42 to 1.34) and 0.94 (95 percent confidence interval, 0.43 to 2.05), respectively. Carvedilol also improved functional class, ejection fraction, and the patients' and physicians' global assessments in both the black patients and the nonblack patients. For all these measures of outcome and clinical status, carvedilol was superior to placebo within each racial cohort (P<0.05 in all analyses), and there was no significant interaction between race and treatment (P> 0.05 in all analyses). CONCLUSIONS: The benefit of carvedilol was apparent and of similar magnitude in both black and nonblack patients with heart failure.