Smad4基因敲除对小鼠听力和前庭功能的影响

目的研究Smad4基因敲除（Smad4＋/-）小鼠听力和前庭功能的改变.方法检测Smad4基因敲除小鼠（1、2、3、6月龄）与同种同月龄的野生型（Smad4＋/＋）小鼠的ABR阈值.按Steal的方法测定小鼠的平衡功能,包括游泳试验、空间姿势反射,以及一般行为观察.结果 2、3、6月龄Smad4＋/-小鼠听力较同种野生型小鼠明显下降,两种基因型小鼠听阈有显著性差异（P〈0.01）,但1月龄的不同基因型小鼠听力水平无统计学差异（P〉0.05）.Smad4基因敲除小鼠与野生型小鼠外观和体重无明显差异（P〉0.05）,生后至6月龄的Smad4＋/-小鼠与野生型小鼠均无前庭功能异常和行为异常.结论单倍体Smad4基因敲除小鼠听力明显障碍,但前庭功能基本正常.表明Smad4对内耳的听觉有重要作用,可能存在着单倍体功能不全性;而单倍体Smad4基因缺失对于前庭功能影响可能不明显.     

小鼠耳蜗胚胎发育过程中Smad4基因的表达

目的探讨小鼠内耳胚胎发育演变过程，检测Smad4基凶在小鼠耳蜗中的表达情况。方法选用耳廓反应灵敏、健康的C57BL／6小鼠作为种鼠交配，用观察阴栓方法获得适龄胎鼠，≤17天取胚胎头，≥18天在显微镜下取耳蜗，胚胎头水平冰冻切片，耳蜗平行于蜗轴冰冻切片，HE染色方法观察小鼠耳蜗发育形态演变过程，免疫组织化学方法检测Smad4蛋白在小鼠胚胎10～20天耳蜗巾的表达情况。结果胚胎10天，听泡发育．胚胎12天听泡下部有蜗管始基形成并开始发育．胚胎18天，蜗管发育2圈，形成了可以辨认的内、外毛细胞．血管纹开始分化。Smad4从胚胎15天才开始表达，最初表达部位为耳蜗底转将发育成蜗轴以及柱状上皮分化为感觉细胞及支持细胞的区域，但在胚胎早期表达较弱，后期在耳蜗内广泛表达，在螺旋器、血管纹、前庭膜均有表达，且表达逐渐增强，而在蜗轴部位的表达逐渐减弱。结论Smad4在小鼠内耳分化期有阳性表达，且表达具有明显的阶段性和区域性，说明其参与内耳听觉器官的发育过程并且可能存耳蜗的形成过程中起着重要的作用。