兰州地区儿童结核感染流行情况调查

为了解兰州地区儿童结核感染状况,自1994年9月～1995年10月采用PPD皮试(结核菌素试验)及胸部X线摄片调查了兰州市郊区共3000名儿童。现将调查情况及结果报告如下。 1 材料和方法 1.1 调查对象:城区5所幼儿园3 1/2～6岁小儿934名,1所小学1～4年级、年龄7～11岁学生1146名,郊区2所小学1～4年级、年龄7～12岁学生920名,共3000名。均为整体调查。 1.2 试剂:所用PPD皮试液为卫生部兰州生物制品研究所生产的卡介苗素纯蛋白微生物(BCG-     

血管内皮生长因子基因多态性与先天性心脏病相关性的Meta分析

目的 评价血管内皮生长因子（VEGF）等位基因、基因型、基因单倍型多态性与先天性心脏病（CHD）的相关性。方法 检索Cochrane图书馆、Medline、PubMed、EMBASE、中国期刊全文数据库、万方数据库及中国生物医学文献数据库,检索起止时间均为建库至2011年12月,并且对重要文献的参考文献采取手工回溯检索。获取VEGF与CHD相关性的病例对照研究和传递不平衡检验文献。对文献进行质量评价。采用RevMan 5.1.1软件进行异质性检验,根据检验结果选择适当的效应模型进行Meta分析。结果 6篇文献共10项独立研究纳入分析,漏斗图检验存在发表偏倚。Meta分析结果显示：① VEGF C-2578A和G-1154A位点等位基因变异显著增加DiGeorge综合征患者的CHD易感性,OR分别为1.40（95%CI：1.04～1.16）和1.87（95%CI：1.27～2.75）;G-634C位点的等位基因变异显著增加普通病例的CHD易感性,OR=1.29, 95%CI：1.02～1.62。② G-1154A位点（AA+AG）为DiGeorge综合征患者合并CHD的危险因素,OR=2.10, 95%CI：1.32～3.34。③单倍型AAG在DiGeorge综合征患者中显著增加CHD易感性,OR=1.82, 95%CI：1.31～2.54;单倍型CGC显著降低普通病例CHD风险的保护作用,OR=0.79, 95%CI：0.63～0.99。结论 VEGF等位基因、基因型、基因单倍型多态性与CHD易感性存在一定的相关性,且在DiGeorge综合征患者与普通患者间存在差异;在不伴DiGeorge综合征的人群中,特定单倍型（CGC）则有显著降低CHD风险的保护作用,其作用机制尚需进一步明确。     

pEGFP-N1-DCN重组质粒抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖和侵袭

目的构建pEGFP-N1-DCN真核表达载体并转染胃癌细胞SGC-7901,观察其对细胞增殖、周期、迁移、侵袭的影响。方法将细胞分为3组,分别为空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组,质粒通过脂质体转染SGC-7901,RT-PCR及Western blot方法检测表皮生长因子受体(EGFR)及TGF-β1的表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell检测核心蛋白聚糖(DCN)对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示,DCN使EGFR及TGF-β1的表达均降低(P<0.05);MTT法检测发现72 h时空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组细胞D(490)值分别为(1.190±0.037)、(1.169±0.052)、(0.572±0.021),DCN使细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪分析细胞周期空白对照组、pEGFP-N1组及pEGFP-N1-DCN组细胞G0～G1的细胞数分别为(46.12±0.63)、(46.07±0.82)、(56.36±0.92),DCN使细胞阻滞在G0～G1(P<0.05);Transwell迁移、侵袭实验显示DCN使细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.05)。结论 DCN通过抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等起到抗肿瘤作用。     

~(125)I标记单克隆抗体3H11在胃癌放射免疫导向手术中应用的初步研究

探讨125I标记的抗胃癌单克隆抗体McAb 3H11在胃癌放射免疫导向手术(RIGS)中的应用价值。方法：McAb 3H11以Iodogen法标记125I(放射性比活度37kBq/μg蛋白),胃镜直视下注射于15例胃癌患者癌周粘膜下,给药剂量7.4～18.5MBq/0.2～0.5mg蛋白;给药后4～11天手术,术中使用手持式γ探测仪对肿瘤、胃周淋巴结、手术切缘等靶部位(T)进行放射性检测,以正常大网膜或远离肿瘤边缘8cm以上的正常胃壁为对照本底(NT),T/NT≥3.5为判别胃癌及浸润胃壁的标准,T/NT≥3.0为判定转移淋巴结的标准;探测结果与术后病理检验结果对照;对探测阳性而术后常规病理检验阴性的淋巴结重新连续切片,进行免疫组织化学染色。结果：RIGS判别切缘癌浸润的总特异性和准确率分别为96.5%和93.3%;注射125I-McAb 3H11后6～8天手术的患者RIGS结果较为满意(n＝7例),判别区域淋巴结转移的敏感度、特异性及准确率分别为80.8%、96.8%和89.5%,免疫组化染色证实RIGS检出部分病例中常规病理检验未发现的淋巴结微小转移癌;实施RIGS对患者及术者均无明显不良影响。结论：应用125I标记抗胃癌单克隆抗体McAb 3H11进行胃癌放射免疫导向手术,可有效判别区域淋巴结转移,有助于指导胃癌根治性手术的实施。     

重组人脂联素基因对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型作用的探讨

目的研究重组脂联素(adiponectin,AdipoQ)基因在大鼠体内的表达情况,探讨其对非酒精性脂肪性肝病(Nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型大鼠肝细胞脂肪变性的治疗作用,为人AdipoQ在NAFLD的基因治疗方面的应用奠定基础。方法建立大鼠NAFLD实验模型。将携带重组质粒pEGFP-N1-AdipoQ的减毒沙门氏菌通过口服饲喂途径,注入NAFLD大鼠体内,采用荧光显微镜检测肝组织内重组AdipoQ基因表达情况;同时动态测定大鼠血浆中游离脂肪酸(free fatty acid,FFA),甘油三酯(triglycercide,TG)含量,并采用肝组织切片HE及苏丹Ⅲ染色研究其对肝细胞脂肪变性的抑制情况。结果以携带重组质粒pEGFP-N1-Adi-poQ的减毒沙门氏菌灌胃NAFLD大鼠后,荧光显微镜下可见肝组织内EGFP-AdipoQ融合蛋白的表达;与对照组相比,其血浆中FFA,TG含量降低(p0.05),肝细胞脂肪变性程度明显减轻。结论减毒沙门氏菌能够将重组AdipoQ基因导入大鼠体内并表达;重组脂联素能够使肝细胞脂肪变性程度减轻,对NAFLD有治疗作用。     

毒毛旋花子苷元对豚鼠心室肌细胞内钙浓度的影响

观察毒毛旋花子苷元(strophanthidin, Str)对分离豚鼠心室肌细胞内游离钙浓度(［Ca²⁺］_i)的影响。酶解分离豚鼠心室肌细胞, 用Fluo 3-AM负载, 激光共聚焦显微镜法测定单个豚鼠心室肌细胞［Ca²⁺］_i的荧光密度。Str可浓度依赖性地升高［Ca²⁺］_i, Str (10 μmol·L^-1)在［Ca²⁺］_i升高达峰值时, 可使细胞挛缩, 而Str (1和10 nmol·L^-1)对细胞形态无影响。TTX、 尼索地平或升高细胞外钙可影响Str (1和100 nmol·L^-1)对［Ca²⁺］_i的升高作用,而对Str (10 μmol·L^-1)无明显影响。在外液中加入ryanodine或去除细胞外钙, 则3个检测浓度的Str升高［Ca²⁺］_i作用均被明显抑制。在无K⁺、 无Na⁺液中, 10 μmol·L^-1 Str升高［Ca²⁺］_i的作用减弱, 而Str (1和100 nmol·L^-1)升高［Ca²⁺］_i的作用无明显影响。加入TTX、 尼索地平或增加细胞外的钙离子浓度, 则3个检测浓度Str的作用均受到影响。提示低浓度Str对［Ca²⁺］_i的升高作用与抑制Na⁺、K⁺-ATP酶活性无关, 而与促进L-型钙通道和TTX敏感性钠通道的“slip-mode”钙电导有关; 高浓度Str升高［Ca²⁺］_i的作用则是抑制Na⁺、K⁺-ATP酶的结果。此外, Str对［Ca²⁺］_i的升高作用还与直接作用于ryanodine受体促进内钙释放有关。     

基因多态性对人胎盘ABCG2基因mRNA及其蛋白表达的影响

目的 评估单核苷酸多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及蛋白表达的影响.方法 选择2013年3月至5月在四川大学华西第二医院产科待产分娩的46例汉族正常孕产妇及新生儿为研究对象,收集其胎盘及脐带标本（本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,获得胎盘及脐带标本时均取得产妇及家属的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书）.其中,脐带标本用于胎儿DNA的提取,胎盘标本用于ABCG2基因的RNA及蛋白提取;通过测序确定ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点的基因型;分别通过实时荧光定量（RT）-PCR及Western-blotting法获得ABCG2基因的mRNA及蛋白表达情况.对ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点不同基因型之间mRNA及蛋白相对表达量进行比较.ABCG2基因421C＞A及34G＞A多态位点不同基因型之间孕产妇及新生儿一般临床资料比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.结果 对于421C＞A多态位点,携带CC、CA、AA各基因型的胎盘标本的平均mRNA及蛋白表达水平比较,其差异均无统计学意义（F=1.060,3.051;P＞0.05）;对于34G＞A多态位点,携带GG基因型的胎盘标本平均mRNA及蛋白表达水平较携带AA基因型的胎盘标本高,且差异均有统计学意（q=3.540,4.720; P＜0.05）,而携带GA基因型的胎盘标本,其平均mRNA及蛋白表达水平分别与携带其他2种基因型的胎盘标本比较,其差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 421C＞A多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及蛋白的表达无影响,而34G＞A多态位点对人胎盘ABCG2基因mRNA及ABCG2蛋白（BCRP）的表达均有影响.     

儿童粒细胞减少症147例临床分析

粒细胞减少症是指由于血循环中性粒细胞绝对值减少低于正常而出现的一组疾病。其病因较多,感染所致的粒细胞减少症最为常见,但目前常见的抗生素、解热镇痛药物的滥用亦有可能为此类疾病明显高发的原因之一。本研究对近年我科收治的147例粒细胞减少症患儿进行研究总结,提高对其病因的认识,从而指导治疗。1对象与方法     

基于计算机模拟技术以埃博拉病毒跨膜糖蛋白为靶点挖掘中药抗病毒活性分子

目的 基于埃博拉病毒跨膜糖蛋白(transmembrane glycoprotein of the Ebola virus,EBOV-GP)的三维空间结构,运用计算机虚拟筛选技术从中国台湾中医药数据库TCM@TAIWAN中寻找具有抗病毒作用的中药活性分子.方法 以EBOV-GP为靶点,采用类药性评估、分子对接、分子动力...     

TCMSP 数据库中药化学成分的SARS-CoV-2 主蛋白酶抑制剂虚拟筛选

目的运用计算机模拟技术从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）的中药化学成分中挖掘 SARS-CoV-2 主蛋白酶（Main protease,Mpro）抑制剂。方法运用类药性评估、分子对接、ADME 预测、结合 自由能计算、分子动力学模拟等多轮虚拟筛选的策略,从TCMSP 数据库中筛选Mpro 抑制剂。结果共筛选得 到10 个命中分子,其中前3 位最佳命中分子为MOL003392、MOL011716、MOL002966,表现出与靶标活性口 袋关键氨基酸残基的强相互作用。结论该研究可为发现SARS-CoV-2 Mpro 小分子抑制剂提供新的思路。