病理生理学网络课程教学的设计和应用

为探索以课堂理论教学为主,网络教学为辅的新型基础医学教学模式,设计并建设了病理生理学网络课程平台。实践和问卷调查表明网络课程的应用节约了课堂教学时间,提高了课堂教学效率,丰富了课堂讲授内容,促进了学生的自主学习和师生之间教与学的互动;这种教学模式是可行的,较传统的课堂教学显示出了很大的优势。     

结核分枝杆菌耐药性的研究

目的通过对锦州市传染病医院临床痰标本结核分枝杆菌耐药率的分析,了解锦州地区结核分枝杆菌的耐药状况指导合理用药。方法取锦州市传染病医院2012年7月-2013年7月抗酸杆菌培养阳性的菌株500株,采用绝对浓度法进行4种抗结核药物的敏感性试验。结果在500株结核分枝杆菌中,278株对4种抗结核药物皆敏感,222株至少对一种药物敏感,结核菌的总耐药率为44．4％（222／500）。仅对一种抗结核药物耐药的菌株56株,总的耐单药率为11．2％。结论锦州市地区结核分枝杆菌对4种一线抗结核药物的耐药情况严重,应当引起相关医疗部门重视。     

葡萄糖调节蛋白78与肿瘤相关性的研究进展

肿瘤的发生发展涉及多个因素的参与,其发生机制尚不完全清楚,有研究表明,在肿瘤细胞中葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)的异常高表达有抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤的耐药、复发及转移的作用。GRP78又称免疫球蛋白重链结合蛋白,是一个定位于内质网上的分子伴侣。抑制GRP78的表达水平或将GRP78的启动子连接自杀基因可以用于肿瘤的治     

C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型的建立

目的建立C57BL6近交系小鼠前列腺癌原位移植瘤模型,观察在体前列腺癌生长转移的生物学特性。方法利用显微外科技术,将保持了完整组织结构的、移植于C57BL6近交系小鼠皮下的小鼠前列腺癌块,植于C57BL6近交系小鼠前列腺两腹侧叶之间,观察移植后肿瘤转移情况及小鼠的生存期。结果C57BL6进行RM-1肿瘤块原位移植术后,第15～20天,动物出现一般状态衰竭,体重下降明显,下腹可触及包块,全部为肿瘤占据,前列腺组织见不到。原位模型组大体见癌组织广泛地浸润周围盆腔脏器,其中淋巴结(16/16)、肺部(8/16)转移。两种模型荷瘤鼠生存时间原位模型组小鼠(17.0±3.5)d短于皮下模型组(33.0±5.6)d,两者相比差异有显著性。结论本模型可较好地模拟小鼠前列腺癌体内的自然生长状况,适合用于观察前列腺癌在体条件下的生物学特性。     

大鼠不同脏器β-actin mRNA稳定性差异的实验研究

目的检测大鼠心、肝、脾、肾β肌动蛋白（β—actin）mRNA在死后不同时间的表达，为死亡时间的推断寻求客观依据。方法大鼠麻醉致死后置于18℃温度控制系统模拟死后改变，在不同时间点抽提相应组织总mRNA，利用RT—PCR技术检测β-actin mRNA的表达水平变化并对扩增产物进行半定量分析。结果大鼠心脏β—actin mRNA在死后10天内都可以检测到，肝脏β—actinmRNA在死后4天内都可以检测到，脾脏β—actin mRNA在死后12天内都可以检测到，肾脏β—actin mRNA在死后8天内都可以检测到。结论观测死后心、肝、脾、肾β—actin mRNA的变化，可为死亡时间推断提供客观依据。     

共表达p53及siRNA-VEGF质粒的构建及其在PC-3细胞中的表达

目的构建可同时表达野生型p53(wt-p53)及siRNA-VEGF的重组真核表达载体用于激素非依赖性前列腺癌的联合基因治疗。方法利用亚克隆、T-A克隆和PCR技术合成并构建pcDNA3.1-p53,siRNA-VEGF,p53/siRNA-VEGF及siRNA-scramble重组质粒。以脂质体法将上述重组质粒转染至PC-3细胞,PCR鉴定p53,VEGF基因的表达。结果克隆出wt-p53全长及带有U6启动子的siRNA-VEGF序列,经DNA测序证实序列正确,通过连接成功构建上述五种真核重组表达载体。转染细胞48 h后可见GFP(siRNA-VEGF组)明显表达;RT-PCR检测到转染后PC-3细胞中wt-p53表达增强,而VEGF表达下调。结论p53/siRNA-VEGF共表达载体的构建及其在PC-3细胞中的表达为进一步研究wt-p53和VEGF双基因对人前列腺癌作用机制为治疗作用奠定了基础。     

锌对前列腺癌PC-3M细胞侵袭能力的影响

目的探讨锌对人前列腺癌PC-3M细胞侵袭能力的影响。方法用MIT比色法检测不同剂量锌对PC-3M细胞增殖的影响;Tramwell小室检测锌对PC-3M细胞侵袭能力的影响;RT-PCR检测锌作用24h后MMP-2、MMP-9mRNA的表达;酶谱分析检测锌作用后PC-3M细胞MMP-2、MMP-9的活性变化。结果MTT检测结果表明一定剂量的锌可抑制PC-3M细胞的生长;Transwell小室实验结果显示,锌作用下PC-3M细胞穿透Matrigel膜的细胞数减少;RT-PCR结果显示锌抑制了PC-3M细胞bIMP-2和MMP-9的表达;酶谱分析表明锌作用后PC-3M细胞MMP-2、MMP-9的活性下降。结论一定剂量的锌可降低PC-3M细胞的侵袭能力,其机制可能与抑制MMP-2、MMP-9的合成和激活有关。