HIF-1α、EGFR、Caspase-3在鼻咽癌中的表达

目的研究HIF-1α、EGFR、Caspase-3在鼻咽癌中的表达及其与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法采用免疫组化S-P法检测28例鼻咽癌和25例鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α、EGFR及Caspase-3的表达,RT-PCR检测YC-1对鼻咽癌细胞CNE-2Z中EGFRmRNA表达的影响。结果在鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α和EGFR的阳性率均高于鼻咽癌组（P〈0.05）;Caspase-3的阳性率低于鼻咽癌组（P〉0.05）。Spearman相关分析显示鼻咽癌组织中HIF-1α与EGFR表达具有相关性（γ=0.387,P〈0.05）,与Caspase-3表达无明显相关性。鼻咽癌放疗后复发组织中HIF-1α阳性表达鼻咽癌患者放疗后复发时间早于阴性表达患者,但差异无统计学意义（P〉0.05）,HIF-1α与Caspase-3表达呈负相关（γ=-0.436,P〈0.05）,与EGFR表达无明显相关性。YC-1抑制CNE-2Z细胞中EGFRmRNA的表达（P〈0.01）。结论 HIF-1α及EGFR表达与鼻咽癌放射敏感性有关,EGFR可能通过非HIF-1α依赖途径参与鼻咽癌放疗后复发。     

HGF/c-Met在鼻咽癌及其淋巴结转移中的表达及意义

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met蛋白在鼻咽癌及其淋巴结转移中的表达及意义.方法 应用免疫组化SP法检测HGF和c-Met蛋白在27例鼻咽粘膜慢性炎、30例分化型非角化性鼻咽癌和20例鼻咽癌淋巴结转移中的表达.结果 鼻咽癌淋巴结转移中HGF阳性表达率为75.0%(15/20)显著高于鼻咽粘膜慢性炎(25.9%,7/27)和分化型非角化性鼻咽癌(46.7%,14/30)(P＜0.05或P＜0.01).鼻咽癌淋巴结转移和分化型非角化性鼻咽癌中c-Met蛋白阳性表达率分别为40.0%(8/20)和30.0%(9/30),均显著高于鼻咽粘膜慢性炎(3.7%,1/27)(P＜0.05或P＜0.01).HGF与c-Met在分化型非角化性鼻咽癌中呈正相关(rs=0.322,P＜0.05).结论 HGF与c-Met的过表达可能与鼻咽癌的发生发展有关.     

人胃低分化粘液腺癌细胞系和克隆株体外侵袭能力的定量研究

本文对人胃低分化液液腺癌ＭＧｃ８０－３及其克隆株Ｃ２、Ｃ３、Ｃ５、Ｃ１１体外侵袭能力进行定量研究。以鸡胚心肌作为肿瘤细胞侵袭的靶器官，用半自动数字图像分析仪检测肿瘤细胞对其侵袭能力。结果表明：ＭＧｃ８０－３母系及其克隆株的侵袭力不同，第１天和第３天时Ｃ２、Ｃ１１的侵袭力明显高于ＭＧｃ８０－３及Ｃ３、Ｃ５，到第５和第７天时，ＭＧｃ８０－３及其克隆重株的侵袭力无明显不同。各细胞系（株）２４小时开始粘附、包绕或侵袭心肌组织，随着培养时间的延长，肿瘤细胞所占据的面积呈进行性增大。本实验验证了癌细胞在侵袭过程中有粘附、溶解破坏、运动功能及分裂增生能力。人胃低分化粘液腺癌ＭＧｃ８０－３及其克隆株Ｃ２、Ｃ３、Ｃ５、Ｃ１１的体外侵袭力明显不同，其体外侵袭力，特别是在早期ＭＧｃ８０－３和克隆株之间的侵袭能力差异较大。     

胃上皮异型增生并结肠及小肠性化生中PCNA、P53蛋白和Survivin的表达及意义

目的检测胃上皮异型增生上皮并不同肠上皮化生组织中PCNA、P53蛋白和生存素（survivin）的表达及意义。方法应用组织化学法和免疫组织化学SP法检测44例结肠性化生（其中低度异型增生27例，高度异型增生17例）和51例小肠性化生（其中低度异型增生42例，高度异型增生9例）胃活检组织中PC—NA、P53蛋白和Survivin的表达。结果PCNA、P53蛋白和Survivin蛋白在胃上皮异型增生并结肠性化生与小肠性化生间的表达率差异有显著性。低度异型增生和高度异型增生间PCNA、P53蛋白和Survivin蛋白表达率差异有显著性。结论PCNA、P53和Survivin基因的改变不仅与肠上皮化生的类型有关，而且与胃上皮异型增生的程度密切相关。PCNA、P53和Survivin蛋白可作为判断胃异型增生上皮并肠上皮化生生物学行为有价值的指标。     

形态学定量测定对预测鼻咽癌细胞放射敏感性的价值

目的　研究人鼻咽癌细胞形态、DNA含量及倍体与放射敏感性的异质性之间的关系 ,探讨预测肿瘤放射敏感性的可行方法。方法　应用 2种放射敏感性不同的鼻咽癌细胞系CNE 2Z亚克隆株F1、S1,通过细胞培养及裸鼠体内实验 ,用HE染色法、Feulgen染色法和图像分析仪 ,观察这 2株细胞及其裸鼠移植瘤的形态学参数、DNA含量及倍体分布。 结果　形态参数测定表明 ,F1细胞面积、细胞体积等参数小于S1(P <0 .0 1) ,核周长、核直径大于S1(P <0 .0 1) ,核质比大于S1(P <0 .0 1)。F1细胞及裸鼠移植瘤DNA含量、DI值、5C及 >5C比例均高于S1组 (P <0 .0 1)。结论　F1、S1放射敏感性的异质性与细胞分化程度、DNA含量及 >5C比例有关 ,采用计算机图像分析法定量分析 ,可以预测鼻咽癌细胞间的放射敏感性差异     

鼻咽癌中EBV感染与某些基因产物表达的关系

目的　观察EB病毒RNA(Epstin Barrvirus ,EBV)、膜蛋白 (LMP 1)、c erbB 2、CyclinD1,bcl 2和p5 3蛋白在鼻咽癌组织中的表达 ,探讨其相互间关系及其在鼻咽癌发生发展中的作用。方法　采用原位分子杂交技术检测了 36例鼻咽癌组织中EBV编码的encodedsmallRNAs(EBERs)、用免疫组化技术检测LMP 1、CyclinD1、c erbB 2、bcl 2和 p5 3蛋白的表达。 结果　36例鼻咽癌组织中全部检出EBVRNAs ,阳性率为 10 0 % (36 /36 ) ,LMP14 4 .4 % (16 /36 ) ,CyclinD15 2 .8% (19/36 ) ,c erB 25 8.3% (2 1/36 ) ,bcl 2 4 4 .4 % (16 /36 ) ,p5 333.3% (12 /36 )。鼻咽癌组织中EB病毒感染与c erB 2、CyclinD1癌基因的表达、p5 3抑癌基因的失活之间有明显的关系。结论　鼻咽癌与EB病毒作为致瘤病毒激活癌基因蛋白的表达密切相关。鼻咽活检组织中有EBERs及LMP 1的检出 ,对确定鼻咽癌的诊断具有一定的价值。     

无琼脂糖培养细胞的石蜡包埋方法

鉴于培养细胞的细胞爬片或涂片的HE染色、特殊染色和免疫组化染色存在缺陷,吴惠茜和高洁等[1,2]摸索了细胞的石蜡切片方法,证明细胞石蜡切片的HE和免疫组化染色均比细胞爬片和涂片的结果优良。近3年来,广东医学院病理学教研室在对鼻咽癌细胞系CNE2Z以及其他细胞株进行研究时,运     

大鼠心肌缺血及再灌注诱发凋亡与脊髓中神经元型一氧化氮合酶和N-甲基-D-天门冬氨酸受体1表达的关系

目的:探讨脊髓中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和N-甲基-D-天门冬氨酸受体l(NMDAR1)含量变化与心肌缺血及再灌注诱发的心肌细胞凋亡的关系.方法:将入选的70只大鼠随机分成假手术对照组(C组)、缺血Ⅰ组(Ⅰ/I组)、缺血Ⅱ组(Ⅱ/I组)、缺血Ⅲ组(Ⅲ/I组)、缺血再灌注Ⅰ组(Ⅰ/IR组)、缺血再灌注Ⅱ组(Ⅱ/IR组)和缺血再灌注Ⅲ组(Ⅲ/IR组)共7组,每组10只.C组只在冠状动脉左前降支埋线持续2 h.Ⅰ/I,Ⅱ/I和Ⅱ/I组分别结扎左前降支1 h,2 h和3 h.Ⅰ/IR,Ⅱ/IR和Ⅲ/IR组都先结扎左前降支2 h,然后分别松扎0.5 h,1.5 h和3 h.测定各组大鼠心肌凋亡指数、脊髓中nNOS与NMDAR1的阳性率.结果:与C组比较,Ⅰ/I、Ⅱ/I、Ⅲ/I、Ⅰ/IR、Ⅱ/IR、Ⅲ/IR组的心肌凋亡指数、脊髓中nNOS与NMDAR.的阳性率均升高(P＜0.05).分别与Ⅰ/I、Ⅱ/I、Ⅲ/I组比较,Ⅰ/IR、Ⅱ/IR、Ⅲ/IR组的心肌凋亡指数、脊髓中nNOS与NMDAR.的阳性率均升高(P＜0.05).脊髓中nNOS与NMDAR1的阳性率间呈正相关(r＝0.98,P＜0.01).结论:心肌缺血及再灌注诱发心肌细胞凋亡时,脊髓中nNOS与NMDAR1的阳性率明显升高,脊髓中nNOS和NMDAR1可能共同促进心肌缺血及再灌注诱发的心肌细胞凋亡.     

胰岛素样生长因子-1对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响。方法用脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7极化为M1型巨噬细胞,制备炎症模型即条件培养基(CM),未加LPS诱导组为对照组即非条件培养基(nCM)。体外培养VSMC分为5组,分别予nCM、CM、CM+IGF-1 60 ng/ml、CM+IGF-190 ng/ml、CM+IGF-1 120 ng/ml干预,用噻唑蓝(MTT)法检测各组吸光度(A)值,以A值反应各组VSMC的数量。结果巨噬细胞RAW264.7在LPS 0 ng/ml、10 ng/ml、100 ng/ml、1μg/ml、10μg/ml浓度刺激下各组上清液中IL-6的浓度分别是(6.75±0.12)pg/ml、(7.82±1.53)pg/ml、(44.09±1.58)pg/ml、(155.71±23.93)pg/ml、(436.59±3.15)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.01);VSMC在5组不同干预下各组A值分别是(0.53±0.07)、(0.26±0.06)、(0.30±0.10)、(0.62±0.09)、(0.55±0.05),差异有统计学意义(P<0.01)。结论 M1型巨噬细胞可抑制VSMC增殖,但IGF-1可拮抗M1型巨噬细胞对VSMC增殖的抑制作用,本实验中IGF-1促进VSMC增殖的最适浓度为90 ng/ml。     

胃上皮异型增生并肠性化生PCNA、Cdk4和Survivin的表达

目的探讨胃上皮异型增生并结肠及小肠性化生组织中PCNA、Cdk4和Survivin表达的意义。方法应用组织化学法和免疫组织化学SP法检测44例结肠性化生(其中低度异型增生27例,高度异型增生17例)和51例小肠性化生(其中低度异型增生42例,高度异型增生9例)胃活检组织中PCNA、Cdk4和Survivin的表达。结果PCNA、Cdk4和Survivin蛋白在胃上皮异型增生并结肠性化生与小肠性化生间的表达有显著性差异。低度异型增生和高度异型增生间PCNA和Survivin蛋白表达有显著性差异。Cdk4低度异型增生和高度异型增生间表达无显著性差异。结论PCNA、Cdk4和Survivin基因的改变不仅与肠上皮化生的类型有关,而且与胃上皮异型增生的程度密切相关。PCNA、Cdk4和Survivin蛋白可作为判断胃异型增生上皮并肠上皮化生生物学行为有价值的指标。