膀胱癌细胞Cx43对顺铂抗肿瘤作用影响研究

目的 连接蛋白43(connexin43,Cx43)在人体正常组织及肿瘤组织中广泛表达,并且参与细胞的生长控制和组织分化.本研究探讨采用RNA干扰技术沉默膀胱癌5637细胞株Cx43蛋白表达对顺铂化疗敏感性的影响.方法 体外培养膀胱癌5637细胞和正常尿路上皮SV-HUC-1细胞,采用蛋白质印迹法检测膀胱癌5637细胞系和正常尿路上皮SV-HUC-1细胞中Cx43蛋白表达,应用免疫荧光技术检测膀胱癌5637细胞系中Cx43蛋白的定位.采用RNA干扰技术沉默膀胱肿瘤5637细胞株Cx43蛋白的表达并用顺铂(3μg/mL)处理SiRNA-Cx43组(实验组)和SiRNA-Control(对照组)后,通过CCK-8检测实验组、对照组及野生型5637细胞的增殖情况;采用流式细胞术检测两组癌细胞的凋亡;采用蛋白质印迹法检测顺铂处理后野生型5637细胞后细胞中Cx43、Cleaved Caspase-3的表达及实验组和对照组中Cx43、Cleaved Caspase-3和Bcl-2的表达.结果 膀胱癌5637细胞中Cx43表达较正常尿路上皮细胞高,相对蛋白表达量分别为1.013±0.102和0.556±0.054,两细胞系比较差异有统计学意义,t=3.789,P=0.019;免疫荧光检测Cx43主要定位于细胞质中.CCK-8结果显示,膀胱癌5637细胞随着顺铂药物的浓度(0.75、1.5、3和6μg/mL)和时间(0、1、2、3 d)的增加,细胞的增殖减少,采用重复测量方差分析,各组间比较,差异有统计学意义,F=153.634,P＜0.001;实验组增殖较对照组明显减少,差异有统计学意义,F=9.949,P=0.02.流式细胞仪检测结果显示,实验组和对照组凋亡率分别为(63.00±4.58)％和(34.33±6.03)％,差异有统计学意义,t=7.457,P＜0.01.蛋白质印迹法结果显示,5637细胞随着药物(顺铂3 μg/mL)作用时间增加,Cx43蛋白表达逐渐降低,差异有统计学意义,F=178.868,P＜0.001;而CleavedCaspase-3逐渐升高,差异有统计学意义,F=21.643,P＜0.001.顺铂(3μg/mL,4h)处理实验组和对照组后,CleavedCaspase-3蛋白相对表达量分别为0.740±0.092和0.373±0.091,差异统计学意义,t=6.394,P=0.001;BclL-2蛋白相对表达量分别为0.260±0.066和0.817±0.068,差异统计学意义,t=4.814,P=0.005 结论 沉默膀胱癌5637细胞中Cx43蛋白表达能提高顺铂的敏感性,可能与反常定位于细胞质中的Cx43参与线粒体介导的凋亡途径有关.     

Cx43通过P38/MAPK信号途径增强膀胱癌细胞的侵袭能力

目的：探讨连接蛋白43（connexin 43,Cx43）对膀胱癌细胞侵袭能力的影响及其可能的作用机制。方法: 选取2014年6月至2015年9月间承德医学院附属医院泌尿外科52例膀胱癌手术组织标本及32例癌旁组织,以及人膀胱癌细胞株5637。用免疫组化方法检测膀胱癌组织中Cx43蛋白表达。将Cx43脂质体、空白脂质体、siRNA及siRNA对照质粒转染5637细胞,Western blotting验证过Cx43表达和干扰效果;用Transwell侵袭实验检测5637细胞侵袭能力的变化,用Western blotting检测5637细胞MMP-2、MMP-9和P-P38蛋白表达水平的变化。结果: 膀胱癌组织中Cx43蛋白的表达水平明显高于癌旁组织\[(5.21±0.33) vs（2.84±0.19）,P<0.01\]。转染Cx43脂质体和siRNA成功上调/下调5637细胞中Cx43的表达。Cx43过表达组5637细胞的侵袭能力高于对照组\[穿膜细胞数：（1.36±0.04） vs （0.70±0.15）个,P<0.01\], siRNA干扰组细胞的侵袭能力低于对照组\[穿膜细胞数：（0.20±0.08） vs （0.59±0.13）个,P<0.05）。Cx43过表达组细胞MMP-2、MMP-9、P-P38/P38蛋白水平均高于对照组（P<0.01或P<0.05）,siRNA干扰组均低于对照组低(均P<0.01)。结论: Cx43增强膀胱癌5637细胞的侵袭能力,其机制可能是通过激活P38/MAPK信号途径实现的。     

基于纳滤分离优势优化丹参注射液的生产浓缩工艺

目的：优化丹参注射液生产过程中的浓缩工艺。方法以酚酸类成分丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B的保留率为指标,分析常压、减压、纳滤、纳滤-减压浓缩在丹参提取液浓缩工序中的可行性。结果常压和减压浓缩影响酚酸成分组成;纳滤浓缩无明显影响,成分保留率均大于93%,但药液比重和黏度影响浓缩效率;纳滤-减压联用浓缩,成分保留率大于91%,对物质组成影响不明显。结论纳滤在含有热敏性成分的中药药液浓缩中技术优势明显,应用前景广阔。     

单纯性肥胖症的耳穴贴压治疗临床研究

收集整理近年来采用耳穴贴压治疗单纯性肥胖症的临床报道,主要从耳穴贴压的特点、类型以及与其他针刺疗法的疗效进行对比等方面进行综合论述,认为耳穴贴压治疗单纯性肥胖症疗效显著,具有独特的优越性.     

当归的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附联用工艺的研究

目的对当归的超临界CO2萃取-大孔树脂吸附联用技术的工艺进行研究.方法当归的超临界CO2萃取,主要对萃取压力、萃取温度和萃取时间3个因素进行了正交考察,选用L9(34)正交表,以挥发油中主要成分藁本内酯为考察指标,优选出最佳萃取条件;对其萃取药渣采用水提-大孔树脂精制,以阿魏酸为指标,考察了树脂的种类、用量比例、醇洗脱的浓度及用量,优选出最佳的精制条件.结果当萃取压力30MPa、温度为35℃,萃取2h,解析压力和温度分别为6Mpa和60℃时,当归的萃取物中挥发油得率为1.52%,其中藁本内酯的相对提取率为63.21%;而对萃取的药渣水提取后上AB8树脂,用量为以阿魏酸计为8.64mg/g干树脂,以4倍柱体积60%乙醇为洗脱溶媒时,阿魏酸的提取率(相对于水提夜)为94.33%.结论采用超临界CO2萃取-大孔树脂吸附工艺可以有效富集各成分部位,提高制剂载药量.     

眼外伤防治知识知晓率调查

目的了解公众对眼外伤防治知识的知晓情况,为笔者所在城市防治眼外伤健康教育促进工作提供依据。方法通过分层抽样法调查2000例对象,调查使用统一设计的眼外伤防治知识调查问卷随机对公众进行面对面询问式调查。结果调查人群对眼外伤防治知识的核心信息总知晓率为72．3％,其知晓率因其文化程度和职业的不同而异,文化程度与知晓率间存在正比关系,医务人员的总体知晓率最高,其次是机关干部、学校师生、矿山企业,化工厂工人最低。结论加强对公众预防眼外伤健康教育,增加公众的眼外伤防治知识,同时眼外伤健康教育应结合特定目标人群进行,根据不同的需求,提供形式多样的健康教育。     

角膜塑形术联合框架眼镜矫正青少年高度近视的疗效

目的：观察并探讨角膜塑形术联合框架眼镜对青少年高度近视的矫正和控制效果。方法：选取青少年高度近视患者36例69眼,年龄9~15岁,等效球镜≧-6.00D,球镜度数≧-5.50D,夜间戴四区五弧设计的OK镜,目标降度( TP )=5.00 D。戴OK镜至少1 mo后,残余度数稳定后予框架眼镜矫正。随访观察2a的裸眼视力、屈光度、眼轴长度以及角膜健康状况。结果：(1)裸眼视力的变化：矫正前的裸眼视力为0.09±0.05,矫正1夜;1wk;1,3mo 后裸眼视力分别为0.27±0.14,0.54±0.18,0.78±0.24,0.81±0.19;矫正1夜;1wk;1mo后裸眼视力逐渐提高(P<0.05),1mo后视力趋于稳定;(2)屈光度的变化：矫正前的屈光度为-6.82±0.71D,联合矫正1a后的屈光度为-6.86±0.77D,差异无统计学意义( P>0.05);联合矫正2a 后的屈光度为-7.11±0.81D,比联合矫正前增加-0.29±0.37D,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)眼轴的变化：矫正前的眼轴为26.18±0.57mm,患者联合矫正6mo 为26.19±0.54mm,1a 为26.21±0.47mm,眼轴长度与矫正前的眼轴长度差异无统计学意义(P>0.05);联合矫正2a后眼轴长度为26.37±0.59mm,比矫正前增长0.19±0.28mm (P<0.05);(4)轻度角膜点染发生率较高：经停戴、清洁镜片及使用保护角膜眼药水均能改善。未发现严重眼部并发症。结论：青少年高度近视眼行角膜塑形联合框架眼镜矫正后1a,近视未进展;联合矫正2a,近视仅有轻度进展。未发现严重眼部并发症。该方法相对安全,长期疗效仍需进一步观察。     

浅谈如何做好中等卫生学校医学专业课教师

医学专业课教师是中等卫生专业学校的重要组成部分,学校需要一支合格的教师队伍而专业课教师的角色在其中起着至关重要的作用,直接影响着学生的素质和专业技能,关系着学校的社会效益和经济效益.为此,笔者总结了自己近二十年的教学经验谈谈如何做好中等卫生专业学校医学专业课教师.     

健康教育在预防口腔疾病中的作用

目的探讨健康教育在预防口腔疾病中的作用。方法从2008年9月开始,对笔者所在学校学习的8个专业（护理、助产、影像、检验、药剂、临床医学、卫生保健、英护）的学生,通过集中授课,发放口腔卫生保健教育手册进行健康教育。通过问卷调查,口腔体检对健康教育前后口腔疾病的情况进行比较。结果进行健康教育后口腔疾病得到很好的控制。结论健康教育可以减少口腔疾病的发生,提高广大在校学生的口腔健康水平。     

一种适用于制药行业中快速评价超滤膜孔径的方法

目的解决制药行业中膜技术应用存在的技术瓶颈,建立快速可行的超滤膜孔径评价方法。方法在前期研究的基础上,筛选出三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1和Rd为指标成分,累积各成分在截留相对分子质量(MWCO)1×103~1×105超滤膜中的分离数据,分析系列截留率(R)与膜MWCO数据之间的相关性。结果三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1和Rd的R与超滤膜MWCO之间可以拟合成分段方程,回归系数均大于0.98,通过多种超滤膜进行检测验证。结论建立了以成分累计R进行初步评判,进而采用方程计算的膜孔径评价方法,该方法对实验条件要求低,成本低,且结果准确,将有效提升膜分离技术在制药行业中的推广应用。