CD47-shRNA慢病毒载体构建及其介导Hep-2细胞CD47基因沉默效应鉴定

目的构建CD47靶向shRNA慢病毒干扰载体,并观察其对Hep-2细胞CD47基因的抑制效应。方法设计CD47靶点特异性的寡核苷酸序列,利用酶切反应合成含特异性系列线性化的pGCSIL-GFP载体,包装293T细胞产生慢病毒并行滴度测定,再转染人喉癌Hep-2细胞,通过实时荧光定量PCR及Western Blotting检测重组慢病毒对CD47靶基因在mRNA和蛋白水平上的沉默抑制情况。结果阳性克隆PCR及测序证实针对CD47基因shRNA慢病毒干扰载体构建成功,RT-PCR及Western Blotting检测载体在mRNA和蛋白水平上可抑制喉癌Hep-2细胞的CD47表达。结论成功构建针对CD47基因的慢病毒干扰载体,为进一步行喉癌CD47基因功能研究提供了较好的实验工具。     

喉癌中钙网蛋白和CD47的表达及其与T淋巴细胞浸润的相关性

目的探讨喉鳞状上皮细胞癌(LSCC)组织中钙网蛋白(CRT)和CD47的表达水平、临床意义及其与T淋巴细胞浸润的相关性。方法应用逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)检测42例LSCC组织及18例癌旁正常鳞状上皮组织中CRT和CD47mRNA的表达情况,用免疫组织化学S-P法对68例原发性LSCC及20例癌旁正常组织中CRT和CD47蛋白的表达、T淋巴细胞浸润情况进行了检测。结果在LSCC组织中,CRT和CD47mRNA和蛋白的表达水平均高于癌旁正常鳞状上皮组织(P<0.05)。CRT及CD47蛋白随着LSCC的肿瘤分期、淋巴结转移及临床分期的增加其表达水平增加(P<0.05),CD47与CRT蛋白的表达有一种较强的正相关性(r=0.89,P<0.05),CRT蛋白的表达还与CD45RO+T淋巴细胞的高浸润相关(P<0.05)。结论 CRT和CD47在LSCC的发生、发展过程中起重要作用,CRT的表达和T淋巴细胞的浸润相关,可能是喉鳞癌的一种新的抗肿瘤免疫机制。     

心脏手术患者的康复与护理探析

目的探究心脏手术康复护理工作对心脏手术患者的影响以及完善措施。方法选取2009年-2012年在人民医院实行心脏手术的患者54例,按照患者的康复程度将54例患者分为基本康复者和康复程度欠佳者,又根据起主要作用的具体康复护理内容将基本康复者分为进行健康教育康复型、心理社会干预康复型和指导运动计划康复型三类。结果基本康复者48例,康复程度欠佳者6例,进行健康教育康复型8例,心理社会干预康复型28例,指导运动计划康复型12例。结论基本康复的患者都进行过康复护理工作,充分的康复护理工作十分有利于心脏手术患者的康复,而这其中又以做好心理社会干预工作的效果最为突出。因此,对心脏手术患者要充分做好康复护理工作,尤其是心理社会干预工作。     

派瑞松乳膏治疗真菌性外耳道炎

我科于2003年2月-2004年12月使用派瑞松乳膏（复方硝酸益康唑乳膏,西安杨森制药有限公司生产）治疗真菌性外耳道炎,取得满意疗效,现报告如下。     

无张力补片修补治疗腹股沟疝的疗效分析

目的:评价不同手术方式治疗无张力补片修补治疗腹股沟疝的临床安全性及有效性。方法:收集2002年5月-2009年5月入住我院的77例行腹股沟疝修补术患者,42例行Lichtenstein术,35例行传统修补术,同时进行临床同期非随机对照研究,比较两种手术方式的术后住院天数、恢复非限制性活动天数、应用镇痛剂人数等临床疗效指标及术后并发症的发生情况。结果:Lichtenstein与传统手术的手术时间差异无统计学意义;两组患者的术后复发率分别为2.4%和22.9%,传统手术的复发率明显高于Lichtenstein组,差异有统计学意义。Lichtenstein组的ARR为5.07%,RRR为0.845,NNT为19.7,即应用Lichtenstein手术,每治疗20个患者可降低1例复发的几率;传统手术组术后并发症发生率显著高于Lichtenstein组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Lichtenstein无张力补片修补术与传统手术相比,术后复发率低、易于掌握,是一种安全、有效的手术方式。     

自体肋软骨植入鼻腔黏骨膜下治疗萎缩性鼻炎16例

萎缩性鼻炎是一种发展缓慢的鼻腔萎缩性炎症 ,其特征为鼻腔黏膜、骨膜和骨质发生萎缩。目前主要有药物治疗和手术治疗 ,病情较重者以手术治疗为主。我科 2 0 0 1年 3月～ 2 0 0 2年 3月用自体肋软骨植入鼻腔黏骨膜下治疗萎缩性鼻炎 1 6例 ,取得良好效果 ,现报告如下1　资料与方法1 .1 　 临床资料1 6例均为原发性萎缩性鼻炎患者 ,男 1例 ,女1 5例 ;年龄 1 8～ 62岁 ,平均 35 .5岁。病程 3～ 1 5年 ,平均 5年。主要临床表现为 :鼻腔干燥、结痂 ,鼻塞 ,鼻出血 ;嗅觉减退或消失 ,呼气有臭味 ,伴头痛。药物治疗无效。用糖精法〔1〕测试鼻黏膜纤…     

OPN、CD44v6在原发性喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨OPN和CD44v6在原发性喉鳞状细胞癌组织中的表达、相互关系及临床意义.方法 应用免疫组化ElivisionTMplus二步法检测44例原发性喉鳞状细胞癌、10例癌旁组织中OPN和CD44v6的表达,并分析两者与原发性喉鳞状细胞癌临床病理特征的关系及相互表达的相关性.结果 喉癌组组织中OPN和CD44v6的阳性表达率分别为75.0%和68.2%,显著高于癌旁组(30.0%和20.0%)[均P＜0.05];其表达与喉癌临床分期,病理分级及淋巴结转移均有关(均P＜0.05);喉癌组织中OPN和CD44v6的表达呈正相关(r=0.584,P＜0.01).结论 OPN和CD44v6的高表达与喉癌的发生、发展有关,OPN可能通过上调CD44v6的表达来促进喉癌的发展.     

腹腔镜下回肠代膀胱术2例护理体会

回肠代膀胱术是膀胱恶性肿瘤根治的唯一有效的方法。我院泌尿外科自2000～2003年采用这种术式每年约10例。以往此种手术均采用开腹术,这样对病人来说,创伤大,影响病人的术后恢复,延长住院时间,加重病人的经济负担。近来,我科利用腹腔镜行回肠代膀胱术2例,得到良好的效果,现将两例病人护理体会总结如下。     

CD47与肿瘤免疫相关性研究进展

肿瘤的发生发展与机体的免疫功能密切相关.肿瘤细胞能够被T、B、NK细胞所清除,这表明一个健康的免疫系统对新生肿瘤生长的调控是至关重要的.在肿瘤免疫中,肿瘤细胞可逃避机体的免疫监视,使肿瘤得以发生与发展.CD47是一种广泛表达于细胞膜表面的免疫球蛋白样蛋白质,近来,研究发现其上调是回避吞噬作用的另一种机制,肿瘤细胞可通过这一机制逃避免疫监视作用[1-5].本文就CD47的结构功能及其表达调控,并对CD47在肿瘤免疫中的作用及在肿瘤免疫治疗中的应用作一综述.     

慢病毒介导的siRNA靶向CD47基因对人喉癌细胞Hep-2增殖、凋亡的影响

目的 探究慢病毒载体介导siRNA抑制CD47基因表达后对人喉癌细胞株Hep-2体外增殖凋亡的影响.方法 构建慢病毒载体,将靶向CD47基因的siRNA慢病毒转染至Hep-2细胞;用荧光显微镜行细胞形态学变化观察;RT-PCR检测细胞CD47 mRNA表达的变化;Western blotting检测CD47蛋白表达的变化情况;MTT法检测细胞的增殖凋亡情况.结果 CD47-siRNA慢病毒转染Hep-2细胞后,形态学观察显示CD47-siRNA能有效抑制Hep-2细胞增殖,细胞变形明显,体积变小,可见细胞坏死及凋亡.RT-PCR和Western blotting检测显示,CD47的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05),使CD47 mRNA表达减少76％～82％,CD47蛋白表达减少77％;慢病毒转染细胞在48h后MTT检测细胞凋亡率明显提高(P＜0.01).结论 慢病毒介导的siRNA干扰CD47基因表达后,明显抑制了喉癌Hep-2细胞CD47的表达并且诱导了Hep-2凋亡.