含SPA菌体对人血B淋巴细胞致有丝分裂效应的初步观察

选用有丝分裂原体外激发B淋巴细胞转化,这对研究B细胞增殖功能提供有价值的资料,是实验免疫学和临床免疫诊断的一个重要工具。随莆对人B细胞丝裂原研究的不断发展,国外不少实验室业已证实富含SPA的金黄包葡萄球菌株(SPA Cowan I)是人B细胞高效的促有丝分裂原,而且不依赖T细胞选择性地作用B细胞,并应用于临     

128株铜绿假单胞菌血清学分型和绿脓菌素分型

用ＩＡＴＳ─２０型分型血清和王世鹏分型法，将本地区临床分离的１２８株绿脓杆菌分出１０种血清型，１７种菌素型，两种方法分型率均为１００％。血清学分型以１１型（３６．７２％）和６型（２１．８８％）多见，菌素分型以１２２３２１型（３３．５９％）为主。其次为１１２１２１型（１１．７２％），８８８８８８型（１１．７２％）。不同的病区有自己独特的感染株，在流行病学和院内感染调查上有一定意义。     

抗肿瘤效应细胞制备工艺流程设计的特点和原则

报道本所抗肿瘤效应细胞制备工艺主流程和四个支流程共７６道工序流程设计要求和原则．     

急性早幼粒细胞白血病免疫表型分析

用系列单克隆抗体和流式细胞仪检测35例APL的免疫表型。表达的抗原及其阳性率依次为：CD33＞CD13＞CD2＞CD15，髓系CD11b、CD14、CD24b、CD61均为阴性表达；淋系抗原仅表达CD2，阳性率为22．8％，且CD2的APL患者DIG发生率明显低下（P＜0.05）；未发现CD13＋者有特别临床意义；CD34＋有一定表达，阳性率11．43％，在AML中表达最低，CD34＋的APL提示预后不良。     

1型糖尿病患者T细胞亚群和共刺激分子的表达及其意义

目的：动态观察1型糖尿病患外周血T淋巴细胞亚群及CD28、CD80等共刺激分子的表达，探讨其在1型糖尿病发病中的作用。方法：应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪，检测17例正常对照组及37例1型糖尿病患外周血T细胞亚群、CD28、CD80、人类白细胞抗原（HLA－DR）分子的表达，并进行随访。结果：（1）1型糖尿病组外周血CD4^ 、CD4^ CD28^ T细胞的百分率增加，CD8^ 、CD8^ CD28^ T细胞显降低，CD28、CD80、HLA－DR的表达也增加，与正常组比，差异均有显性。（2）经胰岛素治疗6个月后随访，T细胞亚群的失衡、共刺激分子的异常表达得到不同程度的改善，但CD4^ CD28^ 、CD8^ CD28^ T细胞、HLA－DR表达仍未恢复正常。结论：共刺激分子CD28、CD80及HLA－DR的异常表达、T细胞亚群的异常激活、增殖在1型糖尿病的发生、发展中起着重要的作用，监测其变化，为临床上免疫调节治疗，提供了理论依据。     

CD40分子在肺癌中的表达及其临床意义

目的　探讨CD4 0分子在肺癌中的表达及临床应用价值。方法　外科手术切除标本5 1例 ,采用免疫组织化学法检测肺恶性肿瘤组织中CD4 0分子的表达 ,并分析CD4 0表达水平高低与临床分期和病理分级的相关性。同时采用直接免疫荧光标记和流式细胞仪测定 10例新鲜肺癌和 4株肺癌细胞株膜表面CD4 0分子的表达率。结果　 (1)免疫组化结果显示CD4 0在肺癌组织中的阳性表达率为 76 5 % ,强阳性表达率 5 4 9% ,明显高于正常肺组织 (P <0 0 1)。 (2 )直接免疫荧光标记和流式细胞仪测定CD4 0分子在新鲜肺癌细胞和肺癌细胞株中的表达率分别为 1 6 %～ 71 0 %和2 1%～ 88 2 %。 (3)CD4 0阳性表达与肿瘤临床分期和淋巴结转移显著相关 (P <0 0 5 ) ,但与肺癌的病理组织学分级及病理类型等无明显相关 (P >0 0 5 )。结论　CD4 0在肺癌发病过程中可能起重要的作用 ,其阳性表达可作为肺癌预后判断及淋巴结转移监测的有价值指标之一     

阴离子交换层析法纯化gp130单克隆抗体B-S12

目的：建立一种从小鼠腹水中获得高纯度、活性好、纯化过程易于放大的抗gp130单克隆抗体B-S12的纯化方法。方法：经硫酸铵沉淀等预处理后的腹水样品，在阴离子交换层析柱上进行分离纯化，用MTT法检测纯化后抗体的生物学活性。结果：腹水样品经硫酸铵沉淀、PBS复溶，用pH 7．0、20mmol／L Tris—HCl缓冲溶液稀释10倍后上强阴离子交换层析柱，NaCl梯度洗脱，可获得纯度大于95％的B-S12抗体，回收率达73％，在体外对XG-2细胞有明显的促增殖作用。结论：建立了快速高效从小鼠腹水中纯化B-S12的方法，为该抗体的进一步应用提供了必要的实验基础。     

小鼠树突状细胞表面PD-L1分子对T淋巴细胞协同刺激效应的研究

目的：琛讨小鼠髓系DCs表面PD-L1分子在树突状细胞介导T细胞免疫应答中的作用。方法：采用流式细胞术分别检测未成熟DCs和凋亡肿瘤细胞负载并经CD40配基化的成熟DCs表面免疫分子的表达；混合淋巴细胞反应(MLR)和抗PD-L1单抗阻断试验分析未成熟DCs和成熟DCs表达的PD-L1分子对T淋巴细胞的协同刺激／抑制效应；^3H-TdR掺入试验检测未成熟DCs和成熟DCs对T淋巴细胞的促增殖效应；ELISA测定各组MLR反应上清中IL-10、IFN-γ的分泌水平；MTT比色法检测成熟DCs激发的肿瘤抗原特异性CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果：未成熟DCs表面高表达PD-L1，负性调节未成熟DCs对自体T淋巴细胞的促增殖作用，抑制T细胞分泌IL-10、IFN-γ；凋亡肿瘤细胞负载并经CD40配基化的成熟DCs中等水平表达PD-L1，具有显著增强对自体T细胞的体外激发、扩增和细胞毒效应的作用，并可增加T细胞的IFN-γ分泌。结论：未成熟DCs高表达PD-L1抑制了对T细胞共刺激效应；CD40配基化成熟的DCs中度表达。PD-L1有助于激发T细胞介导免疫应答。     

一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究

目的：鼠抗人4—1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定。方法：以高表达人4—1BBL分子的基因转染细胞L929／4—1BBL为免疫原，常规免疫BALB／c小鼠，采用B淋巴瘤杂交瘤技术进行细胞融合，经流式细胞术分析和多次克隆化培养，筛选特异性杂交瘤细胞株；采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法对单抗的生物学特性进行鉴定，并采用体外细胞计数和ELISA检测分析单抗对单核细胞的作用。结果：获得1株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BBL单抗的杂交瘤细胞株，命名为3E7。该单抗能识别人白血病细胞株和单核细胞表面的4-1BBL分子。对单抗生物学功能的研究结果表明，该单抗能有效地促进外周血单核细胞体外生长，并促进IL-6和TNF-α的分泌。结论：成功地获得了一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体3E7，该单抗能特异地识别人4-1BBL分子，并有效地通过激发4-1BBL逆向信号通路促进单核细胞的体外生长及细胞因子的分泌。     

鼠抗人CD28功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

以天然表达CD28分子的人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞:XG-1为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,CD28转基因细胞株(T-28)及XG-1为抗体筛选阳性细胞株,经免疫荧光标记分析反复筛选和多次的克隆化培养,最终获得1株持续、稳定分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为10F3。对这株单抗生物学功能的研究结果表明,这株抗体能特异性地识别人CD28分子和介导有效的共刺激信号,激发T细胞的活化和增殖。