Endostatin基因真核表达载体的构建及活性鉴定

目的：构建endostatin基因的真核表达载体,并将其转染C6脑胶质瘤 细胞,探讨其体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法：利用PCR将大鼠血清蛋白分泌信号连接在endostatin基因的碳末端,构建成真核表达载体pcDNA3-Sendostatin,利用Lipofectamine法将其转染C6脑胶质瘤细胞,采用细胞增殖实验进行endostatin表达蛋白体外活性鉴定。结果：成功构建了endostatin基因真核表达载体,转染该载体的C6脑胶质瘤细胞可分泌表达抑制血管内皮细胞增生的endostatin蛋白。结论：endostatin是一种有效的血管生成抑制剂,可进一步用于在体肿瘤的抗血管生成治疗。     

四川汶川地震92例后送颅脑伤患者伤情分析

目的:调查分析四川汶川地震后送颅脑损伤患者的伤情特点。方法:对地震发生后近20 d内后送至成都军区总医院神经外科住院治疗的92名地震伤员的伤情、致伤原因、后送至医院时间、脱险后得到医疗救治情况以及治疗结果进行分析总结。结果:后送伤员中,轻型和中型颅脑损伤78例(84.78%),重型颅脑损伤14例(15.22%);合并伤中,合并骨折49例(53.26%),合并挤压综合征21例(22.83%)。截至6月12日,已出院78例(84.78%),按GOS标准评定,良好72例(78.26%),中残5例(5.43%),重残1例(1.09%);仍有11例在院治疗,死亡3例。结论:此次汶川地震后送颅脑伤员存在伤程长、院前基础医疗救治差、重型颅脑伤比例低、合并挤压综合征和四肢骨折多等典型强地震灾害伤情特点。     

兰州地区丙型肝炎病毒基因变异与干扰素α应答关系的探讨

目的探讨兰州地区丙型肝炎病毒（HCV）1b基因型5＇非编码区（5＇NCR）基因变异株的感染状态,及其与干扰素α疗效的关系。方法应用限制性内切酶酶切分析检测40例HCV 1b型中5＇-NCR基因变异及9例干扰素α治疗患者中的5＇-NCR基因变异。结果在40例HCV 1b型中存在5种感染状态：（1）有MboⅠ切点24/40（60.0%）;（2）无MboⅠ切点变异株5/40（12.5%）;（3）有MboⅠ和无MboⅠ切点混合感染株7/40（17.5%）;（4）有BamHⅠ切点变异株2/40（5%）;（5）有MboⅠ双切点变异株2/40（5%）。对9例干扰素α治疗的丙型肝炎患者血清进行5＇-NCR变异株检测。5例干扰素α应答病例中,2例为2a型,3例为无MboⅠ切点的1b型。4例抗干扰素α病例中,1例为2a型,但在某节段存在着1b与2a混合状态,另3例为无MboⅠ。结论在丙型肝炎患者血清中存在单一的MboⅠ切点的样品,24/40（60.0%）可能是HCV野生株感染的状态。     

C6细胞表达的人Angiostatin Kringle（1—3）体外抑制血管内皮细 …

为研究人Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ Ｋｒｉｎｇｌｅ（１－３）〖ＡＫ（１－３）〗抑制血管内皮细胞生长的活性,利用脂质体法将带有大鼠血清白蛋白分泌信号的人ＡＫ（１－３）基因导入大鼠Ｃ６胶质瘤细胞,并用Ｇ４１８筛选获得目的细胞株。采用电镜、流式细胞术、免疫组化和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ等方法,检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及ＡＫ（１－３）蛋白达情况,并用人脐静脉内皮细胞增殖实验检测目的细胞株表达的ＡＫ（     

AngiostatinK(1-3)裸DNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

探讨ＡｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ（１－３）〖ＡＫ（１－３）〗裸ＤＮＡ治疗人脑胶质可行性和作用机制。用脂质体包埋法将ＡＫ（１－３）基因的真表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１－３）注入裸以下ＳＨＧ４４人脑胶质瘤的特点。ＡＫ（１－３）裸ＤＮＡ在荷瘤裸本内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤血管生成能力显著下降,肿瘤生长受到抑制,抑瘤率达４３％。本研究证明,ＡＫ（１－３）裸ＤＮＡ能抑制人脑质瘤生长,为非病毒载体介导的抗血管生     

LEO自膨式支架结合水解脱弹簧圈栓塞治疗颅内宽颈动脉瘤

目的探讨和总结应用LEO自膨式支架结合水解脱弹簧圈栓塞治疗颅内宽颈动脉瘤的技术及疗效。方法12例颅内宽颈动脉瘤均采用先放置LEO支架覆盖动脉瘤颈再将微导管经支架网孔放入动脉瘤腔填塞水解脱弹簧圈瘤腔进行栓塞,术后6-12个月进行临床和影像学随访。结果12例全部技术成功,载瘤动脉通畅;10例宽颈动脉瘸完全闭塞,1例闭塞〉95％,1例闭塞〈95％;1例后交通动脉瘤栓塞后出现一过性神经功能障碍。经治疗后恢复正常,其余11例恢复顺利：12例临床随访6-12个月无动脉瘤再出血或脑血栓形成,其中DSA随访5例无支架狭窄及动脉瘤复发。结论联合使用LEO自膨式支架和水解脱弹簧圈栓塞治疗颅内宽颈动脉瘤是一种完全有效的．方法,但其长期疗效仍需进一步观察;颅内专用的LEO自膨式支架为宽颈动脉瘤的介入治疗提供了方便,可防止弹簧圈突入载瘤动脉,保持栽瘤动脉通畅。     

PBL教学法在神经外科专培学员培养中的应用

目的 探索以问题为导向的学习（PBL）教学法在神经外科专培学员教学中的应用,总结成功组织该类型PBL教学的关键因素。方法 在20名专培学员中,通过调查问卷方式,开展PBL教学法,进而评估该法的教学效果。结果 调查发现,专培制度能够得到国家和培训机构的认可,能够在手术能力和专业知识方面得到提高,以及能从手术讲解、病例讨论及教授点评中有所收获成为专培教学中成功组织PBL的关键因素。专培学员通过PBL教学法提高了手术技能和临床工作能力,树立了正确的循证医学理念,并且加强了医德、医风和对患者更深的同情心。结论 神经外科专培学员PBL教学法的推广将对提高我国神经外科专培医师教育水平和促进完善相关专培制度的完善奠定坚实基础。     

选择性脾动脉栓塞术后并发脾脓肿经皮穿刺置管引流时间及影响因素的初探

脾脓肿是一种脾脏感染性疾病,临床上并不多见,在其诊断和治疗上有一定的特殊性,尤其是选择性脾动脉栓塞术（partial splenic embolization．PSE）后并发脾脓肿,笔者回顾分析了自2003年甘肃省第二人民医院感染科开展PSE术后并发脾脓肿的32例患者,探讨PSE术后并发脾脓肿后置管引流的最佳时间及影响因素。     

大黄素对大鼠颅脑爆震伤的影响及保护作用

目的 观察大鼠颅脑爆震伤后脑组织含水量、一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(iNOS)活性变化及大黄素对伤后脑组织含水量、NO含量和iNOS活性的影响. 方法 制作大鼠颅脑爆震伤模型,并应用大黄素进行干预,通过干湿法检测脑组织含水量,通过硝酸还原酶及比色法检测伤后不同时相脑组织NO含量和iNOS活性. 结果 伤后动物脑组织NO含量和iNOS活性均显著升高(P<0.01);模型组脑组织NO含量和iNOS活性均显著升高,2 h已达高峰,大黄素组各时相点NO含量和iNOS活性均明显低于模型组(P<0.01). 结论 大黄素可降低颅脑爆震伤大鼠脑组织含水量并抑制iNOS活性,可能对大鼠颅脑爆震伤后的病理过程有干预保护作用.     

Angiostatin K (1-3)基因的原核表达和蛋白活性测定

目的 获得angiostatin K(1-3)基因的原核表达蛋白,检测其活性。方法 构建和鉴定pBV220-AK（1-3)载体并在大肠杆菌DH5α内表达,诱导后用SDS-PAGE分析、经亲和层析纯化后行Western Blot鉴定,以牛微血管内皮细胞抑制实验和鸡胚绒毛膜尿囊膜实验验证其生物学活性。结果 获得抑制牛微血管内皮细胞生长活性的angiostatinK(1-3)原核表达蛋白,其蛋白重量占菌体总蛋白的7%。结论 该项研究为抗血管生成药物治疗实体瘤奠定了基础。