乳腺癌的生物治疗

手术切除、辅助化疗和放疗被认为是目前乳腺癌的主要治疗方法.随着现代生物工程技术的发展,以分子靶向治疗、基因治疗、免疫治疗等为主要代表的先进生物治疗技术已部分进入乳腺癌的临床研究阶段,显示出较好的耐受性和良好疗效.     

单纯疱疹病毒体外诱导特异性抗体应答的实验研究

用灭活的单纯疱疹病毒（Ｈｅｒｐｅｓｓｉｍｐｌｅｘｖｉｒｕｓ，ＨＳＶ１）为致敏原，体外诱导成人外周血淋巴细胞产生特异性抗体应答，特异性抗体诱生水平与血清抗体无相关性（Ｒ＝０．４５，Ｐ＞０．０５），抗体类型为ＩｇＧ。同法致敬新生儿淋巴细胞则不能诱生任何类型的特异抗体，表明此体外抗体应答属继发性免疫应答。特异性抗体应答有明显的ＨＳＶ１抗原剂量依赖性，且需要Ｔ、Ｂ细胞的相互作用。ＨＳＶ１体外致敏的实验研究，为探讨正常和疾病状态下体外特异性抗体应答和免疫调节提供一个有用的实验模型。     

HSV-1感染单核巨噬细胞及其影响因素的研究

用HSV-1接种人单核细胞传代系U937细胞和小鼠腹腔巨噬细胞,并在接种前后以细菌脂多糖(LPS)或/和卡介苗(BCG)处理细胞,通过病毒滴定、间接荧光抗体试验检测病毒抗原及PCR技术检测病毒基因,初步研究了HSV-1感染单核巨噬细胞的特点及其影响因素。结果如下。 U937细胞接种HSV-1的剂量为1.0 TCID_(50)/细胞,在2周内降至测不出水平。病毒抗原阳性细胞于感染后第4天达高峰,为47.6％,随即迅速下降,2周内降至10％以下,3周后几乎全部消失。病毒DNA在感染2周后即不能从细胞中检出。感染过程中始终未见典型的CPE,但MTT比色分析法显示感染后1～2周细胞增殖受到明显抑制。2周后细胞增殖开始恢复。将细胞     

热毒宁注射液对人鼻病毒(N_(36))的体外抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对人鼻病毒(HRV,N36)的抑制作用。方法:以利巴韦林为阳性对照药,采用细胞培养技术及MTT比色法,观察在热毒宁干预下,人胚胎上皮细胞的病变效应(CPE)及吸收度值(A),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式下热毒宁对HRV的抑制作用效果。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC50为5.873g/L。预防、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测定的半数有效浓度EC50分别为0.576、0.836及0.640g/L,治疗指数(TI)分别为10.20、7.03及9.18;MTT法测定的EC50分别为0.551、2.310及1.230g/L,TI分别为10.66、2.54及4.78。结论:热毒宁对HRV(N36)有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。热毒宁对HRV(N36)的抑制作用,以预防给药更明显。     

肝癌生物治疗研究新进展

生物治疗作为肿瘤治疗的新概念正倍受关注,靶向治疗、基因治疗、免疫治疗均属生物治疗中较活跃的研究领域。现综述生物治疗在肝癌治疗中最新研究与应用进展。     

EB病毒潜伏膜蛋白2A胞外区重组基因在大肠杆菌中的表达及其在血清学检测中的应用

目的:构建EB病毒潜伏膜蛋白2A(LMP2A)胞外区重组基因的表达载体在大肠杆菌中表达,并将表达的蛋白用于EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者的血清学检测.方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP2A胞外区重组基因的质粒pEC2A双酶切后,克隆到pET32a中.重组质粒经PCR、酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌(E.coli)BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化,并用Western blot法检测其抗原活性.用纯化的蛋白进行鼻咽癌患者血清学检测.结果:重组表达质粒经PCR及酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确.SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为40 ku.以此为抗原能在鼻咽癌患者血清中检测到特异性的抗体.结论:成功获得了LMP2A胞外区重组基因表达的蛋白,纯化的蛋白可用于EBV相关鼻咽癌患者的血清学检测.     

含胞嘧啶脱氨酶基因的靶向腺病毒载体的构建及应用

目的　建立癌胚抗原 (CEA )启动子驱动的含胞嘧啶脱氨酶基因 (CD )自杀基因的腺病毒载体AdCEACD ,使CD基因只能在CEA阳性的细胞中表达。方法　采用同源重组法在人胚肾细胞株 2 93细胞中重组腺病毒 ,用点杂交、PCR法进行鉴定 ,并进行纯化和滴度测定 ,分别感染CEA阳性和CEA阴性的细胞 ,采用MTT法检测感染细胞对 5 Fc的敏感性。结果　重组腺病毒中含有CEA基因及CD基因 ,纯化后滴度可以达到 5 .0× 10 11pfu/ml ,CEA阴性的Hela细胞感染AdCMVCD后对 5 Fc很敏感 ,而感染AdCEACD后不能被 5 Fc杀伤 ,与之相反 ,CEA阳性的Lovo细胞感染AdCMVCD和AdCEACD后有相似的表达活性 ,均对5 Fc敏感。AdCEACD/ 5 Fc系统有明显的“旁观者”效应。结论　本实验建立的CEA启动子驱动的含CD自杀基因的腺病毒载体AdCEACD ,能使CD基因专一性地在CEA阳性细胞中表达 ,有助于对CEA阳性的肿瘤细胞靶向性自杀基因治疗。     

热毒宁注射液对腺病毒-3的体外抑制作用

目的:研究中草药热毒宁注射液对腺病毒-3(ADV_3)的抑制作用。方法:以阿昔洛韦为阳性对照药,采用细胞培养技术及MTT比色法,观察在热毒宁干预下,转染腺病毒E1A基因人胚肾上皮细胞(293细胞)的细胞病变效应(CPE)及光密度值(D),计算各组细胞的病毒抑制率。比较不同药物剂量及不同给药方式下热毒宁对ADV_3的抑制作用效果。结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC_(50)为15.58 g·L~(-1)。预防、直接灭活及治疗给药方式下,CPE法测定的半数有效浓度EC_(50)分别为1.452、1.321、1.193 g·L~(-1),治疗指数TI分别为10.73、11.79、13.06;MTT法测定的EC_(50)分别为2.356、1.494、1.144g·L~(-1),TI分别为6.61、10.43和13.62。结论:热毒宁对ADV_3有直接灭活及抑制增殖作用,对其感染靶细胞有阻断作用,且呈明显量效关系。热毒宁对ADV_3的抑制作用,以预防给药更明显。     

一次婴儿毛细支气管肺炎爆发流行中病毒学和血清学观察

1985年12月至1986年2月江苏省泗洪县爆发流行小儿毛细支气管肺炎。12月份收住的例数占住院总例数的32%。发病最小年龄为28天,最大年龄为1岁半。6个月之内的占71.5%。从8份急性患儿的鼻咽洗液中分离出6株病毒,经鉴定为呼吸道合胞病毒。8例采得急性期和恢复期双份血清,恢复期中和抗体效价较急性期升高8~64倍。     

南京地区鲍氏不动杆菌AmpC酶、β-内酰胺酶基因研究

目的了解南京地区多药耐药鲍氏不动杆菌（ABA）临床分离株AmpC酶和β-内酰胺酶基因存在状况。方法自2007年7-10月南京地区住院患者标本中分离出20株多药耐药鲍氏不动杆菌,微量肉汤稀释法测定11种抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应（PCR）法测定多药耐药鲍氏不动杆菌2种AmpC酶及18种β-内酰胺酶基因。结果20株ABA AmpC染色体型基因阳性14株（70.0%）、AmpC质粒型基因阳性1株（5.0%）;TEM基因阳性12株（60.0%）、SHV基因阳性1株（5.0%）、CTX-M-1群基因阳性2株（10.0%）、OXA-23群基因阳性1株（5.0%）、OXA-24群基因阳性1株（5.0%）,经测序BLASTn比对为OXA-72型;16、17号株测得AmpC（染色体型）DNA序列翻译成氨基酸序列与美国核酸库已登录的AmpC（染色体型）序列比较分别有两个和1个氨基酸差别,均为新亚型。结论南京地区ABA除可携带TEM、VEB、GESI、MP、VIM、OXA-10、OXA-23基因外,还可携带AmpC染色体型及AmpC质粒型、SHV、CTX-M-1群、OXA-24群基因。同时进行AmpC活性与AmpC染色体型、质粒型基因配对检测为国内首次。