肿瘤患者中高表达人白细胞分化抗原25的调节T细胞检测及其临床意义

目的探讨肿瘤患者外周血高表达人白细胞分化抗原(CD)25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)比率变化特点及其临床意义。方法用流式细胞术检测62例肿瘤患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并分层分析。结果62例肿瘤患者外周血中CD25highTr细胞占CD4+T细胞的百分比率(4·2%±1·9%)明显高于15名健康体检者(2·0%±1·0%,P<0·001);CD4+CD25highTr细胞且具有调节性T细胞的表面标记特征,即CD45-RA(-),CD69(-)。随疾病进展外周血D25highT细胞占CD4+T细胞百分比率逐渐升高,15例恶性肿瘤Ⅰ+Ⅱ期患者外周血D25highT细胞占CD4+T细胞的百分比率(2·4%±0·6%)与健康体检者比,差异无统计学意义(P>0·05)。21例Ⅲ期(3·5%±1·5%)、26例Ⅳ期(4·9%±1·7%)患者外周血D25highT细胞占CD4+T细胞的百分比率显著升高,与健康体检者比,差异有统计学意义(P<0·001)。Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ期比较,Ⅲ期与Ⅳ期比较,差异均有统计学意义(P<0·05,P<0·01)。提示外周血CD4+CD25highTr细胞比率高者预后较差。结论肿瘤患者外周血CD4+CD25highTr细胞水平明显升高,与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生发展密切相关。监测外周血CD4+CD25highTr细胞比率可评价肿瘤患者预后。     

急性髓细胞性白血病细胞培养上清对CD4+和CD8+T细胞增殖和凋亡的影响

为了研究不同的急性髓细胞性白血病（AML）细胞株培养上清对CD4^＋和CD8^＋T细胞增殖以及凋亡的影响,探讨AML的免疫抑制的形成机制,将3种AML细胞株（HL-60、NB4和U937）培养上清和普通培养液按不同比例混合,用于培养CFSE染色的淋巴细胞.抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激3天后,标记7AAD和相应荧光抗体.利用流式细胞术检测不同T细胞亚群CFSE荧光强度和7AAD表达率的变化,分析其增殖和凋亡变化情况.结果表明：3种AML细胞株中有2种（HL-60和NB4）培养上清可显著抑制CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的增殖,并随浓度增加而增强.同样,HL-60和NB4细胞株培养上清亦可抑制刺激后的CD4^＋T细胞的凋亡,但对刺激后的CD8^＋T细胞的凋亡并无明显影响.相反,HL-60和NB4细胞株培养上清可显著增加增殖的CD8^＋T细胞的凋亡.结论：AML细胞株培养上清液对CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞增殖的抑制以及对增殖的CD8^＋T细胞凋亡的诱导作用,可能是AML患者免疫功能缺陷的机制之一.     

病毒感染相关性血小板减少及其发生机制

血小板减少性紫癜是临床上最常见疾病之一,近年来的研究发现其中部分病例的发病与病毒感染密切相关,但其机制尚不十分清楚。本文拟就这方面的研究进展作一简要介绍。     

病毒感染相关性血小板减少及其发生机制

血小板减少性紫癜是临床上最常见疾病之一,近年来的研究发现其中部分病例的发病与病毒感染密切相关,但其机制尚不十分清楚。本文拟就这方面的研究进展作一简要介绍。     

鼻咽癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞分析

目的:探讨鼻咽癌患者外周血CD4 CD25h igh调节性T(Tr)细胞比例变化的特点及其临床意义。方法:采用流式细胞术检测54例初治鼻咽癌患者(鼻咽癌组)和15例健康者(对照组)外周血中CD3 、CD4 、CD8 及CD4 CD25h ighT细胞比例。结果:鼻咽癌患者CD4 T细胞比例、CD4 /CD8 比值均低于对照组(均P<0.05),但CD4 CD25h ighTr细胞比例明显高于对照组(P<0.01)。随疾病进展鼻咽癌患者外周血CD4 CD25h ighTr细胞比例升高[Ⅰ Ⅱ期为(2.28±1.07)%,Ⅲ期为(3.65±1.21)%,Ⅳ期为(4.72±0.87)%],Ⅰ Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较,均P<0.01;Ⅲ期与Ⅳ期比较,P<0.01。结论:CD4 CD25h ighTr细胞可能是鼻咽癌患者免疫抑制的重要原因之一,与鼻咽癌免疫逃逸有关。外周血CD4 CD25h ighTr细胞比例可能成为鼻咽癌一种新的预后判断指标,去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法。     

人巨细胞病毒体外感染巨核系细胞的实验研究

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)对人巨核系细胞的抑制作用及其机制。方法采用体外悬浮培养巨核系细胞技术,观察HCMV AD169株对巨核系祖细胞生长的影响;用聚合酶链反应(PCR)检测HCMV感染巨核系细胞中HCMV即刻早期蛋白(IE)DNA的表达;用流式细胞术检测HCMV感染巨核系细胞上HCMVpp65抗原的表达。结果HCMV AD169株在体外能明显抑制巨核系细胞的增殖。悬浮培养第12天,与对照组相比,HCMV感染组的巨核细胞数减少了82.19%(P<0.05)。HCMV感染巨核系细胞有IE蛋白DNA和pp65抗原的表达,其感染率为(24.5±3.1)%。结论HCMV AD169株在体外能抑制巨核系细胞的增殖,提示HCMV感染引起的血小板减少与其抑制巨核系细胞增殖有关。     

结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞分析

目的探讨结直肠癌患者外周血高表达CD25的CD4+调节T细胞(CD4+CD25highTr)的比率变化特点及其临床意义.方法采用流式细胞术检测37例结直肠癌患者外周血CD4+CD25high调节T细胞水平,并进行分层分析.结果结直肠癌患者外周血高表达CD25 T细胞水平占总CD4+T细胞的(4.59±1.62)%(n=37),与健康对照组比较(2.04±1.03)%(n=15),差异有统计学意义(t=2.007 582;P=0.000 001 2).该CD4+CD25highTr细胞低表达CD45RA,不表达CD69.Ⅰ～Ⅲ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr占总T细胞的(3.93±1.48)%(n=17),Ⅳ期结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞占总T细胞的(5.18±1.54)%(n=20),明显高于Ⅰ～Ⅲ期患者,差异有统计学意义(t=2.080 91;P=0.015).结论结直肠癌患者外周血CD4+CD25highTr细胞比率明显升高,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用.     

SARI基因过表达对K562细胞系生物学影响的研究

目的:通过构建SARI慢病毒表达载体,探讨SARI基因过表达对K562细胞生物学功能的影响。方法:采用RT-PCR方法获得目的基因并重组p LOV.CMV.GFP质粒,构建pLOV.CMV.GFP-SARI表达载体。通过测序鉴定、病毒包装和滴度测定后,获得阳性病毒颗粒,并以病毒颗粒感染K562细胞系。采用Q-PCR及Western blot方法验证感染后K562细胞SARI基因转录和蛋白水平的表达情况,同时采用CCK-8法检测K562细胞的增殖情况,以流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期变化。结果:利用RT-PCR方法获得SARI基因并成功构建了含SARI基因的慢病毒表达载体,从分子及蛋白水平验证了其在感染后K562细胞中的高表达;与空白组和感染空载体的Mock组相比,过表达SARI载体组的细胞增殖显著受抑、细胞凋亡率增加,而细胞周期无显著变化。结论:SARI基因过表达可抑制K562细胞的增殖并促进其凋亡,提示诱导SARI基因过表达可能对于抑制CML发生发展具有重要的作用。     

恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨恶性肿瘤外周血CD4+CD25+调节T细胞水平的特点及其临床意义.方法采用流式细胞术检测53例恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平及淋巴细胞亚群,并进行分层分析.结果外周血淋巴细胞亚群分析显示恶性肿瘤患者CD4、CD16阳性细胞比例在早期(Ⅰ+Ⅱ期)患者即低于对照组,但差异无显著性意义(P＞0.05),CD4/CD8亦低于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05);随着疾病进展(Ⅲ、Ⅳ期)CD4、CD4/CD8、CD16阳性细胞比例减低明显,差异有显著性意义(P＜0.05);各期CD8、CD19、CD3与对照组接近(P＞0.05).外周血CD4+CD25+调节T细胞比例健康对照组CD4+CD25+T细胞水平为(14.49±4.69)%,恶性肿瘤53例CD4+CD25+T细胞比例为(19.61±8.17)%,统计学有差异(P＜0.05);进一步分层分析显示随疾病进展外周血CD4+CD25+T细胞水平升高,在肿瘤进展期(Ⅳ期)尤其明显,统计学有极显著差异(P＜0.01).结论恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节T细胞水平的升高,与恶性肿瘤免疫功能低下及肿瘤的发生发展密切相关.去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供一种新的方法.     

外科住院患者合并凝血功能障碍83例临床分析

外科患者常合并凝血功能障碍,表现为异常出血、血栓形成和弥散性血管内凝血,严重时可导致手术失败,患者伤残甚至死亡.本文将对1994年～1999年收入我院外科83例合并凝血功能障碍的患者进行回顾性分析.