鼻咽癌survivin基因和血管内皮生长因子表达的临床意义

目的研究鼻咽癌survivin基因表达和血管内皮生长因子（VEGF）的表达及其临床意义。方法运用逆转录聚合酶链反应技术（RT—PCR）检测鼻咽癌组织中survivin、VEGF mRNA的表达情况。结果35例鼻咽癌组织中23例survivin表达阳性（65．7％），22例VEGF表达阳性（62．9％）；14例鼻咽黏膜慢性炎症组织中2例survivin表达阳性（14．3％），3例VEGF表达阳性（21．4％）。癌组织与炎症组织相比，survivin、VEGF两者均有表达，但具有显著性差别（P〈0．05）。鼻咽癌组织中survivin的表达与肿瘤的细胞分化及TNM分期有关，高分化者的表达率明显低于中低分化者（P〈0．05），Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率（47．4％）较Ⅲ～Ⅳ期（87．5％）低（P〈0．05）。鼻咽癌组织中VEGF的表达与颈淋巴结转移及TNM分期有关，有颈淋巴结转移者其阳性表达率较高，Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率（42．1％）较Ⅲ～Ⅳ期（87．5％）低（P〈0．01）。鼻咽癌组织中survivin、VEGF的表达呈正相关性。结论鼻咽癌组织中存在survivin、VEGF的过表达现象。survivin、VEGF基因的异常表达与鼻咽癌的发生发展存在一定的关系。survivin的异常表达可能在鼻咽癌的血管生成中发挥一定的作用。     

Skp2 的研究进展

  细胞内泛素-蛋白酶体途径通过对泛素化蛋白进行降解，在细胞周期发展、基因转录及信号转导等过程中发挥重要作用。此途径主要包括两步，即蛋白的泛素化，由泛素激活酶(E1)，泛素结合酶(E2)及泛素连接酶(E3)等共同完成；经泛素化的蛋白随后被26S蛋白酶体复合物降解。E3家族成员SCFSkp2泛素连接酶由Skp2与Skp1，Cul1／cdc53及Rbxl结合形成。Skp2属F-盒蛋白家族成员,在泛素化过程中负责对底物蛋白的识别而决定SCF^Skp2复合物作用的特异性。Skp2 通过对多种靶蛋白的泛素化降解而与细胞周期调控及肿瘤的发生、发展和预后密切相关。     

胰岛素样生长因子-1受体在肿瘤细胞的内化和泛素化分析

我们采用免疫印迹法(Western blot)、免疫沉淀技术(IP)和流式细胞仪(FACS)技术对鼠胚胎成纤维瘤三种细胞株胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的内化进行检测,探讨IGF-1R的内化在受体下行调节和β-arrestin在IGF-1R蛋白内化/泛素化降解中的作用.     

内耳的非线性特点和助听器验配（二）

上期听力学小词典从内耳非线性特点入手．详细介绍了助听器压缩技术的基本原理。压缩线路最重要的作用是通过处理输入信号．在模仿耳蜗工作原理的基础上．为听障患者提供一个能包容尽可能多的语音信息的动态范围,保证聆听的舒适度,从而帮助患者在复杂的环境里,改善听觉理解能力。     

胰岛素样生长因子-1受体在肿瘤细胞的内化和泛素化分析

我们采用免疫印迹法(Western blot)、免疫沉淀技术(IP)和流式细胞仪(FACS)技术对鼠胚胎成纤维瘤三种细胞株胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的内化进行检测,探讨IGF-1R的内化在受体下行调节和β-arrestin在IGF-1R蛋白内化/泛素化降解中的作用.     

听尼特TM耳鸣综合诊断治疗仪的临床应用

目的 探讨应用听尼特TM耳鸣综合诊断治疗仪对主观性耳鸣患者进行全面问诊和康复治疗效果评估的意义。方法 用听尼特耳鸣综合诊断治疗仪,对30例耳鸣患者进行全面问诊评估、诊断测试,在测试评估的基础上,制定并实施个体化耳鸣治疗方案,进行耳鸣康复治疗。结果 30例患者在耳鸣残疾度量化测试和耳鸣烦躁级别评估中,残疾度级别1级（轻微的）～5级（灾难性的）治疗前后的病例数分别为6、7、6、7、4和12、13、4、1、0例,将耳鸣残疾度量化2级及以下的患者定为轻度,3级及以上患者定为重度,康复治疗前后轻度的患者分别为13例（43%）和25例（83%）,重度患者治疗前后分别为17例（57%）和5例（17%）,差异有统计学意义（χ^2=10.33,P〈0.05）。烦躁级0（无烦躁）～6级（最烦躁）治疗前后病例数分别为2、6、4、6、5、4、3和5、9、6、6、3、1、0例。将耳鸣烦躁级量化表2级及以下的患者定为轻度,3级及以上患者定为重度,康复治疗前后轻度患者分别为8例（27%）和14例（47%）,重度患者治疗前后分别为22例（73%）和16例（53%）,差异有统计学意义（χ^2=4.28,P〈0.05）。完成第一疗程治疗后,痊愈2例,占7%;有效27例,占90%;无效1例,占3%,总有效率为97%,均没有出现严重副作用。结论 听尼特TM耳鸣综合诊断治疗仪能为耳鸣患者提供准确测试和客观评估,实施因人而异的个体治疗方法 ;在治疗中辅以心理咨询,可帮助患者更好的理解耳鸣,树立信心,增加患者依从性,提高疗效。     

尼美舒利诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用

目的观察尼美舒利（NIM）诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡作用。方法0,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8 mmol•L－1NIM作用于体外培养的CNE2细胞株,光学显微镜观察细胞形态和数量变化,透射电子显微镜观察细胞形态和结构变化,噻唑蓝（MTT）法检测细胞悬液吸光度值,流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹反应（Western Blot）检测细胞环氧化酶2（COX 2）蛋白表达情况。结果不同浓度NIM作用3 d后,CNE2细胞皱缩,数量减少,与药物浓度呈正相关;透射电镜下,细胞形态结构随NIM浓度增加而出现不同程度破坏和死亡征象;相同作用时间下,NIM浓度越高,吸光度值越低;FCM结果显示,NIM各剂量组均在G0/G1峰前出现一个亚二倍体峰（凋亡峰）,随着NIM浓度增高,G0/G1期细胞所占比例逐渐下降,G2/M期细胞比例升高,凋亡率逐渐增高;Western Blot结果显示,随着NIM浓度增加,COX 2蛋白表达量逐渐减少。上述结果均与NIM浓度相关,经统计学处理,与对照组和相邻前一浓度组比较,均差异有统计学意义（P＜0.05）。结论NIM能诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡,且呈剂量依赖性,该作用与抑制COX 2有关。     

同时沉默IGF-1R和EGFR基因对肝癌HepG2细胞株生长抑制的作用机理

目的:同时沉默表皮生长因子受体(EGFR)、胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)基因,研究其抗瘤疗效及作用机理.方法:分别构建靶向EGFR、IGF-1R及两受体的小分子干扰RNA(siRNA-EGFR、siRNA-IGF-1R、siRNA-EGFR&IGF-1R),构建与任何基因无同源的阴性对照质粒(siRNA-H...     

尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡及衰老的影响

目的:研究尼美舒利与阿霉素联合应用对骨肉瘤MG-63细胞的作用及机理。方法:MTT法检测细胞的增殖,衰老相关性β-半乳糖苷酶(SAβ-Gal)染色检测细胞衰老,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡,透射电镜显示MG-63细胞的形态变化。结果:当阿霉素浓度固定在0.75 mg/L时,与低浓度尼美舒利(25-200 μmol/L)...     

鼻咽癌CNE-2细胞株胰岛素样生长因子-1受体和表皮生长因子受体沉默的放疗增敏机理

目的:评价RNA干扰(RNAi)同时沉默胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)和表皮生长因子受体(EG-FR)后生物学特性变化及对鼻咽癌CNE2细胞株放疗敏感性的改变。方法:构建荧光标记的靶向IGF-1R及EGFR信使RNA真核表达质粒,质粒转染鼻咽癌CNE2细胞株,共聚焦显微镜观察细胞转染结果,行平板克隆实验检测细胞存活分数;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western-blot法检测细胞周期相关蛋白cdk4/6,cyclin D1和c-myc。结果:成功构建真核表达质粒;siRNA-IGF-1R和EGFR组的细胞存活分数显著降低(P<0.05),与对照组相比,凋亡率显著增高(P<0.05),G0/G1期细胞比例明显增多,而S期和G2/M期细胞比例明显减少,细胞周期相关蛋白cdk4/6,cyclin D1和c-myc蛋白表达降低(P<0.05)。结论:RNA同时干扰沉默IGF-1R和EGFR可以引起鼻咽癌细胞周期蛋白表达降低,细胞周期阻滞,促进细胞凋亡。