肝癌HepG2细胞株胰岛素样生长因子1和表皮生长因子受体基因沉默后放疗增敏及机制

目的:探讨同时沉默胰岛素样生长因子1(IGF1)和表皮生长因子(EGF)二受体基因的抗瘤放疗增敏及机制.方法:分别构建靶向EGFR、IGF1R及两受体的小分子干扰RNA(siRNA-EGFR、siRNA-IGF1R、siRNA-EGFR& IGF1R),构建与任何基因无同源的阴性对照质粒(siRNA-HK),分别转染48照射肝癌HepG2细胞株.成克隆实验测定细胞存活分数,采用单击多靶模型和线性二次函数模型拟合细胞存活曲线,求出放射生物学参数Do、Dq、N和α、β、SF2值.流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化,细胞周期及相关蛋白、细胞凋亡及相关蛋白采用蛋白印迹.结果:同时沉默EGFR和IGF1R组与对照组及单基因干扰组相比抑制了细胞增殖、诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期G1/S期的进程,bcl-2和cdk2表达明显下调,而p21和bax表达增加.且同时沉默EGFR和IGF1R组和对照组细胞的耽值分别为0.588、2.070 4Gy; Dq值分别为0.562 5、2.030 7Gy;α值分别为0.515、0.021 6Gy-1;SF2值分别为0.22、0.619.同时沉默EGFR和IGF1R组Do、Dq和SF2值均减小,α值增大.结论:同时沉默EGFR和IGF1R基因具有更有效地干扰肝癌HepG2细胞株增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与bcl-2和cdk2表达下调和p21与bax表达增加有关,结合干扰多个受体分子可能是一种十分有前途的新的肝癌治疗途经.     

抑制EGF-1受体表达对人鼻咽癌裸鼠移植瘤生物学行为的影响

目的诱导IGF-I受体基因沉默的shRNA真核表达质粒的在体抗瘤效应,探讨RNA干扰IGF-I受体基因对裸鼠人鼻咽癌移植瘤的生物学行为的影响。方法将右侧背部接种人鼻咽癌CNE2细胞后,肿瘤直径达5～7mm的24只裸鼠随机分为3组:A组为IGF-1RmRNA特异性真核表达质粒(pshRNA1)治疗组,瘤体内多点注射pshRNA1;B组为pshRNA2质粒载体对照组,瘤体内多点注射阴性质粒载体pshRNA2(剂量同A组);C组为生理盐水对照组,瘤体内多点注射0.3ml生理盐水。从开始治疗后3周处死裸鼠,分离肿瘤,部分做共聚焦观察质粒转染情况,其余肿瘤组织观察肿瘤组织的病理变化和IGF-I受体蛋白在瘤体内的表达变化。结果所有裸鼠移植瘤接种成功,14d左右肿瘤直径达5～7mm。治疗裸鼠7d后,pshRNA1治疗组抑制率达67.21%,瘤体积明显小于阴性质粒组和生理盐水组(P<0.05),阴性质粒组与对照组无显著差异。pshRNA1治疗组移植瘤可见大片癌组织表达绿色荧光,其中仅少数细胞为IGF-IR阳性细胞。阴性质粒组癌组织也表达绿色荧光,但IGF-IR阳性细胞数明显多于pshRNA1治疗组(p<0.05),而生理盐水组的移植瘤未见绿色荧光。结论shRNA干扰IGF-I受体基因能在体内有效下调IGF-I受体蛋白的表达、抑制鼻咽癌裸鼠移植瘤的生长。     

OSAHS患者血中NLR水平与认知功能的关系

目的探讨阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)水平与认知功能的关系。方法将66例OSAHS患者分为轻度组(n=16)、中度组(n=15)和重度组(n=35),选择25例健康者作对照组。用多导睡眠监测仪(PSG)监测患者夜间睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)和最低血氧饱和度(LSaO2),采用MMSE和MoCA量表评判患者认知功能,检测4组NLR水平。分析认知功能量表评分、AHI、LSaO2与NLR之间相关性。结果与对照组比较,中、重度组MMSE、MoCA评分降低;与轻度组比较,重度组MMSE、MoCA评分降低(P0.05);OSAHS患者MMSE、MoCA评分与AHI呈负相关(r=-0.472和-0.768,P0.05),与LSaO2呈正相关(r=0.672和0.741,P0.05)。与对照组、轻度组比较,重度组NLR水平升高(P0.05)。OSAHS患者NLR水平与AHI呈正相关(r=0.2594,P0.05),与LSaO2呈负相关(r=-0.2423,P0.05);OSAHS患者MMSE、MoCA评分与NLR呈负相关(r=-0.3225和-0.3299,P0.05)。结论 OSAHS患者NLR水平随着AHI增加和缺氧程度加重而升高,NLR升高与认知功能下降具有相关性,早期对OSAHS患者NLR进行筛查,对病情评估具有一定参考价值。     

整合分析GEO和TCGA数据筛选喉鳞状细胞癌中新的基因预后标志物

目的：通过生物信息学分析鉴定喉鳞状细胞癌(LSCC)的潜在诊断、预后基因。方法：高通量基因表达数据库（GEO）中的数据（GSE143224和GSE59102）和癌症基因组图谱（TCGA）中的转录组数据用于生物信息学分析。确定了癌与正常样本之间的差异表达基因（DEGs）,并进行了功能和通路的富集分析。此外,使用Cox比例风险模型确定了与LSCC的发病机制和预后有关的基因。诺模图对患者的生存结局进行了量化。结果：总共确定了117个上调的DEGs和250个下调的DEGs。细胞外泌体和代谢途径是主要的生物学过程。确定了可能与LSCC的发病机制高度相关的15个基因。通过多因素Cox回归分析构建由7个基因（包括STC2、SERPINB13、RPL39L、SORBS2、LAPTM4B、ITGA6、DPT）组成的预后标志物,在预测总体生存率方面表现良好。同时,构建了整合基因标志物和临床病理风险参数的诺模图,以预测LSCC患者的总体生存率。结论：我们的研究发现了一组稳健的基于基因的标志物,可用于预测LSCC患者的预后,这可能有助于临床医生的决策,并可作为喉鳞状细胞癌药物合成的潜在新靶点。     

胰岛素样生长因子-1受体在肿瘤细胞的内化和泛素化分析

我们采用免疫印迹法(Western blot)、免疫沉淀技术(IP)和流式细胞仪(FACS)技术对鼠胚胎成纤维瘤三种细胞株胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的内化进行检测,探讨IGF-1R的内化在受体下行调节和β-arrestin在IGF-1R蛋白内化/泛素化降解中的作用.     

胰岛素样生长因子-1受体在肿瘤细胞的内化和泛素化分析

我们采用免疫印迹法(Western blot)、免疫沉淀技术(IP)和流式细胞仪(FACS)技术对鼠胚胎成纤维瘤三种细胞株胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)的内化进行检测,探讨IGF-1R的内化在受体下行调节和β-arrestin在IGF-1R蛋白内化/泛素化降解中的作用.     

听性脑干慢负相反应（SN10）的实验研究

应用具有频率特性的Ｌｏｇｏｎ刺激声诱发听性脑干慢负相反应（ＳＮ１０），探讨了纯音听阈、Ｌｏｇｏｎ行为阈及ＳＮ１０反应阈之间的关系。实验分三组：①正常组３０耳；②平坦型感音神经性听力损失组４０耳；③陡降型感音神经性听力损失组４０耳。研究结果表明：①正常组及平坦型感音神经性听力损失组之ＳＮ１０反应阈在Ｌｏｇｏｎ行为阈上１０～１３ｄＢ，在纯音听阈上２６～２８ｄＢ；②以ＳＮ１０反应阈来预估Ｌｏｇｏｎ行为阈，９５％的Ｌｏｇｏｎ行为阈理论值在实测值±１０ｄＢ以内，９９％的Ｌｏｇｏｎ行为阈理论值在实测值±１５ｄＢ以内；③如果相邻两倍频ＳＮ１０反应阈差值≥１０ｄＢ时，可初步判断其听力图型为陡降型；④ＳＮ１０潜伏期－强度函数曲线及振幅－强度函数曲线符合ＡＢＲ一般规律。     

p63基因的研究进展

抑癌基因p5 3由于在超过 5 0 %的人类肿瘤中发生频繁地缺失和突变而备受重视。自 1979年被发现以来 ,众多的学者对其进行了广泛地探讨。随着研究的深入 ,发现存在一个p5 3基因家族 ,其家族成员p73、p6 3分别于 1997年和 1998年被发现、克隆成功。对于p73、p6 3基因 ,人们也进行了多方面的探讨并成为近年来基因领域中研究的热点之一。本文就近年来p6 3基因的研究进展作一综述。1　p6 3基因的发现与命名p6 3基因最初是由Schmale[1] 等在老鼠身上发现的 ,命名为KET。稍后 ,Osada[2 ] 等运用简并引物PCR方法寻找p5 3相关基因时 ,得到 2个与p…     

胰岛素样生长因子-1受体蛋白在鼻咽癌细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨鼻咽癌(NPC)组织中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)蛋白的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测63例NPC组织和鼻咽部炎性黏膜组织中IGF-1R的表达,对其中45例NPC患者进行5年随访观察,以及采用免疫印迹法检测3种体外培养的NPC细胞系中IGF-1R蛋白的表达情况。结果:63例NPC和21例鼻咽黏膜(伴慢性炎症)组织中的IGF-1R阳性表达率分别为82.5%和14.3%,在NPC中的表达阳性率明显高于鼻咽炎性组织(P<0.01)。NPC组织中IGF-IR的表达与TNM分期和颈淋巴结转移有关,有颈淋巴结转移者其表达阳性率较高(P<0.05);Ⅰ~Ⅱ期表达阳性率较Ⅲ~Ⅳ期低(P<0.01);NPC局部复发者IGF-lR阳性表达率(89.5%)明显高于无局部复发者(53.9%),P<0.05;NPC放疗后生存期小于5年者的阳性表达率(88.9%)明显高于5年以上生存期者的阳性表达率(51.9%),P<0.01;病理分化程度越高IGF-lR阳性表达率越低,但NPC病理类型间比较差异无统计学意义(P>0.05)。在3种NPC细胞系中IGF-1R的表达明显高于鼻咽炎症黏膜组织,其中TW03表达最强,CNE2其次,CNEl表达稍弱。结论:NPC组织中存在IGF-1R的过表达现象,IGF-1R的异常表达与NPC的发生、发展存在一定的关系。IGF-1R可能是复发或转移性NPC治疗中一个潜在的靶分子。