实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞CD_(58)基因的表达

目的:应用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)CD58基因的表达。方法:提取PBMC总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR法分别检测43例HBV感染者及11例正常对照的PBMCCD58基因的表达水平,同时检测血清ALT、AST水平。结果:乙型肝炎各组患者PBMCCD58mRNA表达水平较正常对照组明显增高,差异均有显著性。乙型肝炎患者PBMCCD58mRNA水平与血清ALT、AST呈显著正相关。结论:实时荧光定量PCR可以准确定量检测基因的表达;乙型肝炎患者PBMCCD58基因表达水平与疾病严重程度及肝细胞损伤严重程度有关。     

人源抗菌肽LL-37衍生物GLL-37抗菌活性研究

目的:对人源抗菌肽LL-37的特定氨基酸残基进行替换,获得衍生抗菌肽GLL-37,以增强其抗蛋白酶解能力和抗菌活性。方法:肽LL-37和GLL-37均由化学合成。采用微量稀释法测定它们对6种革兰氏阴性和阳性菌的最低抑菌浓度,以及在不同NaCl浓度下,它们对大肠埃希菌ATCC 25922的最低抑菌浓度。将LL-37和GLL-37与弹性蛋白酶共孵育后,通过对共孵育产物进行蛋白聚丙烯凝胶电泳和抗菌活性测定,研究它们抗弹性蛋白酶水解的能力。结果:GLL-37较LL-37对弹性蛋白酶的水解作用更具抵抗力。在高浓度NaCl下,GLL-37也较LL-37具有更强的抗菌活性。结论:通过对LL-37氨基酸序列中特定氨基酸残基的替换,可增强其抗菌活性及抗弹性蛋白酶水解能力,获得的衍生肽GLL-37具有很高的研究开发价值。     

右旋松萝酸对小鼠口服急性毒性及细胞毒性的实验研究

目的 观察右旋松萝酸的口服急性毒性,MTT方法测其细胞抑制活性.方法 建立小鼠经口急性中毒小鼠模型,观察不同剂量药物灌胃小鼠的中毒表现.测定小鼠的经口LD_(50),观察不同剂量右旋松萝酸对小鼠生存时间及存活率的影响.同时,用不同浓度的右旋松萝酸作用于体外培养的心肌成纤维细胞,MTT方法测定细胞的IC_(50),观察不同浓度药物对细胞的抑制率.结果 右旋松萝酸剂量越大,小鼠的中毒症状越明显,生存时间越短.小鼠经口LD-(50)为388mg/kg,中毒表现主要有精神萎靡,耸毛,畏寒,呼吸急促,行动迟缓,厌食等症状.体外细胞培养实验显示,右旋松萝酸对细胞增值的抑制呈剂量正相关,较大剂量对细胞有破坏作用,其对心肌成纤维细胞的IC_(50)为322 μg/ml.结论 右旋松萝酸为一种中低毒的天然化合物,中低剂量没有明显的细胞毒性.

Abstract：

Objective To observe the oral acute toxicity of of (+)-usnic acid in mice and assess its cytotoxicity in rat cardiac fibroblasts. Methods The mice with acute poisoning of (+)-usnic acid at different doses by oral administration were observed for toxic manifestations, and the LD_(50) was determined. The survival time and survival rate of the mice receiving different doses of (+)-usnic acid were observed. Cultured rat cardiac fibroblasts were inoculated with different concentrations of (+)-usnic acid, and the cell growth inhibition rate was estimated and the IC_(50), determined using MTT assay. Results Higher dose of (+) -usnic acid resulted in more obvious symptoms of poisoning and shorter survival time of the mice. The LD_(50) of (+)-usnic acid in mice by oral administration was 388 mg/kg. The manifestations of poisoning such as apathism, pilomotor, chill, dyspnea,torpidity and anorexia was observed. Rat cardiac fibroblasts incubated with (+)-usnic acid showed obvious growth inhibition,which was positively correlated to the dose of (+)-usnic acid, and high dose of (+)-usnic acid caused severe cell injuries. The IC_(50) of (+)-usnic acid in rat cardiac fibroblasts was 322 μg/ml. Conclusion (+)-usnic acid is a natural compound of low toxicity in mice, and low to medium dose of (+)-usnic acid dose not produce obvious cytotoxicity.     

医学免疫学实验课教学方法改革的探索及思考

免疫学实验课是该门理论课的重要补充,但是传统的实验课教学方法使医学免疫学实验课的教学效果不理想。本文分析了传统教学方法的弊端,并针对这些问题,对实验课教学的方法进行了改革,以问题引导学生自学和讨论学习内容,并通过调查问卷了解教学的效果。结果表明,新的教学方法受到学生的普遍欢迎,对提高学生学习的主动性和阐述能力都有很大的帮助。实践表明,有效利用实验课,对于提升免疫学课程的整体教学质量,具有重要意义。     

单纯疱疹病毒I型DNA疫苗的构建(英文)

目的　构建表达单纯疱疹病毒 1型糖蛋白D的DNA疫苗。方法　采用聚合酶链式反应 (PCR) ,从HSV 1基因组中扩增出 gD基因 ,插入中间载体pGEM T ,然后克隆入真核表达载体pcDNA3 .1 ,构建重组质粒 pLy D .经部分测序和限制性内切酶分析证实。将pLy D转染Cos 7细胞 ,并肌肉接种ICR小鼠。用免疫组化和ELISA方法分别检测gD蛋白表达及小鼠血清中的特异性抗体。结果　转染的Cos 7细胞中有 gD蛋白的表达 ;经三次肌肉免疫接种的小鼠血清中有特异性HSV 1抗体产生。结论　本研究构建的重组质粒 pLy D能够在哺乳动物细胞中表达目的蛋白 ,免疫接种后可以诱导动物产生免疫反应     

虎杖中有效成分白藜芦醇对HeP-2细胞的生长抑制及诱导凋亡作用初探

目的：对白藜芦醇的体外抗肿瘤作用进行研究，探讨其作用机制。方法：用体外细胞培养，采用MTT法，并用流式细胞仪观察不同浓度白藜芦醇对HeP-2细胞生长的影响。结果：一定浓度白藜芦醇能抑制HeP-2细胞的恶性增殖，诱导HeP-2细胞出现凋亡峰，使HeP-2G0／G1期细胞增加，S期细胞减少，呈现G0／G1期阻滞现象。同时，不影响正常小鼠成纤维3T3细胞的生长。结论：一定浓度白藜芦醇可以抑制HeP-2生长，诱导HeP-2细胞发生凋亡，具一定的时间—剂量依赖性，且对正常细胞是无害的。     

新冠肺炎疫情期间“医学免疫学”在线授课效果的调查分析

为了解新冠肺炎疫情期间"医学免疫学"在线教学的效果和存在的问题,通过问卷调查,分析评估学生在线学习医学免疫学的学习效果及影响因素,以不断提升在线教学质量,并为今后的教学工作积累经验。     

白介素2在小鼠分支选择损伤神经源性疼痛模型中的镇痛作用

目的 研究白介素2(IL-2)在小鼠分支选择损伤(SNI)神经痛模型中的镇痛作用.方法 制作小鼠SNI模型成功后,用Von Frey Filaments刺激法和冷盘法测定腹腔给予IL-2的镇痛作用,并测定阿片肽受体拮抗剂纳洛酮对其镇痛作用的阻断.结果 (1)IL-2的镇痛作用在给药后30 min出现,75 min时消失,105 min后又再次出现,可维持24 h以上.(2)纳洛酮可以完全阻断IL-2的镇痛作用.结论 (1)IL-2在小鼠SNI模型中具有镇痛作用,且镇痛作用呈双峰现象,持续时间较长.(2)IL-2的镇痛作用可能通过阿片受体传导.     

DNA CpG特征结构免疫学研究进展

随着对ＤＮＡ免疫学特性的深入了解,人们对ＣｐＧ特征结构在ＤＮＡ免疫学中的重要作用有了初步的认识,本文就ＣｐＧ特征结构的特点、免疫学活性及应用前景作一综述。     

实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞CD58基因的表达

目的：应用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)CD58基因的表达。方法：提取PBMC总RNA并逆转录为cDNA，实时荧光定量PCR法分别检测43例HBV感染者及11例正常对照的PBMC CD58基因的表达水平，同时检测血清ALT、AST水平。结果：乙型肝炎各组患者PBMC CD58 mRNA表达水平较正常对照组明显增高，差异均有显著性。乙型肝炎患者PBMC CD58mRNA水平与血清ALT、AST呈显著正相关。结论：实时荧光定量PCR可以准确定量检测基因的表达；乙型肝炎患者PBMC CD58基因表达水平与疾病严重程度及肝细胞损伤严重程度有关。