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载TK基因聚丙交酯乙交酯纳米粒的性质及表达研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的载pEGFP-TKAFB重组质粒纳米粒的性质及其表达研究。方法以无毒的可生物降解的高分子材料聚丙交酯乙交酯作为载体材料,采用双乳化溶媒蒸发法制备了载pEGFP-TKAFB重组质粒纳米粒,考察其形态学及包封率,琼脂糖电泳分析抗核酸酶抗超声的能力,MTT法测定GCV对细胞的抑制率,流式细胞仪测定报告基因EGFP的表达。结果制得的纳米粒,形态圆整,大小均匀,平均粒径(72±12) nm,平均包封率91.25%,质粒制成纳米粒后提高了质粒对抗超声剪切及核酸酶降解的能力,细胞转染效率也显著优于裸质粒。结论质粒DNA制成纳米粒可进一步研究基因药物的给药系统。 相似文献
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目的 体外实验研究二甲双胍(Met)对前列腺癌DU145增殖、迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法 0、5、20、50 mmol·L-1 Met处理细胞后,CCK8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western Blot实验在mRNA和蛋白水平检测人抗原R(HuR)的表达变化;分别过表达和敲低HuR后,用上述相同实验方法检测DU145的增殖、迁移、侵袭的能力;Western Blot法检测Met处理,过表达HuR或敲低HuR后对AKT/mTOR通路的影响。结果 Met处理细胞后,DU145的增殖、迁移、侵袭能力降低,并呈现出浓度依赖性,同时在mRNA和蛋白水平降低了HuR的表达;敲低HuR对细胞增殖、迁移、侵袭有一定抑制作用,而过表达HuR对细胞则有相反的作用;Met和低表达HuR组抑制了细胞中AKT、mTOR的磷酸化,而过表达HuR则促进了AKT、mTOR的磷酸化。结论 Met可抑制前列腺癌细胞DU145的增殖、迁移、侵袭;其作用机制可能是Met通过降低HuR表达进而抑制AKT/mTOR通路的异常激活,从而抑制... 相似文献
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牙周炎是发生在牙周组织的炎症性破坏性疾病.牙周炎由牙菌斑作为始动因子,介导氧化应激和继发性炎症反应,导致组织破坏、牙槽骨吸收,最终牙齿松动、脱落.沉默信息调节因子1(SIRT1)作为重要的长寿因子,在抗老化、抵抗应激、介导凋亡与自噬和调控炎症反应过程中扮演重要的角色.近年来一些研究从氧化应激、炎症因子通路及全身疾病等多... 相似文献
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毛细管电泳快速PCR-SSCP分析方法研究 总被引:9,自引:0,他引:9
目的:建立一种快速、简便、敏感检测人类基因组DNA点突变的方法。方法:用人工诱发的带有单个碱基改变的PCR片段作目的基因,借助高效毛细管电泳技术对PCR片段作SSCP分析。电泳采用中性毛细管涂层柱和4%线性聚丙烯酰胺凝胶电泳缓冲液,紫外检测仪检测。结果:196bp长的PCR片段用毛细管电泳可在25min内分离出双链及单链峰,仅有一个碱基差异的两条单链DNA也能得到较好地分离。结论:毛细管电泳技术可用于作PCR-SSCP分析,具有快速、灵敏、准确、重复性好等特点,为筛选基因点突变提供了一种十分有效的方法。 相似文献