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目的:探讨下调磷酸核糖焦磷酸合成酶亚基II(PRPS2)基因表达对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建PRPS2基因干扰载体sh-PRPS2,正常对照组不转染载体,阴性对照组转染阴性对照载体sh-PRPS2-0,3个实验组分别转染干扰载体sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2和sh-PRPS2-3,经DNA测序鉴定后转染人结肠癌HCT116细胞,分别采用RT-PCR和Western blot法检测各载体转染后细胞PRPS2 mRNA和蛋白水平的表达变化,CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。结果:经DNA测序证实成功构建sh-PRPS2干扰载体3个,分别为sh-PRPS2-1、sh-PRPS2-2和sh-PRPS2-3。将上述3个干扰载体分别转染HCT116细胞72 h后,RT-PCR结果显示,PRPS2 mRNA相对表达量依次为0.61±0.03、0.89±0.02、0.27±0.05,与对照组比较,均显著下降(P<0.05)。Western blot结果显示,PRPS2蛋白相对表达量依次为0.37±0.06、0.84±0.05、0.30±0.04,与对照组比较均显著下降(P<0.05)。转染sh-PRPS2-3载体72 h后细胞增殖抑制率达19.8%±2.4%,凋亡率上升至68.4%±4.6%,G0/G1期细胞比例上升为12.9%±3.8%。结论:PRPS2的低表达可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞阻滞于G0/G1期,本研究为肿瘤的靶向治疗提供了研究基础。 相似文献
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患者,男,18岁,上呼吸道感染,门诊做皮肤脂肪瘤手术常规检查血常规,结果为W BC:12.7×109/L,RBC:4.52×1012/L,HGB:138 g/L,PLT:47×109/L,血小板47×109/L,临床无明显出血倾向。仪器复查血小板为25×109/L,涂片瑞氏染色可见血小板明显聚集,小的一般为10~20个,大的有50个以上。冲池计数血小板也可见血小板聚集。37℃水浴后仪器复查血小板为34×109/L。重新采集末梢血推片染色、充池计数,直接观察患者的末梢血涂片,血小板呈正常分布无明显的聚集,充池计数结果为血小板221×109/L,白细胞计数10.6×109/L。间隔1h结果为W BC:15.3×109… 相似文献
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