２６２例中国人黑色素瘤Ｃ-ＫＩＴ基因扩增分析

目的　分析中国人黏膜、肢端和非肢端皮肤黑色素瘤Ｃ-ＫＩＴ基因扩增情况。方法　采用Real time Quantitative PCR SYBR green染料法检测２６２例中国人恶性黑色素瘤（ＭＭ）Ｃ-ＫＩＴ基因拷贝数变异;存在Ｃ-ＫＩＴ基因扩增的病例,采用ＰＣＲ扩增和基因测序的方法检测其第９、１１、１３、１７和１８外显子突变情况,免疫组化方法检测ＣＤ１１７表达情况。结果　２１例患者肿瘤组织中Ｃ-ＫＩＴ基因存在明显扩增,黏膜、肢端和非肢端皮肤黑色素瘤Ｃ-ＫＩＴ基因扩增比例分别为１０.２０％（１０／９８）、８.２４％（７／８５）和５.０６％（４／７９）;其中２例Ｃ-ＫＩＴ基因扩增同时伴突变;Ｃ-ＫＩＴ基因扩增与ＣＤ１１７表达无明显相关性。结论 在中国两种最常见的黑色素瘤亚型肢端和黏膜黑色素瘤患者中,部分患者黑色素瘤组织存在Ｃ-ＫＩＴ基因扩增,提示针对这种扩增的特异靶向药物有可能成为该类患者个体化治疗的选择。     

重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪增强抗黑素瘤作用及其机制研究

目的:探讨重组人血管内皮抑制素(recombinant human endostatin, rh-endostatin)联合达卡巴嗪(Dacarbazine)能否增强抗黑素瘤作用,并初步分析其作用机制.方法:分别采用MTT法和FCM法检测重组人血管内皮抑制素单药及其联合达卡巴嗪对黑素瘤B16F10细胞增殖和凋亡的影响;Western印迹法检测重组人血管内皮抑制素对黑素瘤细胞中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)磷酸化的影响;建立C57BL/6黑素瘤荷瘤小鼠模型,研究重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪能否增强体内抗黑素瘤的作用.结果:重组人血管内皮抑制素、达卡巴嗪以及两药联合处理对黑素瘤B16F10细胞增殖的抑制率分别为(9.67±2.89)%、(22.67±3.06)%和(30.33±1.16)%,差异有统计学意义(P<0.05);重组人血管内皮抑制素组黑素瘤细胞的ERK分子磷酸化水平明显降低.接种肿瘤18 d时,重组人血管内皮抑制素组、达卡巴嗪组和两药联合组荷瘤小鼠的肿瘤体积分别为(6.45±1.24)cm3、(8.94±2.04)cm3和(4.56±0.98)cm3,两药联合组的肿瘤体积明显低于达卡巴嗪单药组(P<0.05).结论:重组人血管内皮抑制素联合达卡巴嗪体外可增强抗黑素瘤B16F10细胞增殖的作用,体内可增强达卡巴嗪对荷瘤小鼠黑素瘤生长的抑制作用,并提高荷瘤小鼠的存活率.推测抑制黑素瘤细胞中ERK分子酪氨酸磷酸化可能是重组人血管内皮抑制素发挥其抗黑素瘤作用的机制之一.