伊立替康与4-氨基吡啶联合应用对人结直肠癌细胞增殖作用的影响

目的 研究肿瘤化学治疗药物伊立替康(CPT-11)对人结直肠癌细胞株HT-29细胞的作用及对钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)的影响,并探讨其抗HT-29细胞的可能机制.方法 CPT-11、4-AP以及两药联合应用对HT-29细胞增殖及细胞侵袭力的影响分别用MTT比色法和Transwell法检测.用流式细胞术膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素碘化丙啶双染法检测上述两种药物对HT-29细胞凋亡的影响.用膜片钳方法 检测ATP敏感性钾电流(IKATP)的电流变化.结果 1.0～64.0μg/ml CPT-11可呈剂量依赖性和时间依赖性地抑制HT-29细胞增殖,而1.0 mmol/L的4-AP可使CPT-11的作用增强.16.0 μg/ml CPT-11和1.0 mmol/L 4-AP单独应用均可明显诱导HT-29凋亡、抑制HT-29细胞侵袭力,而两药联合应用能明显增加上述诱导凋亡和抑制侵袭力的作用.不同浓度CPT-11可剂量依赖性地降低细胞膜IKATP水平,呈剂量依赖负相关性.结论 CPT-11抑制人结直肠癌HT-29细胞增殖和侵袭力、诱导细胞凋亡等作用可被4-AP协同增强,可能机制与CPT-11抑制ATP敏感性钾通道开放有关.     

大肠癌组织DCC基因启动子甲基化及表达水平相关性研究

目的:探讨结直肠癌缺失基因 (DCC)在大肠癌组织中的表达特征及其与启动子甲基化的相关性.方法:分别采用免疫组织化学和甲基化特异性PCR (MSP)方法检测71例大肠癌及其相应癌旁组织中DCC蛋白的表达情况及DCC基因启动子甲基化状态.结果:大肠癌组织中DCC蛋白表达水平 (35/71, 49.3%) 显著低于癌旁正常组织 (34/39, 87.2%, P<0.001),且与临床Duke分期相关,P=0.023;大肠癌组织中DCC基因启动子甲基化发生率 (54/71, 76.1%)高于癌旁正常组织 (14/39, 35.9%, P<0.001)和癌旁炎性组织 (10/22, 45.5%, P=0.007),且直肠癌患者DCC基因启动子甲基化发生率 (28/31, 90.3%)高于结肠癌患者 (27/40, 67.5%, P=0.022);大肠癌组织中DCC蛋白失表达组甲基化发生率 (34/36, 94.4%)显著高于DCC蛋白表达组 (20/35, 57.1%, P<0.001).结论:DCC基因启动子甲基化可能是大肠癌中DCC失表达的主要机制之一.     

银杏叶提取物对溶血卵磷脂胆碱致血管内皮细胞损伤的保护作用

应用传代培养的小牛主动脉内皮细胞(BAEC)为实验模型,观察银杏叶提取物(EGb)对溶血卵磷脂胆碱(LPC)损伤BAEC及其分泌功能的影响。结果发现培养BAEC与LPC(2.5μg·mL^-1)孵育24h后,出现细胞皱缩成团,大多细胞脱落、甚至细胞解体。细胞内漏出LDH增加,脂质过氧化物(MDA)含量增高,SOD活性降低,而PAI活性增高。LPC与不同浓度EGb共孵育24h,大部分细胞排列规则,形态基本正常,LDH明显减少,MDA含量下降,SOD活性增高及PAI活性降低。结果表明LPC可致培养血管内皮细胞损伤,而EGb可对抗LPC所造成的血管内皮细胞损伤,可能通过清除氧自由基、抗脂质过氧化作用和提高EC产生抗氧化能力。     

低密度脂蛋白对动脉壁内皮细胞膜血栓调节蛋白功能的影响

低密度脂蛋白对动脉壁内皮细胞膜血栓调节蛋白表达的影响周凤鑫，经建中，黄桂秋，张健，郑硕民，李慧丽，刘玮，徐也鲁，葛志英（上海第二医科大学病理生理教研室，上海血液研究所基础实验室，上海中医药大学生化教研室，上海２０００２５）高脂血症是动脉粥样硬化（Ａｓ...     

APC、SMAD4双基因沉默研究WNT通路、TGF-β通路对大肠癌细胞粘附作用的交叉调控机制

目的Wnt通路与TGF-β通路分别在大肠癌细胞粘附中发挥重要作用,但两通路间是否存在交叉调控尚不明确,本实验的目的即是阐明大肠癌中Wnt通路和TGF-β通路交叉调控作用与机制。方法人类大肠腺癌细胞株HCT116/HT29(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库,上海)分别经携带APC-shRNA及Smad4-RNA序列的质粒(Psilencer4.1neo,Ambion)转染后,应用RNA干扰技术建立APC基因沉默、Smad4基因沉默和双基因沉默细胞系。然后应用反转录-PCR和western-blot比较每个细胞系粘附因子E-cadherin、catenins和转录因子c-myc/CyclinD1/P21/Met等在细胞中分布与表达差异上的变化。结果在APC-shRNA克隆大肠癌细胞株(APC基因沉默),TGF-β可明显抑制其过快生长速度,但丧失了诱导α、β、γ-catenin和E-cadherin表达增加作用。在对照组与沉默组间,E-cadherin/catenins/c-myc/CyclinD1/P21/Met的分布与表达存在显著性差异(P<0.05)。结论Wnt信号传导通路在正常细胞中是关闭的,但在结直肠癌细胞中被激活。TGF-β是一种多向细胞调控因子,它在肿瘤发生的早期发挥抑癌作用,但在进展期则促进肿瘤细胞的转移。TGF-β促进cadherins表达依赖于APC活性,说明Wnt通路和TGF-β通路均以APC作为共同的调控因子在大肠癌细胞粘附与生长中发挥相互调控作用。     

豆制品摄入与乳腺癌发生风险的系统评价

目的 评价豆制品摄入与乳腺癌发生风险的相关性.方法 检索CNKI、VIP、CBM、PubMed、EMBase、the Cochrane library数据库(1990-2010年),收集国内外发表的关于豆制品摄入与乳腺癌发生风险的病例对照研究资料,筛选符合纳入标准的研究,运用RevMan 5.0软件对相关数据进行Meta分析,采用漏斗图分析发表偏倚.结果 根据标准筛选出15篇文献其中13篇为英文,2篇中文,病例数7530,总人数32319,以进食豆制品的量分为常食组与偶食组,豆制品摄入与乳腺癌发生风险的Meta分析结果显示:OR=0.80,95%CI=(0.69,0.92),(P<0.05).结论 豆制品是乳腺癌发生的保护性因素,经常食用豆制品的妇女发生乳腺癌的风险降低.     

豆制品摄入与乳腺癌发生风险的系统评价

目的：评价豆制品摄入与乳腺癌发生风险的相关性。方法：检索CNKI、VIP、CBM、PubMed、EMBase、the Cochrane library数据库（1990-2010年）,收集国内外发表的关于豆制品摄入与乳腺癌发生风险的病例对照研究资料,筛选符合纳入标准的研究,运用RevMan 5.0软件对相关数据进行Meta分析,采用漏斗图分析发表偏倚。结果：根据标准筛选出15篇文献其中13篇为英文,2篇中文,病例数7530,总人数32319,以进食豆制品的量分为常食组与偶食组,豆制品摄入与乳腺癌发生风险的Meta分析结果显示：OR=0.80,95%CI=（0.69,0.92）,（P〈0.05）。结论：豆制品是乳腺癌发生的保护性因素,经常食用豆制品的妇女发生乳腺癌的风险降低。     

低密度脂蛋白对动脉壁内皮细胞膜血栓调节蛋白功能的影响

通过不同浓度的低密度脂蛋白与体外培养的新生小牛主动脉内皮细胞经不同时间孵育后，应用凝血酶、蛋白Ｃ和Ｓ－２２３８发色底物显色法，观察单层内皮细胞膜上血栓调节蛋白功能的变化。结果显示：低密度脂蛋白孵育浓度＞６ｍｇ·Ｌ－１时．血栓调节蛋白活性降低，两者呈良好的负相关（ｙ＝－０．２５ｘ＋６５．９６，ｒ＝－０．８７，ｎ＝１７５，Ｐ＜０．００１）；浓度≥５０ｍｇ·Ｌ－１时，随着孵育时间延长，血栓调节蛋白受抑制较显著，并呈相关性；低密度脂蛋白还使血栓调节蛋白辅助激活蛋白ｃ的反应速率出现早、中期减慢，后期加快的变化．这些变化表明低密脂蛋白具有形响血栓调节蛋白功能的作用，提示高脂血症可以通过抑制动脉血管壁局部抗凝功能来促进动脉粥样硬化的发生发展．     

90年代动脉粥样硬化发病机制的研究进展和方向

动脉粥样硬化(As),作为心脏病突发,中风和肢端坏疽的主要原因,在美国、欧洲和日本,它与全部死亡率中的半数疾病有关。As是由于动脉壁的内皮细胞和平滑肌细胞受各种危险因子的损伤,而使机体产生的一种过度的支性增生性反应过程。其中大量的生长因子、细胞因子和血管调节因子参与了此反应过程。因此我们可通过控制各种相关细胞中以上这些因子的基因表达,来寻找新的诊治As的药物,从而可以预防As的形成和使已经形成的As灶消退。     

低密度脂蛋白对动脉壁内皮细胞膜血栓调节蛋白功能的影响

低密度脂蛋白对动脉壁内皮细胞膜血栓调节蛋白功能的影响经建中，周凤鑫，黄桂秋，胡燕琴，刘玮，李慧丽，张健，张依宁，徐也鲁，葛志英（上海第二医科大学病理生理学教研室，上海血液学研究所基础实验室，上海中医药大学生物化学教研室，上海２０００２５）血脂增高是发...