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建立不同民族永生细胞株质量控制方法的探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
目的以建立普米族、独龙族和怒族永生细胞为基础,探讨EB病毒转化细胞、细胞培养、冻存、复苏以及支原体检测等建立永生细胞株的技术要点及质量检测方法.方法采用EB病毒转化技术建立3个民族永生细胞株;培养法和PCR法对细胞株进行支原体污染检测;染色体G显带及核型分析细胞株的遗传稳定性.结果成功建立了3个民族B淋巴细胞永生细胞株,转化率分别为98%、86%和76%.对已建株保存的3个民族的永生细胞进行复苏培养,复苏成活率为100%.支原体污染检测均为阴性.染色体计数和G带分析显示,细胞株经早期传代培养后,仍然保持二倍体特征,未发现染色体结构畸变.结论本研究中传代培养、细胞冻存、细胞复苏和支原体污染防范等一整套技术过程是满足建库要求的.同时为大规模永生细胞库的建立和进行相应的质量监测提供了科学的依据.另外,本研究还对一些影响转化的因素和可能的机理进行了探讨. 相似文献
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宫颈癌是影响女性的常见恶性肿瘤之一,其中高危型HPV的持续感染是导致宫颈癌的主要病因。在宫颈癌的发生发展过程中,除了HPV E6、E7与宫颈癌病变有主要的关系外,其他一些早期蛋白如E2、E5也发挥了重要的作用。如E2可以启动并维持病毒的复制,而E5可以与E6、E7癌蛋白合作,促进感染细胞增殖。本研究仅就HPV E2、E5在宫颈癌发生发展中的机制以及相关的治疗性疫苗研究进展进行综述。 相似文献
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目的:探讨内质网氨肽酶1(endoplasmic reticulum aminopeptidase 1,ERAP1)基因多态性与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的相关性。方法入选NSCLC患者224例,健康体检人群207例。采用Taq Man探针基因分型方法对ERAP1基因SNP rs26653和rs26618两个位点进行基因分型,并构建单倍型,评估上述两个SNPs及单倍型与NSCLC的相关性。结果病例组和对照组ERAP1基因rs26618和rs26653基因型和等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。病例组和对照组rs26618/rs26653单倍型CG、TC的单倍型频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERAP1基因与NSCLC的发生有关, rs26618/rs26653-CG单倍型可能增加NSCLC的患病风险,rs26618/rs26653-TC单倍型对NSCLC可能具有保护性作用。 相似文献
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目的:观察组分无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗(DTacP-sIPV)或无细胞百白破-灭活脊髓灰质炎-b型流感嗜血杆菌联合疫苗(DTacP-IPV/Hib)基础免疫大鼠后加强免疫破伤风类毒素、降低抗原含量的白喉毒素和无细胞百日咳联合疫苗(Tdap)是否产生免疫加强效果,为候选青少年及成人Tdap疫苗提供临床... 相似文献
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背景与目的:CD44分子是众多肿瘤细胞的标志分子,其表达水平与肿瘤细胞的恶性程度有关。该研究探讨CD44基因中的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与云南汉族人群宫颈癌和非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)易感性的相关性。方法:选取了CD44基因中的两个SNP位点rs13347和rs8193,采用TagMan基因分型的方法,分析这两个多态性位点在497例宫颈癌患者和500例健康对照个体以及483例NSCLC患者和471例健康对照个体中的分布特征,并分析CD44基因中的多态性位点与云南汉族人群宫颈癌和NSCLC的相关性。结果:rs13347和rs8193位点等位基因和基因型在宫颈癌组和对照组中的分布频率的差异无统计学意义(P>0.05)。而在NSCLC组和对照组的比较中:rs13347和rs8193位点等位基因在NSCLC组和对照组中的分布频率的差异有统计学意义(P=0.020和P=0.004);这两个位点基因型在NSCLC组和对照组中分布频率的差异有统计学意义(P=0.027和P=0.020);其中rs13347位点等位基因C在NSCLC组中的分布频率显著高于对照组,可能是NSCLC发生的风险因素(OR=1.250,95% CI:1.035~1.509),rs8193位点等位基因C在对照组中的分布频率显著高于NSCLC组,可能是NSCLC发生的保护性因素(OR=0.768,95%CI:0.641~0.921)。单倍型分析结果显示,rs13347C-rs8193T和rs13347T-rs8193C在NSCLC组和对照组中的分布频率差异有统计学意义(P=0.003和0.022);该结果说明单倍型rs13347C-rs8193T可能是云南汉族人群NSCLC发生的风险性因素(OR=1.316,95%CI:1.096~1.579)。结论:CD44基因中的两个SNP位点rs13347和rs8193可能与云南汉族人群宫颈癌发病风险无关,而可能与云南汉族人群NSCLC具有相关性。 相似文献
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目的 探讨蒙古族人群中EMILIN1基因的3个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点与原发性高血压的关系.方法 在内蒙古自治区蒙古族人群中选取201例原发性高血压患者和202名血压正常者进行病例对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态方法检测rs3754734、rs2011616和rs2304682这3个SNP位点的等位基因和基因型分布,并构建单倍型.结果 在这3个SNP位点中,rs2304682位点的基因频率和基因型频率在高血压组和对照组间差异有统计学意义(P<0.05),并且在rs3754734和rs2304682这2个SNP位点构建的单倍型中,G-C和G-G单倍型在高血压组和对照组之间差异有统计学意义(P<0.05).在舒张压偏高组和舒张压正常组间,rs2304682位点的基因型和等位基因分布差异有统计学意义(P<0.05),而在收缩压偏高组和收缩压正常组间,各个SNP的基因型和等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05).结论 在蒙古族人群中,EMILIN1基因rs2304682多态性位点以及rs3754734和rs2304682这2个SNP位点构建的G-G单倍型可能与原发性高血压的易感相关联,rs2304682的多态性与蒙古族原发性高血压的舒张压的高低可能有关联.Abstract: Objective To explore the relationship between genetic polyrnorphisms of 3 single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the elastin microfibril interfacer 1 (EMILIN1)gene and essential hypertension. Methods A case-control study was conducted in which 201 hypertensive patients and 202 healthy controls in Mongolian population were enrolled, and the genotypes of rs3754734, rs2011616 and rs2304682 loci were analyzed using polymerase chain reaction-restriction fragment length polyrnorphism (PCR-RFLP) and direct sequencing techniques. Results There were significant differences in the frequencies of alleles and genotypes for the rs2304682 between the hypertensives and normotensives in the population(P<0. 05). The frequency of the G-G haplotype established by rs3754734 and rs2304682 was significantly higher in the hypertensive patients (P<0. 05). The frequencies of alleles and genotypes for the rs2304682 also had significant differences between the group with high diastolic blood pressure and normal diastolic blood pressure (P<0.05). There were no significant differences in the frequencies of alleles and genotypes for the 3 SNPs between the group with high systolic blood pressure and normal systolic blood pressure (P>0.05). Conclusion The rs2304682 locus in the EMILIN1 gene, as well as the haplotypes G-G constructed using rs3754734 and rs2304682, may associate with the susceptibility of essential hypertension in the Mongolian population. Also, rs2304682 may associate with the level of the diastolic blood pressure. 相似文献
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目的 研究磷脂氢谷胱甘肽过氧化酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,PHGPx或GPx4) 基因5′非翻译区(5′-untranslated region,5′-UTR) 区单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与寡弱精症男性不育的相关性.方法 采用测序的方法,对131例寡弱精症男性不育患者和109名健康已育男性的GPx4基因的5′-UTR区域进行测序分析.结果 测序结果与美国国立生物技术信息中心数据库对比,发现该区域有9个SNPs(rs757228、rs757229、rs757230、rs4588110、rs3746165、rs3746166、rs34044728、rs757231、rs1808194)位点在所检测的人群中存在多态性分布,但这9个位点的等位基因和基因型频率在病例组和对照组中的差异没有统计学意义.对9个多态位点进行连锁不平衡分析,发现rs757229、rs757230、rs4588110、rs3746165、rs3746166五个位点连锁,对连锁的SNP构建单倍型后发现,单倍型(rs757229-rs757230-rs4588110-rs3746165-rs3746166:C-G-G-T-A)只在正常对照组中出现,而患者组中没有,该单倍型可能是一种保护性的单倍型.结论 GPx4基因5′-UTR区域的SNPs (rs757228、rs757229、rs757230、rs4588110、rs3746165、rs3746166、rs34044728、rs757231、rs1808194)与寡弱精症男性不育可能不相关,单倍型(rs757229-rs757230-rs4588110-rs3746165-rs3746166:C-G-G-T-A)可能降低男性不育的患病风险.Abstract: Objective To study the association between the single nucleotide polymorphisms (SNPs) of the 5′-untranslated region (5′-UTR) of phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase (GPx4 or PHGPx) gene and oligo- or asthenozoospermic male infertility. Methods The 5′-UTR region of the GPx4 gene was amplified from infertile men and controls using the polymerase chain reaction and was analyzed for polymorphisms by direct sequencing. Results A total of 9 SNPs were present in the cohort, however there were no significant differences in these 9 SNPs between the case and control groups. According to the results of linkage disequilibrium analysis and haplotype construction, one haplotype(rs757229-rs757230-rs4588110-rs3746165-rs3746166: C-G-G-T-A) was present only in the control men, and significant difference was detected(P<0.01). Conclusion The SNPs of 5′-UTR region of the GPx4 gene might not be associated with oligo- or asthenozoospermic male infertility. However, the haplotype (rs757229-rs757230-rs4588110- rs3746165-rs3746166: C-G-G-T-A) might be a protective haplotype. 相似文献
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目的应用生物信息学方法预测两种钩端螺旋体外膜蛋白的表位,结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测LipL32和OmpL1的表位,应用PCR技术合成重组表位基因片段,克隆PCR产物构建重组质粒,测序验证。在BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白。纯化该融合蛋白,免疫BALB/c小鼠,显微镜凝集试验(MAT法)测定抗体效价。结果在LipL32和OmpL1中各预测到2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。PCR合成的重组表位基因序列中没有出现移码和碱基置换。纯化后融合蛋白纯度〉90%。融合蛋白产生的抗体效价为75.79,融合头(运载蛋白)抗体效价为10.62。结论重组表位具有一定免疫原性。为相关蛋白的表位重组和亚单位疫苗等方面的研究打下了良好的基础。 相似文献
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中国四个少数民族九个Y-STR位点基因频率和单倍型研究 总被引:10,自引:1,他引:10
目的 通过对中国满族、维吾尔族、壮族、柯尔克孜族4个少数民族群体共117个男性样本9个Y-STR位点的多态性分析,得到其相关位点的多态信息。方法 对所有样本的9个Y-STR位点进行PCR扩增,产物在ABI PRISM^TM377 DNA Sequencer上进行电泳,结果用Genotyper2.0软件进行分型。计算基因频率、多样性、遗传距离。结果在这9个位点上满族有43个等位基因,32种单倍型;维吾尔族43个等位基因,33种单倍型;柯尔克孜族有31个等位基因,15种单倍型;壮族有34个等位基因,23种单倍型。其中满族和维吾尔族的遗传距离最小,仅为0.02530。而柯尔克孜族和壮族的遗传距离最大,达到了0.34590。结论 4个民族均有较高的单倍型多样性。研究不同民族群体的遗传多样性对了解他们的起源、迁移以及相互关系有重要的意义。 相似文献