固相功能化免疫分子层的制备与形貌表征

抗原与抗体的特异结合 ,主要是基于抗原和抗体分子结构及立体构型的互补 ,以及由多种因素造成二者分子间引力参与下发生的可逆性免疫反应。现行的固相免疫测定中 ,都是依据上述原理而设计 ,其与传统的“液相”血清学试验本质区别是有一个预先将抗原或抗体固相到载体表面的步骤 ,抗原 抗体结合反应由液态环境转移到了固相载体表面进行。因此 ,首先将特定的抗原或抗体吸附于固相上 ,是进行此类分析的前提 ,且后续测定结果的好坏 ,与免疫分子固相化状况密切相关。近年来 ,一些研究者为改善固相免疫分析结果 ,对各种抗原或抗体的固相化进行了较…     

质谱技术对类风湿关节炎患者滑膜免疫复合物差异蛋白质的分析

目的利用质谱技术对类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜中的免疫复合物进行全面的抗原谱分析。方法选取本院3例RA患者和3例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节滑膜,通过蛋白质提取、免疫沉淀、胶内酶解和液相色谱串联质谱系统,对滑膜免疫复合物进行抗原谱分析。用FOT值(fraction of total)评价蛋白质的丰度,通过FOT值的比较筛选出上调蛋白和下调蛋白。用David和String软件对差异蛋白质进行功能富集、相互作用网络和信号通路分析。结果在RA和OA患者的关节滑膜组织免疫复合物中分别鉴定出511和526种蛋白质。通过维恩图比较,仅在RA组出现的蛋白质有170种。RA组有45种蛋白质发生上调,85种蛋白质发生下调。结论热休克蛋白HSP90AA1、HSP70、人类白细胞抗原(HLA)-G、硫氧还蛋白、膜联蛋白A2和玻连蛋白可能通过不同的机制参与RA的发病过程,具有RA新的生物标志物的潜在应用价值。     

人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞外增殖作用的研究

目的 观察人软骨糖蛋白-39( HCgp39)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠淋巴细胞激活的影响,探讨其在类风湿关节炎(RA)发病中的作用.方法 建立CIA大鼠模型,分别在建模1、2、3、4、5、6、7、8周后,分离、培养大鼠脾淋巴细胞,CCK-8法检测HCgp39对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测血浆中抗HCgp39抗体及COMP的分泌水平,分析指标之间相关性.结果 建模2周后,HCgp39抗原特异性T细胞与对照组比较出现明显增殖反应(P均＜0.01),与建模时间、抗HCgp39抗体水平显著正相关,与血管翳和滑膜炎症评分显著负相关.各组抗HCgp39抗体水平和COMP水平较对照组显著增高(P均＜0.01),且抗HCgp39抗体水平与建模时间及COMP呈显著正相关.结论 HCgp39可刺激CIA大鼠脾淋巴细胞的体外异常增殖,初步提示HCgp39抗原短肽在CIA早期及后续的发病过程中可能起着一定作用.     

抗U1RNP/Sm 抗体诱导人淋巴细胞凋亡的研究

研究抗U1 RNP Sm抗体与人淋巴细胞凋亡的关系。方法 :将抗U1 RNP Sm自身抗体与人淋巴细胞共育 ,37℃ 48h后用电镜观察抗体作用细胞凋亡的形态学改变 ;瑞氏 姬姆萨染色观察细胞凋亡率 ,并与流式细胞术进行比较。结果 :电镜观察发现与抗U1 RNP或抗Sm抗体共育后的淋巴细胞发生典型凋亡形态学改变 ,瑞氏 姬姆萨染色计数凋亡率分别为(9.95± 2 .15 ) %和 (15 .72± 3.2 0 ) % ,显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,流式细胞术检测结果与形态学方法相符。DNA电泳出现典型梯状条带。结论 :抗U1 RNP Sm抗体具有诱导淋巴细胞凋亡的能力。     

C3d及荷C3d免疫复合物的测定与意义

用抗人Ｃ３和抗人ＩｇＧγ球蛋白组分作固相反应物，建立了检测补体活化片段Ｃ３ｄ及荷Ｃ３ｄ－ＩＣ的ＥＬＩＳＡ法，并对临床各类疾病患者血清Ｃ３ｄ和Ｃ３ｄ－ＩＣ的水平进行了测定，结果表明：慢性肾炎，ＳＬＥ，慢性乙肝及肺炎患者血清Ｃ３ｄ总体水平均较对照组显著增高，分别有５８．５％～７２．２％的病人Ｃ３ｄ含量高于正常上限（Ｐ〈０．０１），且该类病人亦有较高的Ｃ３ｄ－ＩＣ阳性检出率（肺炎患者例外）本项研究中，Ｃ     

同期行脑室-腹腔分流和颅骨修补术27例临床分析

目的探讨去骨瓣减压术后合并有脑积水的治疗措施,提高此类病人的治疗效果。方法回顾性分析27例有颅骨缺损及脑积水的病人同期行脑室-腹腔分流和颅骨修补术的临床资料。结果 27例患者的临床症状和神经功能障碍均较术前改善,其中出现颅内感染1例,硬膜下出血1例,复查头颅CT见脑室较术前均有缩小,间质水肿消退。结论有颅骨缺损及脑积水的病人在脑室-腹腔分流的同时行颅骨修补术,可减少二次手术带来的风险,降低术后并发症,早期改善患者的神经功能。     

45例SLE患者抗CyP与ENA多肽抗体谱测定结果分析

0　引　　言系统性红斑狼疮 ( SLE)是一种全身性的自身免疫病 ,其血清学异常常表现为产生一系列特异的自身抗体 ,如抗 Sm、抗 ds- DNA、抗 U1- RNP等 ,其中可提取的核抗原 ( ENA)多肽抗体谱的出现在 SLE的发病机制中具有重要作用。近年来 ,国外有学者发现 SLE患者存在有较高水平的亲环素 ( Cy P)自身抗体 ,并与疾病的活动性密切相关 [1]。为探讨 Cy P自身抗体与 ENA多肽抗体间的关系 ,作者以 SLE患者为研究对象 ,对二者进行了测定和比较 ,现报告如下。1　材料与方法1 .1　主要试剂　重组人 Cy PA( rh Cy PA)抗原、辣根过氧化…     

婴幼儿感染金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因研究

目的 调查婴幼儿感染标本分离的金黄色葡萄球菌耐药性与耐药基因携带状况。方法 收集南京市儿童医院2013年10-12月婴幼儿感染标本分离出的金黄色葡萄球菌20株,首先采用K-B法和E-test法做抗菌药物敏感性试验,再用聚合酶链反应(PCR)的方法分析β-内酰胺类药物耐药基因(blaZ、mecA)及大环内酯类药物耐药基因(ermA、ermB、ermC、mphC、msrA)。结果 20株金黄色葡萄球菌对头孢西丁、青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率,分别为50.0%、100.0%、40.0%、40.0%;耐药基因共检出mecA基因11株占55.0%、ermB基因1株占5.0%、ermC基因7株占35.0%;该组菌中17号株对头孢西丁敏感,检出mecA基因,其他菌株头孢西丁药敏结果耐药株均能检出mecA基因,头孢西丁敏感株均未检出mecA基因。结论 mecA、ermB、ermC基因是该组菌对β-内酰胺类和大环内酯类药物耐药的重要原因,对婴幼儿感染标本分离的金黄色葡萄球菌进行β-内酰胺类药物耐药基因(blaZ、mecA)及大环内酯类药物耐药基因(ermA、ermB、ermC、mphC、msrA)检测研究尚为国内首次。     

亲环素及其自身抗体与SLE活动性的相关性探讨

目的：探讨血浆与淋巴细胞内亲环素（ＣｙＰ）水平及抗亲环素自身抗体与全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）活动性的关系。方法：用重组人亲环素（ｒｈＣｙＰ）制备单克隆和多克隆抗体,建立双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法,测定血浆和细胞内ＣｙＰ水平,用ｒｈＣｙＰ包被反应板微孔,建立间接ＥＬＩＳＡ法检测抗ＣｙＰ自身抗体,对活动性和非活动性ＳＬＥ患者进行了观察。结果：ＳＬＥ患者含量分别为（３２３±４２０）μｇ／Ｌ和（２６４０±６５０）μｇ／ｇ蛋白,均显著高于正常对照组的（１６５±８０）μｇ／Ｌ和（２２９０±３８０）μｇ／ｇ蛋白;其中活动性ＳＬＥ患者又显著高于非活动性ＳＬＥ（Ｐ＜０．０５）。ＳＬＥ抗ＣｙＰ自身抗体阳性率（４８％）显著高于正常人（２．５％）,抗ＣｙＰ阳性与皮肤粘膜损害、关节痛、发热、白细胞减少、抗Ｓｍ抗体阳性密切相关。结论：血浆和淋巴细胞内ＣｙＰ升高和抗ＣｙＰ自身抗体阳性可反映ＳＬＥ活动性。     

乙肝患者血清中荷C3d免疫复合物的测定研究

应用ＥＬＩＳＡ法检测乙肝患者血清中荷Ｃｅｄ免疫复合物水平。结果；正常人血清中Ｃｅｄ－ＩＣ为阴性，各型乙肝患者血清中Ｃｅｄ－ＩＣ检出率均显著增高，以肝炎肝硬化、中，重度慢性 炎和慢性重症肝炎尤为显著。提示血清中Ｃ３ｄ－ＩＣ水平与肝脏病变的活动性和严重程度密切相关。