用RP-HPLC法测定爽口灵含漱液中替硝唑的含量

目的建立用反向高效液相色谱法测定爽口灵含漱液中替硝唑含量的方法.方法色谱条件：以甲醇-水-冰醋酸（20：80：0.1）为流动相,康科德C18柱,紫外检测波长310nm;流动相流速为1ml/min.结果得回归方程为A=54 320.0C＋20 325.2（r=0.9999）,线性范围10～50μg/ml,平均回收率98.60%,重复进样RSD=0.60%（n=5）.结论本法用于测定爽口灵含漱液中替硝唑的含量,结果准确、可靠,能满足质量控制的要求.     

医院药房工作质量监控浅谈

药品是防病治病，实现基本医疗的物质基础。药品质量是医疗质量的综合反映指标之一，而药品调剂工作是药品质量体系的终端环节，是医疗机构保证药品质量不容易忽视的重要因素。长期以来，很多医院药房一直缺乏具有指导性的规范、符合工作实际的质量标准来规范调剂质量工作，而加强对药品使用环节的关注，对药品调剂工作实行全面质量监控，     

纳米雄黄的抗小鼠原位乳腺癌作用及其机制

目的：研究纳米雄黄体内体外对小鼠乳腺癌细胞（4T1）的增殖抑制作用及其机制。方法：以萤火虫荧光素酶（Luciferase,Luc）基因标记小鼠4T1乳腺癌（4T1-Luc）细胞,应用噻唑蓝（MTT）比色法和生物发光法（Bioluminescentmethod,BLM）检测细胞增殖活性;细胞形态学及AnnexinV／PI双标记法观察细胞凋亡。4T1-Luc细胞接种雌性BALB／c小鼠乳腺脂肪垫制作原位乳腺癌模型,纳米雄黄（4和8mg·kg-1·d-1）灌胃治疗20d,小动物活体成像系统连续动态观察小鼠乳腺肿瘤生长变化,治疗末期处死动物、剥离肿瘤块称重,并制片HE染色和CD34标记观测肿瘤组织内细胞核分裂像、新生血管形成及坏死改变。结果：MTT法和BLM法检测显示1．56～50gg／mL纳米雄黄体外显著抑制4T1-Luc细胞的增殖（P〈0．05）;形态学观察和AnnexinV／PI染色显示细胞呈现典型的凋亡改变。体内纳米雄黄呈时间和剂量依赖性地抑制小鼠4T1-Luc原位乳腺癌的生长（P〈0．05）;肿瘤组织制片观察,经纳米雄黄治疗后肿瘤组织内细胞核分裂像和微小血管显著减少（P〈0．01）,肿瘤组织内部呈显著的坏死改变。结论：纳米雄黄体外抑制小鼠乳腺癌4TI细胞增殖和诱导细胞凋亡,并主要通过减低原位肿瘤组织内新生血管的形成而导致肿瘤组织坏死而发挥抗乳腺癌作用。     

锰超氧化物岐化酶模拟化合物诱导K562细胞凋亡的机制研究

目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物(mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm)对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法(MTT法)测定细胞增殖活性;Annexin V/PI双标记和细胞形态学法检测细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2和bax基因mRNA的表达水平;流式细胞术(FCM)测定Bcl-2和Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位(Δψm)、细胞色素C(Cyt C)释放和Caspase-3活性变化。结果0.5~10mg·mL-1MnSODm明显抑制K562细胞增殖(P<0.01),Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;bcl-2基因mRNA和蛋白表达下调,bax基因mRNA和蛋白表达上调,线粒体Δψm降低,Cyt C释放增多,Caspase-3活性增强。结论MnSODm调控Bax/Bcl-2表达,通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。     

单纯型线粒体肌病超微结构研究

目的院通过对单纯型线粒体肌病超微结构特征的研究袁探讨该病的病因和可能的发病机制遥方法院对 9例线粒体肌病患者腓肠肌活检组织进行电镜超微病理观察遥结果院发现线粒体数量及形态改变显著袁线粒体数量 增多袁形态各异袁线粒体内类结晶包涵体形态多样遥结论院线粒体内类结晶包涵体可能是线粒体基质内呼吸链中的 不同蛋白质或酶的异常堆积的形态表现袁不同形态的类结晶包涵体代表了不同种蛋白质的堆积或同一种蛋白在 不同条件下的表现遥     

复频高能聚焦超声治疗小鼠泡球蚴病的实验研究

目的研究复频高能聚焦超声治疗昆明小鼠皮下泡球蚴病灶的效果。方法将皮下接种泡球蚴的昆明小鼠随机分为3组,每组10只,分别用不同强度的复频聚焦超声照射小鼠的泡球蚴病灶。对照组(A组)未照射,其他实验组均一次性照射5 min。其中小功率联合照射组(B组)的3个换能器的照射功率为4 W+4 W+5 W,大功率联合照射组(C组)换能器的照射功率为10 W+11 W+10 W。治疗后用透射电镜观察泡球蚴组织的形态结构变化。用美兰染色法观察原头节存活率。用激光共聚焦显微镜观察泡球蚴组织中的线粒体含量。用考马斯亮蓝染色法检测泡球蚴的总蛋白含量。用琥珀酸脱氢酶试剂盒检测泡球蚴的琥珀酸脱氢酶活性。结果复频聚焦超声照射后,透射电镜观察显示,B组和C组泡球蚴生发层细胞减少,线粒体肿胀破裂,内质网扩张,核膜不清,微绒毛变短或消失,且C组较B组损伤更严重。原头节存活率,B组(70.50%)和C组(59.83%)与A组(82.33%)相比,差异有统计学意义(P<0.05),B、C组间差异也有统计学意义(P<0.05)。总蛋白含量和琥珀酸脱氢酶活性,B组(3.07 mg/ml,2.15 U/mg)和C组(2.87 mg/ml,1.87 U/...     

三氧化二砷通过抑制新生血管形成发挥抗小鼠恶性黑色素瘤作用

目的:采用小动物活体成像技术研究三氧化二砷(As2O3)的抗小鼠恶性黑色素瘤作用及其机制。方法:荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记小鼠B16黑色素瘤(B16-Luc)细胞,MTT比色法和Annexin V/PI双标记法分别检测细胞增殖活性及凋亡;BALB/c小鼠腋下接种B16-Luc细胞制备荧光黑色素瘤动物模型,腹腔注射4和8 mg/kg As2O3治疗25天,小动物光学活体成像系统连续动态观察肿瘤生长;治疗末期处死动物、剥离肿瘤块、制片,HE和CD34免疫组化染色观察肿瘤病理和新生微血管形成。结果:1.0~32.0μmol/L As2O3体外显著抑制B16-Luc细胞增殖和诱导其凋亡。活体成像技术观察显示As2O3在体内剂量依赖性地抑制小鼠B16-Luc恶性黑色素瘤的生长,肿瘤组织中新生微小血管显著减少,肿瘤组织中心呈明显坏死改变。结论:As2O3体外诱导小鼠恶性黑色素瘤B16细胞凋亡,主要通过降低肿瘤组织新生血管的形成、促使肿瘤坏死而发挥抗恶性黑色素瘤作用。     

自噬在As_2O_3诱导Burkitt淋巴瘤Raji细胞死亡中的作用及机制研究

目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换;RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时,As2O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2O3对Raji细胞的杀伤效应、降低Raji细胞对As2O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。     

JNK信号通路对葡萄籽提取物抑制Eca-109细胞增殖的调控作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对葡萄籽提取物抑制Eca-109细胞增殖过程的调控作用。方法体外培养Eca-109细胞,用不同浓度葡萄籽提取物、JNK特异性抑制剂SP600125对Eca-109细胞进行处理,应用噻唑蓝比色法检测细胞增殖,倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,annexinV/碘化丙锭双标记观察细胞凋亡;Western印迹检测磷酸化JNK蛋白表达的变化。结果葡萄籽提取物作用于Eca-109细胞后,细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高,具有时间和剂量依赖性,并伴随磷酸化-JNK蛋白水平上调;加入SP600125能下调磷酸化-JNK的水平,显著降低葡萄籽提取物对Eca-109细胞的增殖抑制率和凋亡率。结论 JNK信号通路参与葡萄籽提取物抑制Eca-109细胞增殖过程的调控,抑制JNK活性可降低葡萄籽提取物对Eca-109细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用。     

白藜芦醇通过Fas-线粒体双途径诱导U-87脑胶质瘤细胞凋亡

目的研究白藜芦醇（Res）对人脑胶质瘤细胞系U-87细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法以人脑胶质瘤细胞系U-87细胞为靶细胞,应用四氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖活性;AnnexinV/碘化丙啶（PI）双标记和细胞形态学法检测U-87细胞凋亡;流式细胞仪（FCM）检测细胞Fas蛋白表达水平、线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞色素C（Cytc）释放和Caspase-3活性变化。结果Res明显抑制U-87细胞的增殖,呈浓度及时间依赖性（P〈0.01）;20μmol/L和40μmol/LRes处理U-87细胞,AnnexinV/PI染色显示凋亡细胞明显增多,细胞凋亡率分别为42.57%和62%,同时细胞出现典型的凋亡形态改变;FCM检测显示Fas蛋白表达增高1.6～2.2倍,线粒体Δψm降低15%～63%,胞浆Cytc含量增加2.5～7.3倍,Caspase-3被激活,活性增高25%～112%。结论Res体外明显抑制U-87细胞的增殖,通过Fas-线粒体双途径诱导U-87细胞凋亡。