基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨毛果鱼藤提取物抗痛风作用及机制

目的 通过网络药理学分析结合体内、外实验验证,探究毛果鱼藤对痛风的改善作用及机制。方法 利用数据库获取毛果鱼藤的化学成分及其候选靶标,通过蛋白质互作和网络分析,筛选毛果鱼藤治疗痛风的关键网络靶标和潜在活性成分,并进行生物功能富集及通路分析;小鼠腹腔注射次黄嘌呤复制高尿酸血症模型,观察毛果鱼藤醇提取物对高尿酸血症及正常小鼠尿酸水平的影响;大鼠足跖注射微晶型尿酸钠结晶,复制痛风性炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物对痛风性炎症的影响;二甲苯诱导急性炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物的抗炎作用;热板法、扭体法观察毛果鱼藤的镇痛作用。脂多糖诱导RAW264.7细胞复制体外炎症模型,观察毛果鱼藤醇提物对相关信号通路的影响。结果 通过构建毛果鱼藤-成分-痛风疾病靶点网络及分子对接分析,获得毛果鱼藤治疗痛风的12个关键网络靶标和15个潜在活性成分,发现其可以通过大黄素、白桦脂酸、美迪紫檀素等成分作用于Toll样受体4（TLR4）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）、核转录因子-κB（NF-κB）等靶点发挥抗高尿酸血症、抗炎、镇痛等作用。与正常组比较,模型组小鼠血清尿酸水平显著增高（P<0.01）、大鼠肿胀度显著增高（P<0.05,P<0.01）、小鼠耳廓肿胀度降低（P<0.05）、小鼠扭体次数显著减少（P<0.05,P<0.01）、小鼠热板痛阈显著提高（P<0.05）,细胞中TLR4 mRNA水平、TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及细胞上清中TLR-4、NF-κB水平显著升高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较,毛果鱼藤醇提物（20、10、5 g·kg^-1）可以显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平（P<0.01）,抑制大鼠足跖肿胀（P<0.05,P<0.01）,降低细胞中TLR4 mRNA水平,降低细胞中TLR4、NF-κB、NLRP3的蛋白表达及降低细胞上清中TLR4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、NF-κB、白细胞介素-6（IL-6）的水平（P<0.05,P<0.01）。结论 毛果鱼藤醇提物具有明显的抗痛风作用,作用机制可能与其对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响有关。