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骨保护素的克隆及对骨髓间充质干细胞分化的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:克隆人骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)基因并构建其重组腺病毒,观察其对BMSCs分化的影响.方法:RT-PCR方法从人肝克隆OPG基因全长cDNA,利用穿梭质粒将OPG基因重组获得复制缺陷型重组腺病毒AdOPG;分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鉴定BMSCs对OPG的表达.比色测定和细胞碱性磷酸酶染色法观察AdOPG感染BMSCs后5 d时碱性磷酸酶(ALP)的表达.结果:克隆获得人OPG基因,测序与Gene bank一致,构建的重组腺病毒AdOPG滴度达109 efu/ml,AdOPG感染BMSCs 5 d后ALP活性值为(21 024±507)IU,AdGFP对照组为(3 079±89)IU,空白对照组为(2 156±78)IU.结论:骨保护素有利于骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化. 相似文献
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目的探讨关节镜在微创治疗胫骨平台骨折术中应用的方法及意义。方法应用关节镜辅助下治疗有手术指征的胫骨平台骨折患者38例,按Schatzker分类法:Ⅰ型10例、Ⅱ型12例、Ⅲ型8例、Ⅳ型3例、Ⅴ型3例、Ⅵ型2例,按照骨折的不同类型和损伤程度,采用关节镜监视下有限切开复位,可吸收螺钉、空心螺钉或钢板内固定,关节镜下处理半月板损伤,合并交叉韧带损伤病人,二期修复前后交叉韧带。术后3天开始功能锻炼,术后6周支具保护下负重训练。结果 38例应用关节镜技术治疗的患者全部得到随访,随访8~52个月,平均15.5个月。根据Rasmussen膝关节功能评分标准(总分30分,膝关节活动功能0~6分)[1],35例优良;2例SchatzkerⅤ型、1例Ⅵ型患者术后出现活动受限,总体效果满意。骨折愈合时间快,功能恢复时间早、恢复好。结论关节镜下辅助治疗胫骨平台骨折可同时处理关节内合并伤、具有手术创伤小,并发症少、疗效肯定等优点。 相似文献
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经皮椎体成形术(percutaneous vertebroplasty,PVP)及后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)目前广泛地应用于骨质疏松压缩性脊柱骨折中,但对于骨折累及椎管、椎体后壁有破裂甚至占位的爆裂性骨折,该技术曾一度被视为绝对手术禁忌。而中老年患者常发生骨质疏松性椎体爆裂骨折(osteoporotic vertebral burst fractures,OVBF)。他们是否如同骨质疏松性压缩性骨折(osteoporotic vertebral compression fractures,OVCF)患者那样从PVP和PKP手术中获益这个问题,促使越来越多的国内外学者开始研究、探讨,希望评价该技术在OVBF患者中的风险与受益。本文主要综述近十多年来该技术在OVBF中应用的疗效和安全性。 相似文献
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目的:克隆人骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)基因并构建其重组腺病毒,观察其对BMSCs分化的影响.方法:RT-PCR方法从人肝克隆OPG基因全长cDNA,利用穿梭质粒将OPG基因重组获得复制缺陷型重组腺病毒AdOPG;分离培养兔骨髓间充质干细胞,使用AdOPG感染兔BMSCs,以RT-PCR及Western Blot的方法鉴定BMSCs对OPG的表达。比色测定和细胞碱性磷酸酶染色法观察AdOPG感染BMSCs后5d时碱性磷酸酶(AIJP)的表达。结果:克隆获得人OPG基因,测序与Genebank一致,构建的重组腺病毒AdOPG滴度达10^9 efu/ml,AdOPG感染BMSCs5d后ALP活性值为(21024±507)IU,AdGFP对照组为(3079±89)IU,空白对照组为(2156±78)IU。结论:骨保护素有利于骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化。 相似文献
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目的:探讨骨活素胶囊对骨质疏松性骨折愈合的影响.方法:8~12月龄雌性新西兰大耳兔卵巢去势法10周得到Ⅰ型骨质疏松模型,再行桡骨骨折造模,从而建立骨质疏松性骨折模型.模型建立后随机分为2组,实验组和对照组分别给予含1g/(kg·d)骨活素胶囊的生理盐水和淀粉糊5ml灌胃,在2、4、8周随机选取动物行影像学、血液生化指标、HE染色、增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)免疫组化和生物力学检测.结果:骨活素干预的实验组动物较对照组骨痂、骨小梁形成增多增快,骨痂力学强度增强.结论:骨活素胶囊能使骨质疏松性骨折的愈合时间缩短,强度增强. 相似文献
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目的:构建LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)的真核表达质粒,并在兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)内表达,研究LMP-1对体外培养BMSCs成骨分化的影响。方法:RT-PCR克隆hLMP-1和骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2),并构建pIRES2-EGFP-LMP-1及pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒。分离培养BMSCs,脂质体介导下将pIRES2-EGFP-LMP-1、pIRES2-EGFP-BMP-2和pIRES2-EGFP质粒转染BMSCs。7 d后收集细胞,RT-PCR比较hLMP-1、hBMP-2及Ⅰ型胶原的表达,检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,免疫组化染色比较骨钙素表达。结果:pIRES2-EGFP-LMP-1和pIRES2-EGFP-BMP-2重组质粒构建成功。重组质粒成功转染BMSCs,RT-PCR证实表达目的基因,hLMP-1和hBMP-2转染组可以明显促进细胞分泌ALP的活性,诱导Ⅰ型胶原和骨钙素的表达。结论:LMP-1可以促进BMSCs向成骨细胞分化。 相似文献
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骨形态发生蛋白(BMP)具有多种生物学功能,BMP-9是骨骼系统已知BMP家族中成骨活性最强的成员之一,其骨诱导活性不会受到免疫反应的较大抑制,故也是该家族中唯一能在有免疫能力的动物体内显著诱导骨形成的成员.目前研究证实,动物模型中BMP-9可有效地修复骨缺损和诱导脊柱融合,此外对神经系统、肝脏等骨外器官和组织也具有生物学作用. 相似文献