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宋晓婧彭亚婷陈海燕郑跃许庆芳龚子鉴陆春赖维 《中华皮肤科杂志》2017,(12):869-874
目的 研究miRNA?29(miR?29)家族对人慢性光损伤(光老化)皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响。方法 将人皮肤成纤维细胞分为未照射组和慢性光损伤组,后者给予长波紫外线(UVA)连续照射以构建慢性光损伤细胞模型,并用流式细胞仪及β半乳糖苷酶染色法验证模型。Western印迹检测两组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT?PCR)检测miR?29家族3个成员(miR?29a?3p、miR?29b?3p和miR?29c?3p)在两组细胞中的表达,选择表达具有显著差异的miR?29c?3p进行功能试验。将人皮肤成纤维细胞分为4组,分别采用荧光标记的miRNA?29c?3p模拟物(过表达组)、抑制物(抑制组)及二者各自的对照RNA寡核苷酸(阴性对照组和抑制对照组)转染各组细胞,观察各组荧光细胞比例,qRT?PCR法检测各组miR?29c?3p的相对表达量,判定干扰效率。采用qRT?PCR法检测转染后4组COL1A1和COL3A1 mRNA水平,Western印迹法检测转染后Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达水平。结果 与未照射组相比,慢性光损伤组衰老染色细胞阳性率显著升高(36.47% ± 3.20%比12.56% ± 1.46%,P 〈 0.01),G1期细胞比例明显升高,S期细胞比例明显降低(均P 〈 0.01),慢性光损伤模型成功建立。慢性光损伤组Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达(0.40 ± 0.19和0.52 ± 0.10)明显低于未照射组(1.00 ± 0.12和1.00 ± 0.10,均P 〈 0.01),而miR?29c?3p(4.42 ± 2.05)明显高于未照射组(0.89 ± 0.10,P 〈 0.05),两组间miR?29a?3p和miR?29b?3p表达水平差异无统计学意义(均P 〉 0.05)。转染后24 h,过表达组和抑制组的转染效率均大于90%,达到干预要求。过表达组miR?29c?3p的表达(224.17 ± 2.00)明显高于阴性对照组(2.45 ± 0.34),而抑制组(0.20 ± 0.08)明显低于抑制对照组(2.24 ± 0.14),干扰模型构建成功。评价转染效率显示,过表达组COL1A1和COL3A1 mRNA和Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平均明显低于阴性对照组和抑制组(均P 〈 0.05),而抑制组明显高于抑制对照组(均P 〈 0.01)。结论 miR?29c?3p在慢性光损伤皮肤成纤维细胞中表达上调,可能通过调控COL1A1、COL3A1的表达影响Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成。 相似文献
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目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)及受体在皮脂腺细胞系SZ95细胞的表达。方法采用RT-PCR法检测SZ95细胞中PEDF及受体的mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测PEDF及受体蛋白的表达,同时免疫荧光法定位其在SZ95细胞中的表达情况。使用不同浓度双氢睾酮(DHT)作为刺激因子作用于SZ95细胞,实时定量PCR (qPCR)和免疫印迹法检测PEDF mRNA和蛋白水平变化。结果 RT-PCR发现PEDF及受体在SZ95细胞中均有表达,蛋白免疫印迹发现PEDF及受体蛋白质相对分子质量分别为50KD和55KD。PEDF主要表达在细胞浆内,PEDF受体主要表达在胞膜上。10μmol/L和100μmol/L DHT作用48h后,SZ95细胞PEDF mRNA和蛋白水平明显降低。结论在mRNA及蛋白质水平,SZ95细胞均表达PEDF及受体,雄激素可降低SZ95细胞PEDF表达。 相似文献
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目的研究乳腺癌HER2蛋白表达阳性的基因状态及其与P53蛋白相关性,探讨其与乳腺癌发生、发展的内在关系。方法选取257例HER2蛋白表达阳性的浸润性乳腺癌样本,分别应用荧光原位杂交(FISH)法和免疫组织化学EliVisionTMplus法对标本中的HER2基因和P53蛋白、ER和PR受体进行检测并做相关性分析。结果①HER2基因扩增率64.59%(166/257);其中IHC(2+)56.48%(109/193),(3+)89.06%(57/64);HER2基因扩增和其蛋白阳性表达比较有显著相关性(P〈0.01)。②P53蛋白表达率52.92%(136/257),P53蛋白表达率、HER2基因扩增率与ER、PR受体表达及腋窝淋巴结转移差异有显著性(P〈0.05);与肿瘤大小、病理学类型、年龄无统计学意义(P〉0.05)。结论HER2基因扩增率与P53蛋白表达率呈正相关,两者指标的联合检测对乳腺癌的转移、预后评估具有重要的参考意义。 相似文献
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微小RNA(miRNA)是一类长度为20~24个核苷酸的内源性、保守的非编码RNA分子。变态反应性皮肤病是一种较常见的自身免疫病,在全球每年发病率较高,死亡率也逐渐上升,并影响患者生活质量,但其发病机制尚不明确。目前研究发现miRNA在细胞、组织和血液的异常表达与许多变态反应性皮肤病的发生发展有关,并认为miRNA可能成为变态反应性皮肤病早期诊断、预后评估的非侵入性生物标志物和治疗靶点。本文总结了近年来国内外关于miRNA与变态反应性皮肤病关系的研究进展。 相似文献
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目的 探讨miR-186-5p对人皮肤成纤维细胞衰老的影响及其机制.方法 采用实时定量PCR方法检测miR-186-5p的表达,应用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色、CCK-8和EdU等方法研究miR-186-5p对人真皮成纤维细胞(HDFs)衰老的作用.通过生物信息学分析、荧光素酶报告试验、实时定量PC... 相似文献
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目的探讨RAD51基因G135C多态性与肺癌发病风险、病理特点及p53基因突变的相关性。方法选择80例肺癌患者为病例组,40例非肿瘤肺疾病患者为对照组。以PCR-RFLP技术检测病例组和对照组的RAD51基因型,比较不同基因型与肺癌危险性以及肺癌病理特点的关系;并采用免疫组化法对病例组进行p53突变的检测。结果 (1)RAD51基因型G/G、G/C和C/C在病例组的分布频率分别为77.5%、15.0%和1.3%,在对照组的分布频率分别为92.5%、7.5%和0。与携带G/G的个体相比,携带RAD51变异基因型(G/C和C/C)的个体具有更高的患癌风险(P<0.05);(2)RAD51基因型与肺癌的病理学类型及组织学分级无相关性;(3)RAD51 G135C基因型在不同p53基因突变状态肺癌中的分布频率差异无显著性(P>0.05)。结论 RAD51基因多态性与肺癌发病风险有关,携带RAD51变异基因型(G/C和C/C)的个体易患肺癌。 相似文献
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目的 评价65岁及以上农村老年人的膳食质量。方法 于2023年2—3月,采取方便抽样方法,选取泸州市某乡镇454名65岁及以上的农村老年人,膳食调查采用半定量食物频率问卷,以面对面访谈方式收集问卷信息。使用膳食平衡指数-16评价其膳食质量。结果 该地区老年人群膳食中度和高度失衡人数占比79.7%;膳食摄入不足和摄入过量同时存在。谷薯类和畜禽肉类食物平均每日摄入量为356.7 g和76.2 g。水果、奶类和鱼虾摄入每日平均摄入量分别为22.8 g、36 g和3.7 g,仅为推荐量的10%。此外,食物多样性程度也比较低,平均每日摄入的食物种类大多数为5~8种,仅有4.6%的老年人达到8种以上。该地区农村老年人存在一定程度的摄入不足、严重摄入不足、一定程度的摄入过量以及摄入不足和摄入过量等7种膳食模式。其中主要以严重摄入不足模式和一定程度摄入不足和较高程度摄入过量模式为主,占总人数的72.3%。结论 2023年泸州市农村65岁及以上老年人存在膳食失衡较为严重,蔬菜、水果和奶类以及水产品和蛋类的摄入不足的比例较高,畜禽肉类和谷薯类摄入过量。 相似文献
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介绍应用东贵荣教授针刺五脏俞理论治疗临床各科疾病的临床经验。东贵荣教授认为中风病多为本虚标实之证,在本为气血衰少、脏腑亏虚,在标为风火相煽,痰瘀阻滞脉络。故治疗应从本论治,补脏腑之虚。五脏俞穴位于膀胱经,与五脏六腑关系密切,因此,采用针刺五脏俞穴的方法,通过五脏根本上调节气血津液,从而达到治疗中风之目的。失眠病作为一种情志病,与脑的功能有关,更主要与五脏功能有关,脑与五脏之间存在相互依存,相互为用的关系,脑虽对五脏及全身具有主宰作用,但脑功能正常发挥必须靠五脏、六腑濡养、温煦、推动作用,五脏功能的太过或不及均可影响脑的功能而致病。病邪致五脏神之太过或不及为失眠病的病因病机,故五脏诸神之病当取五脏背俞穴治疗。顽固性面瘫病为临床疑难杂症,主要表现为面肌痉挛及面肌倒错,病情缠绵难愈,心主神明,其华在面,其充在血脉;肝其充在筋,开窍于目。调心俞能宽胸里气,通络安神,以荣面肌;肝俞能熄风止痉补益肝血,腰阳关能主一身之阳气。痿病主要指症状表现为肢体筋脉迟缓,软弱无力,不能随意运动的一组神经系统疾病的统称,根据《素问·痿论篇》中的五痿及肺主皮毛、心主血脉、肝主筋、脾主肌、肾主骨中医理论提出取五脏俞治疗痿病。 相似文献