热休克蛋白家族成员及其与恶性肿瘤发生发展的关系

热休克蛋白(HSPs)是机体受各种应激原刺激后产生的一组应激蛋白,又称热应激蛋白.生理状态时HSPs可协助多肽或蛋白质的正确转位、折叠和装配,起"分子伴侣"的作用.近年来,HSPs与肿瘤发生、发展的关系引起了学者们的广泛关注.现将HSPs与在肿瘤发生、发展关系的研究进展综述如下.     

生物芯片技术在临床多种病毒检测中的新进展

生物芯片(Biochip)又称微阵列(Microarray)技术,是近年来生命科学与微电子学等学科相互交叉发展起来的一门高新技术,其在临床多种病毒检测中的应用越来越多,近几年来更是取得了突破性进展,显示出诱人的应用前景.     

重组人成骨蛋白-1的纯化及其生物学活性研究

目的 获得高纯度的重组人成骨蛋白-1（rhOP-1）,探讨大肠杆菌表达rhOP-1的生物学活性。方法 表达rhOP-1工程菌经发酵后,裂菌、提取包涵体,层析法纯化蛋白并逐步降低尿素浓度透析复性。采用改良MTT法检测rhOP-1对NIH3T3细胞增殖和对硝基苯酚法（PNPP）检测rhOP-1对细胞碱性磷酸酶（ALP）活性的影响,同时在体内通过小鼠肌袋埋植实验测定rhOP-1活性。结果 经纯化的rhOP-1纯度可达98％。体外rhOP-1浓度在0．06～6μg／ml可明显促进细胞生长和ALP活性;体内rhOP-1埋植剂植入小鼠肌间隙2周后,可明显提高体内钙含量,且成骨趋势明显。结论 原核表达的rhOP-1具有良好的生物学活性。     

江西省永新县芦溪乡卫生院2010年住院疾病与费用构成情况调查

目的调查2010年江西省永新县芦溪乡镇卫生院住院疾病构成及费用情况,了解当地疾病负担,为进一步研究提供基线数据。方法收集2010年该院住院病例资料,根据国际疾病分类编码(ICD-10)对出院记录的第一诊断进行疾病标化和系统归类,运用EXCEL 2003和SPSS 13.0等统计软件整理分析住院患者一般情况,出院诊断、医疗费用及使用基本药物情况等。结果①2010年芦溪乡院住院病例925人次,男女性别比为0.8;②住院系统疾病可分为17类,占ICD-10标准分类的81%;③前5类疾病依次为呼吸、消化、损伤中毒和外因、循环及泌尿生殖系统疾患,累计占82.27%;④前15位单病种依次为上呼吸道感染、骨折、慢性阻塞性肺病、慢性胃肠炎、脑血管病、泌尿系结石、类风湿性关节炎、椎间盘疾患、胆囊结石伴胆囊炎、心脏病、生殖器官疾病、损伤和中毒、肺炎、高血压及消化性溃疡;⑤上呼吸道感染和肺炎患者年龄均主要集中于≥65岁和<5岁;除了泌尿系结石和消化性溃疡外,其余8种慢性病患者的年龄均主要集中在≥65岁;⑥前15种单病种中,慢性病患者平均住院日及次均住院费用低于急性病(4.8天vs.11.6天;439.1元vs.666.9元);⑦芦溪乡镇卫生院住院费用虽逐年增加,但仍远低于全国乡院平均水平(542.3元vs.1 004.6元)。结论①2010年芦溪乡镇卫生院住院病例前3位系统疾病是呼吸、消化及损伤和中毒,其中前2种系统疾病均为女性多于男性;急性病多集中于感染和骨折。②前15位单病种中除类风湿性关节炎、胆囊结石伴胆囊炎、心脏病、生殖器官疾病和消化性溃疡外,其余10种单病种与四川永安乡院基本相同。③呼吸系统、损伤和中毒以急性病为主;消化、循环、泌尿生殖及肌肉骨骼和结缔组织系统以慢性病为主。④急慢性病在35岁以后年龄段患者呈显著增加趋势,且女性多于男性;≤15岁和≥35岁急性病患者的疾病负担均较重。⑤上呼吸道感染和肺炎患者均主要集中于老年人和儿童。⑥与甘肃新添乡院(基本型)相比,芦溪乡院骨折患者平均住院日长(43.7天vs.9天),次均住院费用高(1 948.0元vs.1 646.3元),疾病负担重(8.11%vs.4.85%)。⑦急性病患者平均住院日远高于四川永安(小康型)和甘肃新添(基本型)乡院(11.6天vs.3.7天、6.2天),但次均住院费用却远低于两院(666.9天vs.850.4元、906.85元)。     

浙江省萧山区衙前镇卫生院2008～2010年住院病例构成情况调查

目的调查浙江省萧山区衙前镇卫生院2008～2010年住院疾病构成情况,了解当地疾病负担,为进一步研究提供基线数据。方法采用问卷调查结合专题访谈,收集2008～2010年住院病例资料。根据国际疾病分类编码(ICD-10)标化出院记录第一诊断并系统归类。用Microso Excel 2003和SPSS 13.0等统计软件整理分析住院患者出院诊断。结果①衙前镇卫生院2008～2010年住院病例分别为182、195和248人次;②住院系统疾病共9～14类,占ICD-10标准分类的47.6%～66.7%;③前6类系统疾病为循环、损伤、消化、呼吸、肿瘤及泌尿生殖系统疾病,累计构成比37.37%～75.39%;④该3年前15位单病种相同疾病有高血压、大隐静脉曲张、包皮过长、肺癌、骨折、浅表损伤、急性阑尾炎和腹股沟疝8种;⑤2008年慢性病构成比大于急性病,2009～2010年急性病构成比大于慢性病。结论①浙江省萧山区衙前镇卫生院2008～2010年住院病例主要系统疾病依次是循环、损伤、消化、呼吸、肿瘤及泌尿生殖系统疾病,2010年新增妊娠、分娩和产褥期疾病;急性病较多且集中于骨折和损伤,慢性病集中于高血压。②该3年前15位单病种中相同疾病有8种,提示住院患者常见病种较稳定。③今后应重点关注慢病管理、妇女保健及特色专科建设。     

Blast-病毒物种鉴定的新方法

采集自愿献血员中56份HCV-Ab阳性血样，常规分离血清。应用RT-nPCR对HGV-NS3区进行核酸扩增，PCR扩增产物与PMD18-T载体连接，转染DH5d工程菌株，挑选白色菌落，经内套PCR验证克隆阳性者，以碱裂解法提取质粒DNA，应用荧光染料Bignye标记、Sanger双脱氧末端终止法进行重组DNA的核酸序列测定。将测得的核酸序列，经国际互联网络输入到NCBI的GenBank数据库的局部序列相似形查询(Blast)的查询框中，借助于GenBank数据库中的资料和计算机分析程序中的BlastN软件，与数据库中所有已知的核酸序列进行序列同源性比对搜索分析。     

多重PCR归化法平行检测HBV和HCV的研究

目的：建立一种多重PCR归化法并应用于对HBV、HCV平行检测。方法：利用PCR反应5′端允许添加非互补序列的原理，运用内外两对引物，经过2轮扩增，使目的产物均带上共有序列，再以共有序列为引物进行扩增，实现多重扩增。比较和筛选四种核酸提取方法。运用正交优化法，优化并确定最佳扩增条件。对28份血标本进行对比试验，并进行质量评价。结果：归化多重PCR方法对于HBV、HCV病毒合并感染患者的诊断敏感性为83.5%，诊断特异性为70.0%，诊断指数为153．3％，诊断效率为72．2％；对HBsAg阳性患者的HBV DNA的诊断敏感性为78．6％，诊断特异性为80．0％，诊断指数为158．6％，诊断效率为79．2％。对抗－HCV阳性患者的HCV RNA的诊断敏感性为75．0％，诊断特异性为90．0％，诊断指数为165．0％，诊断效率为83．3％。结论：多重PCR归化法在多基因扩增或多种病原体的同时平行检测领域具有较大应用潜力。该方法实用、准确、可靠，对HBV HCV的防治具有实际意义。     

丁型肝炎病毒核酶反式切割HBV mRNA片段的实验研究

目的　探讨反式作用丁型肝炎病毒 (HDV)核酶体外切割乙型肝炎病毒 (HBV)mRNA片段的可行性。方法　将化学合成的核酶cDNA克隆到含有T7启动子的载体PGEM 4Z中。利用体外转录技术转录出核酶及底物 ,研究其体外切割活性。利用E H作图法进行核酶的酶促动力学研究。结果　在体外实验中显示两酶均能成功的将底物切割 ,37℃温浴 90min的切割百分率为 5 0 %和5 1%。利用E H作图法进行的酶促动力学研究中求得Rc1、Rc2的Km值分别为 0 6 1μmol L、0 5 8μmol L,Kcat值分别为 :0 6 4·min 1 、0 6 0·min 1 。结论　反式作用HDV核酶对非HDV底物 HBVmRNA片段的成功切割为寻找新的HBV的反义抑制手段开辟了途径。     

量子中医学、中医学、西医学的异同

中医学基于中国文化背景源于两千多年前的中国,其哲学观为有机、辨证唯物主义,以取象思维为主,方法为思辨;西医学基于古希腊文化背景源于400多年前的欧洲,其哲学观为机械唯物主义,以逻辑思维为主,方法为还原分析;量子中医学是中医现代化研究的成果,用量子理论等现代理论转化中医理论而成,其哲学观为有机、辩证唯物主义,以逻辑思维为主,方法为还原分析、综合。中医学的支撑学科为中国古哲学,西医学的支撑学科为经典物理、化学等近代科学学科,量子中医学的支撑学科为量子理论等现代科学学科。中医学诊断以定性为主,西医学和量子中医学诊断以定量为主。中医学和量子中医学以天然中药、针灸等治疗方法为主,主要是调整机体状态治未病;西医学以化学药物、手术等治疗方法为主,主要是直接控制逆施性对抗疗法,治已病。认识三者之间的差异,寻求三者的共同点和可以交融的契合点,对医学研究、临床诊治及医学的发展具有重要的现实意义。     

利用寡核苷酸芯片检测乙型肝炎病毒基因突变

目的　利用寡核苷酸芯片平行分析乙肝病毒表面抗原区S、前核心抗原pre C区、X区、聚合酶P区 12个已知的突变位点。方法　针对S、pre C、X、P区的 12个突变位点 ,设计位于乙肝病毒反义链的 2 4条寡核苷酸探针和两对PCR引物 ,探针长度为 14～ 18bp ,其 5′端连有氨基己烷和T15间隔子 ,合成后经点样仪点到醛基化玻片上。两对PCR引物分别用于扩增S与P区内的 5个突变位点和X、前C区内的 7个突变位点 ,其中上游引物含有荧光标记。不对称PCR扩增所得到的荧光标记的单链DNA与寡核苷酸阵列杂交、清洗后经扫描分析实验结果。结果　在对 12个乙肝阳性样品前核心抗原C和X区的突变检测中 ,存在 176 2A→T ,176 4G→A联合突变的有 2例、1896G→A突变的 3例、同时存在 176 2A→T、176 4G→A联合突变和 1896G→A突变的 1例、未存在任何突变的样品 6例。在 12个乙肝阳性样品的表面抗原S的突变检测中 ,未发现有突变出现。部分样品的随机测序结果与寡核苷酸阵列杂交结果一致。结论　寡核苷酸芯片适于快速、平行、大量检测突变