女孩雌激素受体基因6号内含子区域两个新SNPs位点报道

目的：在女性性早熟患儿中检测雌激素受体基因6号外显子及内含子基因序列可能存在的突变。方法：PCR扩增雌激素受体基因6号外显子及内含子，对扩增产物进行DNA序列分析。结果：在6号内含子一侧，发现两个100％连锁的单核苷酸多态性(SNPs)，分别为．53G—67A和53T—67G。结论：这一对单核苷酸多态性并不引起氨基酸的替代，与女孩性早熟的发生也无关，但是否和其他疾病有连锁关系尚待进一步探讨。     

结肠镜在小肠大出血手术中的应用体会

目的 探讨结肠镜在不明原因小肠大出血手术中的应用价值。方法 对17例不明原因的小肠大出血患者，术中行全小肠结肠镜检查，结合快速冰冻切片，明确出血部位和原因，给予相应外科处理。结果 全组17例患者均明确了出血原因和部位，十二指肠球部以下至屈氏韧带出血5例，空回肠出血12例；病理检查小肠恶性肿瘤4例，小肠良性疾病13例；行小肠壁部分切除术2例，部分小肠切除吻合术11例，根治性小肠切除吻合术4例。全组无手术死亡病例，随访1年无术后复发出血。结论 术中结肠镜检查对不明原因小肠出血诊断快捷、确切，尤其适用于不允许进行较长时间、较复杂检查的小肠出血患者。     

四氢大麻酚镇痛及加强电针镇痛的实验研究

本工作拟观察四氢大麻酚(△9-THC)与针刺联合应用的镇痛作用，能否既减少前的用量，避免剧烈的降低血压等付反应，又可以加强镇痛，延长镇痛时间，并对四氢大麻酚加强电针镇痛的机制，作初步的探讨。     

表达Cys548雌激素受体突变型cDNA的真核载体构建及其促转录活性分析

目的 考察一个548位点C→T单核苷酸突变的雌激素受体(ER)在体外条件下,对乳腺癌细胞株(MCF-7)信号通路的影响,以探讨ER单核苷酸突变引起非雌激素依赖性性早熟的可能机制.方法 用重叠延伸PCR定点诱变技术对548位点的碱基进行定点突变.构建定点突变表达载体pSG5-MuER.构建含雌激素受体反应元件(ERE)的萤光素酶报告基因载体pGL3-ERE-Luc.将野生和突变ER质粒分别和pGL3-ERE-Luc共转染MCF-7细胞,观察萤光素酶的变化,以检测突变ER反应活性的变化.结果 成功构建ER突变质粒psG5-MuER和ER报告质粒pGL3-ERE-Luc,psG5-MuER较pSG5-ER能够增加萤光素酶的产生.结论 该突变雌激素受体在体外具有高促转录活性特征,构建的载体可用于进行进一步的相关研究.     

紫外线照射对腺病毒气溶胶活力和粒级分布的影响

目的 研究紫外线照射对腺病毒气溶胶活力和粒级分布的影响.方法 在2000L的腔室中通过TK-3微生物气溶胶发生器将绿色荧光蛋白(GFP)标记的腺病毒形成气溶胶,暴露在预先设定波长的紫外线下,用多级撞击式空气微生物采样器进行采样.对采样样品进行实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测基因组拷贝数.通过在荧光显微镜下计数带绿色荧光的PK15细胞数可直观检测病毒的感染力及活力.结果 带有绿色荧光的PK15细胞数及FQ-PCR检测结果均提示所采集的病毒气溶胶主要分布在第6级.波长为254 nm的紫外线照射5 min时,在显微镜下观察到的荧光数明显减少.波长为254 nm紫外线照射30 min时,6个级别的细胞内均未见绿色荧光.波为365 nm紫外线照射30 min时,绿色荧光数仍较多.波长为254 nm的紫外线照射30 min时没有观察到有绿色荧光的细胞,但是FQ-PCR结果提示病毒基因组拷贝数仍较高.结论 波长为254 nm的紫外线比365 nm的紫外线照射灭活腺病毒气溶胶的效果更显著.两种波长的紫外线照射对腺病毒气溶胶的粒级分布没有显著影响.病毒基因组的存在并不能代表病毒有感染力.     

动力髋螺钉内固定治疗股骨粗隆间骨折

股骨粗隆间骨折临床十分常见，过去治疗多为股骨髁上骨钉牵引或手术治疗(鹅头钉内固定)等．治疗结果往往不尽人意。本院自1998年6月至2004年5月共收治股骨粗隆问骨折患者25例，行动力髋螺钉(dynamic hip screw．DHS)内固定手术治疗，疗效满意。报告如下。     

研究者发起的临床研究项目实施过程质量评估流程的探讨

近年来我国研究者发起的临床研究(ⅡT)项目数量快速增长,对ⅡT项目规范化实施提出了全新要求。本研究在国内外临床研究法规框架下,结合ⅡT项目实施过程质量评估工作实践探索了一套基本流程,主要包括质量评估前准备、项目组自评估、中心化核查、现场核查、撰写报告、综合评估,为提高ⅡT项目质量提供参考和借鉴。     

红色荧光蛋白变种mCherry的表达、纯化和应用探讨

目的 应用pET表达系统原核表达红色荧光蛋白变种mCherry,分析重组mCherry表达与荧光变化的关系,为其纯化及作为原核报告系统应用提供依据.方法 根据GenBank中收录的mCherry氨基酸序列合成其编码基因,构建pET-mCherry表达质粒,转化入大肠埃希菌BL21 (DE3)表达宿主.在不同诱导时间点,考察菌株荧光强度、mCherry表达量、培养上清液mCherry泄漏情况.诱导10h后提取重组mCherry,利用荧光强度估算提取收率,并通过凝胶电泳分析提取液的蛋白纯度.结果 成功构建pET-mCherry表达载体,并在BL21(DE3)中得到高效诱导表达.荧光检出滞后于mCherry的表达,随诱导时间延长重组mCherry不断泄漏至培养液中.初步提取的重组mCherry纯度达到95％以上.结论 应用pET表达系统可高效表达mCherry,过表达mCherry可泄漏至胞外,方便其纯化.mCherry作为原核报告系统应用时,合理的诱导时间可能是关键影响因素.     

基底节区血肿致脑疝134例治疗体会

目的 探讨血肿清除加去骨瓣减压治疗高血压基底节区血肿致脑疝的疗效.方法 选择134例高血压基底节区血肿患者,评估术前脑疝状态、术后病死率及ADL评分、GOS评分.结果 134例患者中96例生存＞0.5 a,随访3～37个月,55例神经功能预后良好.结论 高血压基底节区血肿出现脑疝后行血肿清除及去骨瓣减压治疗,可以提高生存率,降低病死率,改善神经功能状况,早发现早治疗,是提高预后的前提.