聚乙烯亚胺/DNA复合物处方工艺优化及体外转染效率

目的： 考察聚乙烯亚胺（PEI）相对分子质量、氮磷比（N/P比）、溶剂、离子强度等对PEI/DNA复合物形成、表面性质以及细胞转染效率的影响。 方法： 制备不同相对分子质量PEI/DNA复合物,通过凝胶电泳和紫外吸收检测确定PEI与DNA的复合能力（N/P比）,测定不同溶剂、离子强度下的粒径和Zeta电位,考察复合物在HepG2细胞中的转染情况。 结果： PEI与DNA的复合能力与PEI的相对分子质量呈正相关,不同溶剂、离子强度会影响复合物的表面性质,以磷酸盐缓冲液（PBS）为溶剂、PEI（25 kD）为载体、N/P比为12～15时,PEI/DNA复合物细胞转染效率明显优于质粒DNA,仅略低于阳性对照组。 结论： 经优化的PEI/DNA复合物可显著提高DNA在细胞中的转染效率。     

聚乙烯亚胺-DNA复合物的形成和聚集行为研究

聚乙烯亚胺 (polyethyleneimine,PEI) 是一种优良的非病毒基因传输载体材料,本文对PEI/DNA复合物粒子的形成机制进行了初步探讨,电泳阻滞实验和紫外测定实验表明, 复合物的形成过程中存在着某种过渡状态即珠串样结构,透射电镜的结果提供了相应的例证。此外通过离子强度实验,作者认为在PEI与DNA的复合过程尽管以静电作用为主要作用力,同时也可能存在着其他类型的非静电作用力。PEI/DNA复合物粒子的表面电荷随着N/P的增加逐步增加,但由于DNA的分子质量较大,在N/P为8和12时表面电荷的绝对值较小,容易聚集成葡萄串样聚集体,离子强度实验表明该聚集过程的支配作用力可能是疏水作用力。EI/DNA复合物在N/P为12时的细胞转染效果与阳性对照组相当,表明聚集的PEI/DNA复合物也具有一定的细胞转染能力。