新型肝炎病毒研究进展

继人类发现甲、乙、丙、丁、戊(A、B、C、D、E)5型致肝炎病毒后,仍有一些输血后或散发的肝炎不属于上述5型肝炎病毒感染,此类不明原因的非甲-戊型肝炎约占肝炎发病的10～20％,不少临床研究表明可能存在另外的致肝炎病毒,这些临床指征包括血清转氨酶(ALT)升高,无原因的急、慢性肝炎和暴发性肝炎等。 1995年初,美国Genelabs的Kim等首先报道发现了一种输血后肝炎致病病毒,称之为     

不同浓度邻苯二脓底物在ELISA检测HBsAg中的比较实验

在检测乙型肝炎 HBsAg 的 ELISA 试验中,底物 OPD 的浓度对其实验结果的影响因素尚未见详细报道.临检工作观察到不同浓度的 OPD 对实验结果有一定影响,尤其是OD 值在临界值附近影响会更大。为此,本文选择四种不同浓度的 OPD 进行一系列比较实验,为 OPD 浓度的优化提供数据,以此达到提高 ELISA 实验的灵敏度和准确性。实验材料:检测 HBsAg 用 ELISA 试剂盒由北京科卫试剂厂提供,HBsAg 临界值质控血清由卫生部临检中心提供,批号:952,底物 OPD 浓度设0.4mg/ml;0.8mg/ml;     

双特异性抗体对LAK细胞增殖和细胞毒作用影响的体外研究

将抗ＣＤ３与抗ＨＢｓ的单克隆抗体经化学偶联得到双特异性抗体，观察该双特异性抗体对ＬＡＫ细胞增殖和增强细胞毒性的作用。结果显示双特异性抗体显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；促进淋巴细胞增殖。１２５Ｉ－ＵｄＲ释放试验检测发现双特异性抗体增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性且与抗体浓度呈正相关。进一步对抗体的特异性研究表明，加入双特异性抗体后ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞毒性作用显著高于对照组。     

单克隆抗体在自身免疫和免疫缺陷中的应用

人类T细胞的基因编码相当复杂。不但包括识别特异性抗原和执行独特的效应功能,而且还有免疫调节功能。因此,在可溶性或细胞表面抗原及包括PHA和Con-A等多克隆激活剂的应答中T细胞得以增殖(Chess等,1974 a.b)。它们在细胞介导的淋巴细胞溶解作用中     

慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗前PBMC细胞因子的研究

目的 研究准备抗病毒治疗的慢性丙型肝炎患者的免疫特点.方法 将30例慢性丙型肝炎患者和10例正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-12、IFN-γ和TNF-α的浓度.结果 (1)慢性丙型肝炎患者PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P＜0.05),没有检测到IL-2、IL-4、IL-12的基础分泌.(2)不同病情患者间的细胞因子的分泌水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性丙型肝炎患者体内TH2型细胞因子的分泌占优势.提示通过调整TH1/TH2失衡可能达到抗病毒治疗目的.     

Antigenicity of the HCV HVR1 Peptide Analyzed by Computer Modeling

It is important to develop the HCV vaccines in China, be cause 11% 14% of patients with acute and choric hepati tis in this country are infected by HCV, and most of themare infected with Ⅱ/1b and Ⅲ/2a[1]. There are evi dences to indicate that a high variable region 1 (HVR1)exists in the terminal of E2 protein and contains some lin ear epitopes of B cells. Anti HCV antibodies can protectthe sensitive cells from infection by HCV[2 4]. We in tended to get some evidences for designing so…     

粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子与HBsAg融合蛋白基因的 …

目的 研究粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）的免疫活性。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增出粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）３８４ｂｐ的基因片段及ＨＢｓＡｇ８４６ｂｐ基因片段，扩增产物经柱纯化后，由Ｔ４ＤＮＡ酶连结因子１２３０ｂｐ的片段，将此片段命名为ＬＧＨ，克隆到ｐＵＣ１９质粒中，利用菌落ＰＣＲ法快速筛选阳性克隆及限制酶切鉴定片段的大小。结果 该基因全长１２３０ｂｐ，经     

实验性肝纤维化逆转过程中基质金属蛋白酶表达的动态研究

探讨基质金属蛋白酶在实验性肝纤维化逆转过程中的表达及意义。建立大鼠实验性四氯化碳中毒性肝纤维化模型,采用核酸原位杂交和免疫组化法检测实验性肝纤维化自然逆转过程中MMP-13、MMP-2、MT—MMP2的来源细胞、时序和量的变化。MMP-13、MMP-2、MT—MMP2在间质细胞和部分肝细胞表达,MMP-13先维持在一定水平,然后逐渐减弱;MMP-2、MT—MMP2先增强后减弱。肝脏间质细胞是基质金属蛋白酶的主要来源细胞,MMP-13、MMP-2、MT—MMP2表达与肝纤维化程度相关,在肝纤维化逆转过程中起重要作用。     

特布他林联合布地奈德治疗小儿哮喘对炎性细胞因子的影响及其遗传因素分析

目的：探讨特布他林联合布地奈德治疗小儿哮喘时对炎性细胞因子的影响,以及小儿哮喘的相关遗传危险因素。方法：选取2015年2月至2017年2月于我院接受诊治的小儿支气管哮喘46例,随机分为研究组（特布他林联合布地奈德治疗）和对照组（布地奈德治疗）各23例,观察治疗前后炎性细胞因子的变化。采用问卷调查收集患儿相关疾病史及家族史,并进行相关基因检测,分析小儿哮喘的遗传危险因素。结果：研究组血清IL-4、IL-5、IL-17水平低于对照组（P<0.05）,IFN-γ水平与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。哮喘患儿中有家族史的占69.57%;一级亲属存在过敏性疾病有21例（91.30%）,二级亲属中存在过敏性疾病有8例（53.33%）,差异有统计学意义（P<0.05）。哮喘患儿ORMDL3基因中rs7216389位点TT基因型频率最高（59.38%）,而TC、CC基因型频率分别为25.00%、15.62%。结论：特布他林联合布地奈德治疗小儿哮喘可降低炎性细胞因子水平,有利于控制气管炎症反应,提高治疗效果。存在哮喘家族史、过敏性疾病家族史以及ORMDL3基因rs7216389-TT的表达系哮喘遗传的危险因素     

SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

目的克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒（sARSCoV）N蛋白的DNA,构建原核表达质粒pGEX-2T／N,并诱导表达。方法采用RT-PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段。将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌中表达融合蛋白。用表达产物与抗SARS-CoV抗体阳性血清做Western blot。结果获得N基因片段;GST-N融合蛋白以可溶形式表达;Western blot检测表明,其与抗SARS-CoV抗体阳性血清的反应呈阳性。结论成功地构建原核表达质粒pGEX-2T／N,并表达GST-N融合蛋白,为下一步的研究奠定了基础。