2型大麻受体的克隆及真核表达体系的构建

目的 克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株.方法 利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体(Anti-Flag)和CB2多克隆抗体(Anti-CB2)同时检测质粒的表达.结果 酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功,Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能检测Flag-hCB2蛋白.结论 成功克隆hCB2基因,并获得稳定表达细胞株,同时证实Anti-CB2多克隆抗体有效.     

52例甲型H1N1流感轻症患者居家隔离治疗效果调查分析

目的探讨甲型H1N1流感轻症患者采取正确居家隔离措施对家庭继发感染的影响。方法对52例确诊为甲型H1N1流感感染的轻症患者居家隔离7d的结果进行问卷调查分析。结果 86.54%的患者经指导并能严格按照隔离措施进行隔离,未发生家庭感染;13.46%的患者未经指导,并且未严格执行隔离措施,继发家庭感染2例。结论提高公民自觉隔离意识,加强共公健康管理体制建设,进行系统的隔离管理和指导是减少甲型H1N1流感感染率的关键。     

高龄患者菌血症病原菌分布及与医院感染的关系探讨

目的 探讨高龄患者血液感染的病原菌种类的分布及其与医院感染的关系.方法 对医院两年来老年住院患者中196例菌血症患者的血培养阳性菌进行分类鉴定,并鉴别其与医院感染的关系.结果 在分离的204株细菌中,革兰阴性菌、革兰阳性菌及真菌分别占25.49%、67.16%和7.35%;革兰阴性菌中以大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为主;革兰阳性菌中以人葡萄球菌占优势,表皮葡萄球菌其次;真菌以近平滑假丝酵母菌为主;其基础疾病以肺部感染和各系统恶性肿瘤为主;血培养阳性196例患者中,发现125例患者合并医院感染,以肺部感染患者为主(78.23%).结论 机会致病菌,尤其革兰阳性菌是导致高龄患者发生菌血症的主要病原;恶性肿瘤和呼吸系统疾病患者易发生菌血症和并发医院感染,是治疗重点关注对象.     

老年患者泌尿系统感染的菌群分布及耐药性分析

目的 调查老年患者泌尿系统感染致病菌的菌群分布及耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用法国生物梅里埃公司VITEK2-COMPACT微生物自动鉴定与药敏系统,对医院1年来>70岁泌尿系感染住院患者,尿培养所得细菌进行鉴定及药敏检测.结果 由尿液标本中共分离致病菌319株,273株细菌中革兰阴性菌198株,以铜绿假单胞菌(27.27%)和大肠埃希菌(15.99%)为主;革兰阳性菌75株,以屎肠球菌(13.17%)和粪肠球菌(5.64%)为主,凝固酶阴性的葡萄球菌只占少数;真菌46株,以白色假丝酵母菌为主(6.27%);药敏检测发现,铜绿假单胞菌和大肠埃希菌对青霉素类,一～三代头孢菌素类,喹诺酮类抗菌药物均表现出高耐药性;粪肠球菌对氨苄西林非常敏感(100.00%),而屎肠球菌对其耐药(97.62%),另外屎肠球菌对喹诺酮类药物、克林霉素、红霉素100.00%耐药,而对利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀、四环素耐药率分别为4.76%、11.90%、21.40%;粪肠球菌对克林霉素100.00%耐药,对其他大多数药物的敏感性都比较高.结论 老年患者泌尿系统感染病原菌耐药情况较为严重,在临床上应严格掌握抗菌药物的适应证,合理使用抗菌药物,避免多重感染和医院感染.     

小檗碱增强K562/DOX细胞对多柔比星敏感性的研究

 目的 探讨小檗碱增强耐药K562/DOX细胞对化疗药多柔比星的敏感性的作用。方法 四甲基偶氮唑蓝法检测小檗碱的细胞毒性及其对多柔比星抗肿瘤活性的增强作用;高内涵活细胞成像系统检测无毒剂量小檗碱作用后,多柔比星在K562/DOX细胞内的蓄积量;PI/Hoechst33342双染法检测小檗碱对多柔比星诱导的K562/DOX细胞凋亡的影响;罗丹明123蓄积实验检测小檗碱对P-糖蛋白外排功能的影响。结果 1 μmol·L^-1为小檗碱的无毒剂量,在此无毒剂量下,小檗碱使多柔比星对K562/DOX细胞的IC₅₀降低了1.5倍;1 μmol·L^-1小檗碱可使多柔比星在K562/DOX细胞内的蓄积量增加,增强多柔比星诱导的K562/DOX细胞凋亡, 增加K562/DOX细胞内罗丹明123的蓄积量,从而抑制P-糖蛋白的外排功能。结论 小檗碱可通过抑制K562/DOX细胞膜上P-糖蛋白的外排功能,增加K562/DOX细胞内多柔比星浓度,促进多柔比星对耐药细胞的诱导凋亡作用,逆转K562/DOX细胞的多药耐药性。     

应用压电基因传感器芯片检测结核分枝杆菌DNA

目的 由结核分枝杆菌引起的医院感染快速诊断问题已为越来越多的研究者所重视，压电基因传感器芯片技术主要依据晶体液相振荡理论，运用压电传感器与基因芯片技术结合，对标本中靶基因进行检测。方法 使用压电基因传感器芯片技术检测结核分枝杆菌ＤＮＡ。先以结核分枝杆菌ＤＮＡ探针结合在基因芯片表现，然后将１０６例结核患者标本ＤＮＡ分别与之杂交，将杂交信号通过数频处理器以频率变化值的形式输入电脑，再以专用分析软件进行结果分析。结果 检测阳性率为４２．５％，以ＰＣＲ扩增法及涂片法对相同标本进行检测，阳性率分别为３６．８％和１７．０％，同时对压电基因传感器芯片技术的特异性及灵敏度进行检测。结论 实验结果表明压电基因传感器芯片技术是一种比ＰＣＲ扩增法更简便、快速的结核分枝杆菌检测方法。     

加味玉女煎治疗急性牙周脓肿的临床观察

目的观察加味玉女煎治疗急性牙周脓肿的临床疗效。方法将96例牙周脓肿患者随机分为2组,2组均采用牙周基础治疗,术后对照组予以甲硝唑和布洛芬口服,试验组予以加味玉女煎含漱兼口服。观察并比较2组治疗前后各项牙周指标与中医证候积分以及不良反应,并评估临床疗效。结果试验组总有效率为95.83%,明显高于对照组的72.92%(P0.05)。试验组不良反应发生率较对照组低(P0.05)。在牙周指标上2组治疗后均较治疗前明显降低,试验组改善优于对照组(P0.05)。对照组除口臭、舌红苔黄两项证候外其他证候均得到改善(P0.05),而试验组的各项证候均得到改善(P0.05),且改善优于对照组(P0.05)。结论牙周基础治疗后予加味玉女煎含漱并口服治疗急性牙周脓肿,可以改善牙周情况,有效缓解牙龈肿痛,疗效显著。     

糖尿病小鼠主动脉及血浆中血管细胞黏附分子-1和脂质过氧化水平的变化及意义

目的探讨主动脉及血浆中血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）及脂质过氧化水平与糖尿病心血管病变的关系。方法采用Ins2^Akita糖尿病小鼠模型的主动脉及血浆为标本,以Western blot法和免疫组织化学法检测主动脉VCAM-1蛋白表达情况,以ELISA检测血浆中VCAM-1的表达水平,以脂质过氧化反应试剂盒检测小鼠主动脉及血浆中脂质过氧化物的水平。结果与对照小鼠相比较,糖尿病小鼠主动脉及血浆中VCAM-1蛋白表达水平及脂质过氧化物水平均明显升高（P〈0．05）。结论主动脉和血浆中VCAM-1蛋白表达水平增高及脂质过氧化反应增强可能是糖尿病小鼠出现血管功能异常的重要原因。     

内源性大麻素2-AG促进HSP70基因的热应激表达

目的 探讨内源性大麻素对热应激反应是否存在调控作用,及其可能的受体调控机制.方法 以不同浓度(10-7、10-6、10-5mol/L)内源性大麻素2-AG(2-Arachidonylglycerol)预处理大鼠胶质瘤C6细胞1 h,热刺激(42℃水浴)1 h,通过RT-PCR及Western blot检测热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的mRNA及蛋白表达水平;同时观察特异性受体拮抗剂AM251或AM630的拮抗效应,探讨信号通路机制.结果 内源性大麻素2-AG可显著促进热刺激处理的C6细胞HSP70基因及蛋白的表达,该调控效应由CB1介导.结论 一定浓度的内源性大麻素2-AG对热刺激处理的C6细胞内HSP70基因的表达有明显促进效应,表明2-AG对细胞热应激反应可能具有一定的调控能力;同时,在C6细胞内,该调控效应主要由CB1介导.     

药根碱诱导白血病K562细胞凋亡的研究

 目的 研究药根碱对白血病K562细胞的生长抑制及凋亡作用,探讨药根碱诱导K562细胞凋亡的可能途径。方法 采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测药根碱对K562细胞的生长抑制作用;吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染法、碘化丙啶(PI)染色法观察药根碱对K562细胞凋亡的诱导作用;利用活细胞高内涵成像系统检测细胞内线粒体膜电位以及氧自由基的变化。结果 药根碱可明显抑制K562细胞的生长(IC₅₀ = 90 μmol·L-1 )。AO/EB染色可明显看到凋亡细胞和死亡细胞。PI染色显示,药根碱使K562细胞周期阻滞在G₀/G₁期。活细胞高内涵成像系统检测结果显示,37、75、150 μmol·L-1 药根碱作用后,细胞内活性氧荧光强度由1 305.1±15.3上升为26 243.6±165.3、30 106.7±153.2、34 682.6±174.1,线粒体膜电位由1 025.3±20.1下降为484.6±10.2、202.9±6.3、153.1±5.3。结论 药根碱能明显抑制白血病K562细胞生长,促进K562细胞凋亡,且其可通过增加细胞内活性氧、降低线粒体膜电位这一线粒体信号传导通路来诱导K562细胞凋亡。