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目的:采用磁微粒分离酶联免疫荧光(MEIF)分析技术建立一种简便、高敏感性、定量检测人血清胰岛素(insulin)的新方法.方法:选用2株识别人胰岛素不同表位的单克隆抗体(mAb).一株mAb用异硫氰酸荧光素(FITC)标记, 另一株用碱性磷酸酶(AP)标记;偶联羊抗FITC抗体的磁珠用作固相分离载体, 4-甲基磷酸伞型酮用作荧光底物.结果:成功建立了定量检测人血清胰岛素的MEIF, 灵敏度2.0 μIu/mL, 线形范围0~188.52 μIu/mL, 批内变异系数(CV)为4.3%~5.2%, 批间CV为2.6%~9.5%, 稀释回收率为93%~117%, 加标回收率为94%~113%.实际样品的测定结果与倍爱康公司商品化人insulin磁分离发光系统检测试剂盒的检测结果比较, 具有良好的相关性.结论:MEIF定量测定人insulin方法成本低、灵敏度高、稳定性好, 在临床免疫检测领域具有广阔的应用前景. 相似文献
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反相高效液相色谱法测定微乳凝胶剂中鬼臼毒素的含量* 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立测定鬼臼毒素微乳凝胶剂中鬼臼毒素含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(63:37)为流动相,流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长为292 nm。结果:鬼臼毒素在200~800μg·mL~(-1)范围内呈良好的线性关系,r=0.999 9。平均回收率为99.6%,RSD为0.6%;精密度与溶液稳定性RSD分别为0.2%和0.2%。结论:方法快速,重现性、精密度及准确度均能满足鬼臼毒素含量测定要求。 相似文献
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雷公藤甲素聚乳酸纳米粒对大鼠睾丸组织的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 观察采用聚乳酸纳米粒能否减轻雷公藤甲素的大鼠睾丸毒性。方法 雄性Wistar大鼠分别ig 0 .2及 0 .6mg·kg- 1雷公藤甲素 (非纳米粒组 )及其聚乳酸纳米粒混悬液 (纳米粒组 ) ,连续给药 15d ,以ig生理盐水的大鼠为对照组 ,测定睾丸的脏器系数及其组织匀浆液中酸性磷酸酶 (ACP)活性和果糖含量 ,光镜观察睾丸组织的病理学变化。结果在 0 .6mg·kg- 1剂量下 ,非纳米粒组睾丸ACP活性和果糖的含量均明显低于纳米粒组 (P <0 .0 5 )。光镜观察显示 ,雷公藤甲素 0 .6mg·kg- 1可引起大鼠睾丸的损伤 ,非纳米粒组引起的病变程度明显重于纳米粒组 ,主要表现为睾丸萎缩 ,各级生精细胞变性、坏死、数量减少或消失 ,出现了多核巨细胞。结论以聚乳酸作为药物载体的纳米体系 ,可明显减轻雷公藤甲素对睾丸的毒性 相似文献
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目的由于单一载体材料包封药物,易于形成高度结晶的颗粒将药物排出晶格,使传统SLN载药量和包封率较低,为此本实验室运用固、液态复合载体材料制备了包载药物雷公藤内酯醇的新型SLN。方法运用4种包封率测定方法对雷公藤内酯醇在7种载体材料中的包封性能进行考察,结合微观分析手段TEM(透射电子显微镜)和AFM(原子力显微镜)以及激光粒度(LD)和Zeta电位对新型SLN物化性能进行表征。结果发现以液体状态存在的三辛酸甘油酯对药物的包封能力较好,拥有混合载体材料结构Compritol ATO 888对雷公藤内酯醇的包封率亦较高,而运用上述2种复合载体材料制备的雷公藤内酯醇新型SLN更获得高达93%的包封率。TEM和AFM形貌观察,颗粒呈球状,比较规则,平均粒径102 nm,Zeta电位低于-25mV,冰箱长期留样研究表明系统比较稳定。结论最终选择Compritol ATO 888和三辛酸甘油酯作为复合载体材料制备雷公藤内酯醇新型SLN载体系统。 相似文献
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雷公藤片对小鼠睾丸组织的毒性作用及其分子机制研究 总被引:18,自引:1,他引:18
目的:探讨雷公藤片对小鼠睾丸组织毒性作用及其分子机制.方法:成熟雄性小鼠,分别于每天上午10:00左右灌胃给予雷公藤片105 mg/kg(含雷公藤甲素40 μg/kg),于给药4周后观察精子畸形率;HE染色,光镜观察睾丸组织的形态学变化;免疫组化法观察睾丸组织iNOS、eNOS和凋亡相关基因Fas-L、Bcl-2和Bax的表达;原位杂交观察睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结果:给药4周后,与正常对照组相比,给药组精子畸形率明显升高(P<0.05);组织形态学检查可见给药组小鼠睾丸生精小管内初级精母细胞和精子明显减少,生精细胞排列紊乱,精原细胞和支持细胞也有所减少;与正常对照组相比,给药组睾丸组织iNOS表达无明显改变,eNOS的表达明显下调;凋亡相关基因Fas-L和Bax的表达明显上调,而Bcl-2的表达无显著差异;雷公藤可明显抑制睾丸组织核转录因子NFκB的表达.结论:雷公藤长期毒性主要表现为对生殖系统的毒性作用,其毒性可能与核转录因子NFκB表达的过度抑制,引起睾丸组织凋亡相关基因表达上调,导致睾丸组织凋亡有关,提示预防睾丸组织凋亡将有助于降低雷公藤的生殖毒性. 相似文献
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灯盏花素磷脂复合物改善大鼠小肠吸收的研究 总被引:16,自引:1,他引:16
目的研究灯盏花素磷脂复合物对灯盏花素实验性小肠吸收的改善作用。方法采用大鼠在体小肠循环法和离体外翻肠囊法研究灯盏花素普通粉剂和灯盏花素磷脂复合物的小肠吸收及肠壁通透性。结果大鼠在体小肠吸收实验中,灯盏花素磷脂复合物单位吸收量和单位吸收率分别提高7375%和4711%,肠壁通透性增加7313%;离体小肠吸收实验中,灯盏花素磷脂复合物单位吸收量和单位吸收率分别提高4121%和30%,肠壁通透性增加3935%;在0~100μg·mL-1内,吸收符合Fick’s扩散定律,表现出一级动力学过程。结论灯盏花素磷脂复合物主要以被动扩散的方式吸收,并通过提高肠壁通透性来改善其吸收。 相似文献
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目的 建立金刚藤中薯蓣皂苷元的测定方法。方法 采用RP-HPLC测定薯蓣皂苷元的含量,色谱柱为Lichrospher C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇,检测波长为210nm,峰面积外标法定量。采用正交设计,考察发酵时间(A)、水解时间(B)、硫酸浓度(C)3个因素对薯蓣皂苷水解的影响。结果 薯蓣皂苷元在50~350μg·mL-1内具有良好的线性关系(r=0.9991,n=7) ,平均回收率为99.97%,RSD=0.85%(n=5 )。采用发酵72h后用浓度为5%的硫酸水解6h,可使金刚藤中薯蓣皂苷水解完全。结论 RP-HPLC是一个简便、快速、分离效果好、精密度高、准确度好的测定金刚藤中薯蓣皂苷元的方法。发酵对水解产率影响显著。 相似文献
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