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目的克隆人HMGB1 A-box的cDNA,构建高效稳定的大肠杆菌(E.coli)表达菌株并对其诱导表达纯化,同时探讨其对间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)的促分化作用。方法根据优选合成的HMGB1基因序列设计引物,PCR扩增目的基因片段,插入克隆载体pGEM-T并进行序列测定。重组克隆载体经BamHⅠ和XhoⅠ酶切,琼脂糖凝胶电泳分离目的基因,插入含His标签的表达载体pET24a。将构建的质粒转染BL21大肠杆菌,经IPTG诱导后,SDS-PAGE观察表达量。HIS-link层析柱纯化重组人HMGB1 A-box,蛋白印迹鉴定重组蛋白。将重组蛋白加入hBMSC培养体系中培养一周后,碱性磷酸酶染色检测其促MSC成骨分化作用。结果经RT-PCR扩增得到了261 bp的DNA片段,经测序分析,与GenBank中报道的已知序列完全一致,构建了含融合蛋白的重组表达质粒。经诱导后细菌高表达A-box,表达量为总蛋白的45%。经层析柱纯化后,蛋白印迹证实目的蛋白为高纯度的A-box。将A-box加入MSC培养体系中培养后,细胞活性无明显改变,但细胞碱性磷酸酶表达明显增高。结论成功构建了重组人HMGB1 A Box的表达载体,纯化的重组蛋白能有效促进MSC向成骨细胞分化。 相似文献
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本研究旨在探讨人骨髓间充质干细胞(hBMMSC)对受γ射线照射小鼠造血恢复的影响。亚致死剂量(6Gy)60Co-γ射线全身照射雌性BALb/c小鼠,静脉输注不同剂量(1×105,1×106和5×106)的hBMMSC,观察注射后小鼠血常规指标、骨髓造血祖细胞集落量以及血清人TPO,SCF和G-CSF水平等动态变化。结果表明:hBMMSC输注对亚致死量照射小鼠早期死亡率无影响;与对照组比较,接受细胞治疗小鼠早期血象水平无显著增高,但在第28天外周血白细胞、红细胞、血小板计数和血红蛋白水平高于对照组,尤以大剂量组明显(P值均小于0.05);在中剂量和大剂量hBMMSC组小鼠骨髓中,单个核细胞集落形成单位总数和粒单系集落形成单位数均高于对照组(P<0.05);hBMMSC输注后第2天,ELISA法检测可在细胞治疗组小鼠血清中检测到人G-CSF和SCF,以hBMMSC高剂量组G-CSF含量为最高(P<0.01)。所有各组未检测到人TPO,治疗后第9和16天所有各组血清中均未检测到人G-CSF和SCF。结论:hBMMSC输注可加速放射损伤小鼠造血功能的恢复,其机制可能与细胞短暂分泌相关造血细胞调控因子有关。 相似文献
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新生儿窒息是造成新生儿死亡和致残的重要原因之一,窒息新生儿死亡率为无窒息儿的45倍[1],而窒息的复苏则是减少新生儿死亡率和致残串的关键。我院不断改进复苏方法,以ABCDE方案作为有效的适宜技术应用于临床,取得了满意的效果,现报道如下。1资料与方法1.1资料选择1996年7月~1997年7月我院产科分娩的全部新生儿窒息病例47例为ABCDE复苏的处理组,随机抽取1994年7月~1995年7月分娩的全部新生儿窒息病例62例作为对照组,分析所记录的Apgar评分,复苏的具体措施,对比观察窒息复苏的临… 相似文献
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目的:探讨Ang-1 rs2507800、SOD2 rs4880及SOD3 rs1799895多态性与中国东北地区汉族妇女子痫前期(PE)是否存在关联。方法:采用飞行时间质谱对181例PE患者(病例组)及203例健康孕妇(对照组)的上述3个位点进行分型,分型结果采用SPSS12.0软件进行统计分析。结果:病例组与对照组rs2507800、rs4880、rs1799895等位基因频率和基因型频率均无统计学差异(P0.05)。对rs2507800、rs4880分别在显性、隐性模型下进行分析,两组仍无统计学差异(P0.05)。结论:rs2507800、rs4880、rs1799895多态性与PE不相关。 相似文献
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产妇23岁.第一胎,孕35周+5,阴道流水11 h,以先兆早产于1999年3月5日11时30分急诊入院.产妇平素月经周期15~30天,量中,末次月经19 98年6月28日,预产期1999年4月5日.早孕反应轻,孕1+月出现阴道流血1次,少于月经量 ,色暗红.给予黄体酮保胎治疗后阴道流血止.孕5+月自感胎动至今.入院检查:一般情况好,T 36.7℃,P 86次/分,R 19次/分,BP 112.5/75.0 mmHg.产科检查:宫高 31 cm,腹围9 4 cm,胎位LOA,胎心140次/分,骨盆外测量正常.检查时见阴道流水,色清,伴有胎脂, 相似文献
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目的 探讨胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)位点rs1898671、rs2289278,rs2289276及rs764916基因多态性与妊娠妇女子痫前期发生的相关性。方法 收集2012年11月至2013年6月中国医科大学附属盛京医院分娩的孕妇384例。其中病例组181例,对照组203例,病例组又分为子痫前期轻度组(97例)和子痫前期重度组(84例)。选取TSLP4个位点(rs1898671,rs2289276, rs2289278 and rs764916),利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析该基因的4个位点。结果 各临床资料在病例组与对照组比较中差异均有统计学意义(P<0.05),子痫前期轻度组与对照组比较中除年龄外其他各临床资料比较,差异均有统计学意义(P<0.05),子痫前期重度组与对照组以及子痫前期轻度组比较中各临床资料差异均有统计学意义(P<0.05)。位点rs1898671等位基因频率在病例组与对照组中差异有统计学意义(P=0.043, OR=2.682, 95% CI 1.020~7.054)。结论 TSLP位点rs1898671基因多态性与子痫前期的发病可能具有相关性。等位基因T为子痫前期的危险性等位基因。 相似文献
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目的研究腕踝针配合康复训练和单纯康复训练治疗偏瘫肩痛的临床疗效。方法将中风偏瘫后肩痛患者60例随机分为治疗组30例,对照组30例。治疗组采用腕踝针配合康复训练,对照组采用康复训练。10 d为一疗程,休息3 d后开始下一疗程,2个疗程后观察临床疗效并进行评价。结果治疗后治疗组显效率为66.7%,好转率26.7%,总有效率为93.3%,对照组显效率为33.3%,好转率为40%,总有效率为73.3%。治疗组在减轻疼痛,增加上肢运动功能方面明显优于对照组(P〈0.01)。结论腕踝针配合康复训练和单纯康复训练都对偏瘫肩痛有良好的治疗效果,但腕踝针配合康复训练的疗效明显优于单纯康复训练的疗效。 相似文献
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