乙型肝炎病毒前S1抗原化学发光免疫检测方法的建立及初步临床应用

目的建立乙肝病毒前S1抗原（PreSl-Ag）化学发光免疫检测方法,并分析其临床应用价值。方法采用PreSlAg单抗包被微孔板,以辣根过氧化物酶标记的抗乙肝病毒表面抗原的抗体为二抗,结合鲁米诺化学发光底物系统,建立PreSlAg的化学发光免疫检测方法。研制PreSl-Ag诊断试剂企业参考品,并用于分析所建立方法的特异性、灵敏度、稳定性和精密性等试剂性能。所建立方法与市售的PreSl-Ag诊断试剂盒同时比对检测临床血清样本126份,比较检测结果。结果检测结果表明试剂性能符合企业参考品质量标准。批内变异系数6．5％-8．1％、批间变异系数13．2％;试剂盒置37℃考核3d,其稳定性良好。临床样本比对检测结果表明,两种方法相关性良好（阴性符合率96．0％、阳性符合率100％,总符合率为97．6％,Kappa值为0．951,一致性强度为最强）。结论成功建讧了快速、特异、敏感和稳定的PreSlAg化学发光免疫检测方法,适合临床检验推广应用。     

结核性胸腔积液蛋白质组学初步研究

目的本实验利用二维凝胶电泳-肽质量指纹谱的蛋白质组学方法,对结核性、恶性和漏出性胸腔积液的相关蛋白质二维凝胶电泳（2-DE）图谱识别、鉴定,寻求结核性胸腔积液的特异蛋白质及其对临床诊断的意义。方法收集我院2010年5月～2011年6月收治的符合要求的胸腔积液患者50例,其中结核性胸腔积液20例,恶性胸腔积液17例,漏出性胸腔积液13例。利用二维凝胶电泳分离技术,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析到相应的肽质量指纹谱（PMF）,最后借助Mascot软件结合NCBInr数据库进行检索鉴定相关结构蛋白质。结果通过对结核性、恶性和漏出性胸腔积液的蛋白质肽质量指纹图比较、分析发现3个存在明显差异蛋白,它们分别是：C1-抑制蛋白、甲状腺三级结构A链和补体C3b。C1-抑制蛋白在结核性胸腔积液高表达,在恶性胸腔积液中低表达。甲状腺素三级结构A链和补体C3b在恶性腔积液中高表达,在漏出液中低表达。结论利用二维凝胶电泳技术和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对胸腔积液进行蛋白质组学研究,得到结核性、恶性和漏出性胸腔积液的蛋白质图谱,获得差异蛋白质,为结核性胸腔积液的鉴别诊断提供新的思路和方法。