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1.
背景:自杀基因独有的旁观者效应,可显著提供肿瘤细胞杀伤效果,同时还与放射治疗、免疫基因治疗联合应用,并克服了基因转导效率低的缺陷。胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)即可产生强大的旁观者效应。
目的:观察脂质体介导真核表达载体CD基因转染鼠骨髓间充质干细胞的效果及其基因表达。
设计、时间及地点:细胞学基因水平实验,于2007-05/12在大连理工大学干细胞与组织工程研发中心完成。
材料:SPF级C57BL纯系小鼠6只,由大连医科大学实验动物中心提供。连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α由大连理工大学干细胞与组织工程研发中心提供。LipofectamineTM 2000脂质体为Invitrogen产品。
方法:取连接产物转化感受态大肠杆菌DH5α,提取质粒DNA,对质粒pIRES2-AcGFP1-CD进行XhoI和BamHI双酶切,用于转染。取小鼠双侧下肢股骨和胫骨,贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代制成单细胞悬液,加入荧光标记的CD44,CD45,CD90,CD105抗体后,采用Lipofectamine 2000介导法转染第3代骨髓间充质干细胞。
主要观察指标:重组质粒的鉴定,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标记表达,细胞转染后CD基因的表达。
结果:质粒pIRES2-AcGFP1-CD酶切产物经琼脂糖凝胶电泳后,于1.0~1.5 kb处有一条带出现,符合CD基因长度。细胞表面标记CD45呈阴性,CD44,CD90,CD105呈阳性。pIRES2-AcGFP1-CD基因转染36 h后,荧光倒置相差显微镜下可见小鼠骨髓间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,48 h后细胞仍有荧光表达,且强度明显增强。
结论:脂质体介导的CD基因在鼠骨髓间充质干细胞中成功表达,于转染48 h后达峰值。 相似文献
2.
背景:众多研究发现,激素性股骨头坏死的病理进展与骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化异常有关,其中解整合素金属蛋白酶10(A disintegrin and metalloproteases 10,ADAM10)高度参与此过程,但具体作用机制尚不清楚。目的:探讨ADAM10对激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响及其可能机制。方法:选择23例激素性股骨头坏死患者和17例股骨颈骨折患者,于术中无菌条件下取股骨近端骨髓,采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞,分别得到激素性股骨头坏死患者来源骨髓间充质干细胞(S-BMSCs)和股骨颈骨折患者来源骨髓间充质干细胞(F-BMSCs),体外培养至第3代,采用CCK-8检测两组细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察两组细胞成骨分化能力;qRT-PCR和Western blot检测两组细胞中ADAM10 mRNA和蛋白表达水平。采用ADAM10过表达载体慢病毒感染S-BMSCs,再联合Notch信号通路抑制剂DAPT进行处理,CCK-8检测细胞增殖活性;茜素红染色和碱性磷酸酶染色观察细胞成骨分化能力;qRT-PCR检测细胞中成骨... 相似文献
3.
目的观察脊柱外伤患者CT、MRI影像表现并比较两者诊断价值。方法对本院2013年4月-2016年1月60例脊柱外伤患者的CT、MRI资料进行回顾性分析,观察患者CT、MRI图像表现,并比较两者对脊椎骨折、碎骨片、韧带损伤等检出结果。结果 CT显示脊椎骨折56例(93.3%),表现为椎体变形或椎体楔状压缩;MRI显示脊椎骨折60例(100.0%),椎体内呈现T1WI低或等信号,T2WI高信号。MRI对脊椎骨折检出率明显高于CT(P0.05);CT显示碎骨片176块,较MRI的121块差异有统计学意义(P0.05)。CT对脊椎曲度改变、椎管容积改变、神经根损伤及椎旁软组织损伤显示率与MRI比较差异无统计学意义(P0.05)。MRI对韧带损伤检出率为68.3%显著高于CT的10.0%,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CT在脊柱外伤碎骨片显示上相比MRI更有优势,而MRI相比CT在脊椎骨折、韧带损伤显示上更有优势,各有优劣,临床根据患者情况灵活应用。 相似文献
4.
目的:探讨经伤椎置钉固定治疗单节段胸腰椎骨折的临床疗效.方法:采用后路单节段椎弓根螺钉复位固定结合植骨融合的方法治疗胸腰椎骨折患者18例,比较患者术前和术后的Cobb角、椎体压缩百分比及椎管矢状径占位率,用Frankel分级评估神经功能.结果:18例均获得随访,无一例内固定松动和断裂,全部获得骨性融合;术后伤椎Cobb角、椎体压缩百分比及椎管矢状径占位率均较术前明显改善(P<0.01).Frankel分级:术前B级2例,C级5例,D级7例,E级4例;术后C级3例,D级8例,E级7例.结论:后路椎弓根螺钉复位固定结合植骨融合治疗单节段胸腰椎骨折是一种疗效确切、安全可靠的内固定方法,但应严格掌握适应证. 相似文献
5.
目的探讨可吸收医用膜与尺神经肌膜瓣下前置联用对肘管综合征患者的疗效及神经电生理的影响。方法选择2016年2月至2018年12月医院诊治的肘管综合征患者84例作为研究对象,通过抽签法将其等分成试验组及对照组,每组42例。对照组予以尺神经肌膜瓣下前置治疗,试验组则于对照组的基础上增用可吸收医用膜治疗,分别评价两组临床疗效、治疗前后神经电生理变化情况、并发症控制效果。结果试验组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后试验组及对照组小指展肌引出CMAP波幅均高于治疗前,且试验组高于对照组(P<0.05);试验组与对照组在切口血肿、切口附近感觉减退、瘢痕增生发生率方面对比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论可吸收医用膜与尺神经肌膜瓣下前置联用可显著提高肘管综合征患者的疗效。 相似文献
6.
踝关节骨折是临床常见的骨折类型之一,其发病率高居关节内骨折的首位。受伤原因主要为直接暴力或者扭转等间接暴力。踝关节骨质薄弱,骨折后踝穴和距骨的匹配关系被破坏,极易引起创伤性关节炎[1]。既往的治疗方法多使用克氏针和金属螺钉进行内固定,术后容易出现关节疼痛和断裂等情况,甚至需要二次手术将螺钉取出,给患者带来了极大的痛苦[2]。可吸收螺钉是近年来使用逐渐增多的用于内固定的骨科手术材料,已经逐渐显示出其巨大的优越性。我院近年来使用可吸收螺钉治疗踝骨骨折,取得了良好的效果,现报道如下。 相似文献
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背景:自杀基因独有的旁观者效应,可显著提供肿瘤细胞杀伤效果,同时还与放射治疗、免疫摹因治疗联合应用,并克服了基因转导效率低的缺陷.胞嘧啶脱氨酶(cytosine deaminase,CD)即可产生强大的旁观者效应.目的:观察脂质体介导真核表达载体CD基因转染鼠骨髓间充质干细胞的效果及其基因表达.设计、时间及地点:细胞学基因水平实验,于2007-05/12在大连理工大学干细胞与组织工程研发中心完成.材料:SPF级C57BL纯系小鼠6只,由大连医科大学实验动物中心提供.连接产物转化感受态大肠杆菌DH5 α由大连理工大学干细胞与组织工程研发中心提供.LipofectamineTM 2000脂质体为Invitrogen产品.方法:取连接产物转化感受态大肠杆菌DH5 α,提取质粒DNA,对质粒pIRES2-AcGFP1-CD进行Xhol和BamHI双酶切,用于转染.取小鼠双侧下肢股骨和胫骨,贴壁法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代制成单细胞恳液,加入荧光标记的CD44,CD45,CD90,CD105抗体后,采用Lipofectamine 2000介导法转染第3代骨髓间充质干细胞.主要观察指标:重组质粒的鉴定,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标记表达,细胞转染后CD基因的表达.结果:质粒pIRES2-AcGFP1-CD酶切产物经琼脂糖凝胶电泳后,于1.0~1.5 kb处有一条带出现,符合CD基因长度.细胞表面标记CD45呈阴性,CD44,CD90,CD105呈阳性.pIRES2-AcGFP1-CD基因转染36 h后,荧光倒置相差显微镜下可见小鼠骨髓间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,48 h后细胞仍有荧光表达,且强度明显增强.结论:脂质体介导的CD基因在鼠骨髓间充质干细胞中成功表达,于转染48 h后达峰值. 相似文献
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目的研究自制锚钉在颈后路单开门椎管扩大椎板成形术(ELAP)中的应用效果。方法 47例纳入研究的病例采用自制锚钉进行固定,分析病例临床资料,统计数据,并应用SPSS17.0软件分析。结果 47例自制锚钉置入过程顺利,未出现脊髓、椎动脉及神经损伤,手术时间70~140(94.2±8.3)分钟,出血量160~600(263.4±65.6)m L。术中未输血,术后未出现感染及异物排异反应。切口均为1期愈合。术后随访过程颈椎X片及CT显示"开门"程度满意,未见锚钉松动、脱落以及颈椎不稳、椎板塌陷现象。18个月行脊髓功能JOA评分,结果与治疗前JOA评分比较有显著性差异(0.05)。结论自制锚钉应在颈后路ELAP术中操作简单,安全性可靠,临床"开门"效果满意。 相似文献
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目的探究血清维生素25(OH)D含量水平对脆性髋部骨折患者并发肺部感染的影响。方法选取2011年5月-2016年6月于医院进行治疗的脆性髋部骨折患者为研究对象,依据患者肺部感染病理学和影像学检查结果,发生肺部感染患者78例为感染组,无感染患者中抽取78例为对照组;对两组患者的性别、年龄和身高体重等资料进行整理和比较;抽取156例患者空腹静脉血,使用放射免疫法进行维生素25(OH)D浓度检测,比较两组患者维生素25(OH)D含量水平,按照美国内分泌协会2011年颁布的临床实践指南,将维生素25(OH)D浓度分为:0~20、21~30、>30μg/L三个区间,比较两组患者在这三个区间内的例数及构成比;比较感染组患者在治疗前后维生素25(OH)D浓度变化情况。结果对照组患者维生素25(OH)D浓度为(28.4±5.1)μg/L,感染组患者维生素25(OH)D浓度为(17.5±5.9)μg/L;对照组维生素25(OH)D浓度0~20μg/L患者7例占9.0%,21~30μg/L患者66例占84.6%,>30μg/L患者5例占6.4%,感染组维生素25(OH)D浓度0~20μg/L患者63例占80.8%,21~30μg/L患者12例占15.4%,>30μg/L患者3例占3.8%,两组患者数据比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后感染组患者维生素25(OH)D浓度为(23.1±4.7)μg/L,维生素25(OH)D浓度0~20μg/L患者27例占34.6%,21~30μg/L患者45例占57.7%,>30μg/L患者6例占7.7%,相比治疗前(17.5±5.9)μg/L上升,治疗前后数据比较差异有统计学意义(P<0.05。结论当脆性髋部骨折患者血清中维生素25(OH)D含量在30μg/L以下时,患者有可能并发肺部感染,当血清中维生素25(OH)D含量在20μg/L以下时有极大可能并发肺部感染,脆性髋部骨折患者血清中维生素25(OH)D含量水平对患者肺部感染的诊断具有预测价值。 相似文献
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目的探讨微创稳定系统钢板倒置治疗陈旧性股骨粗隆间骨折的临床价值。方法对我院2012~2013年骨科收治的20例采用微创稳定系统钢板倒置治疗的陈旧性股骨粗隆间骨折患者回顾性分析,选取同期采用动力髋螺钉21例作为对照组,对两组患者其进行随访,通过比较两组患者手术时间、术中出血量、骨折愈合时间、Harris评分评价微创稳定系统钢板倒置治疗的临床疗效。结果观察组手术切口长度小于对照组、手术时间小于对照组、术中出血量少于对照组,差异均有统计学意义(0.05);两组间骨骼愈合时间、末次随访Harris评分差异均无统计学意义(0.05)。结论 LISS倒置治疗陈旧性股骨粗隆间骨折能够达到满意复位、固定,同时还具有切口小、术中出血量少、手术时间短的优点,是治疗股骨粗隆间骨折的一种较好的内固定方法。 相似文献