利用母胎间基因甲基化的差异性检测母血中微量胎儿DNA方法的建立

随着表观遗传学方法 在无创性产前诊断中的逐步应用,第一个普通应用的胎儿表观遗传学标记低甲基化maspin基因突破了胎儿性别和基因多态性的局限,为母血中胎儿DNA应用于临床开辟了新的领域,象征着非创伤性产前诊断的研究向前迈进了一大步[1].甲基化特异的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术是低甲基化maspin序列检测的重要手段,然而该方法 操作复杂且造成大量DNA降解,给微量胎儿DNA的定量分析带来困难.有研究者发现,RASSF1A基因启动子区在母血细胞中处于低甲基化状态,而在胎盘细胞中处于超甲基化状态[2-3];同时发现母血浆中超甲基化的RASSF1A序列中存在胎儿SNP基因型.     

阻断协同刺激分子对TGF-β1和PAI-1的表达及妊娠结局的影响

目的：探讨阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠TGF-β1和PAI-1的表达及妊娠结局的影响。方法：实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗，实验对照组注射大鼠同型IgG2b，而正常妊娠组不做任何处理。于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率，用免疫组化测定TGF-β1和PAI-1的表达。结果：（1）实验组的胚胎吸收率显著低于实验对照组（P〈0.05）。（2）实验组蜕膜细胞中TGF-β1和PAI-1的表达均显著高于实验对照组（P〈0.05）。结论：妊娠早期阻断CD86协同刺激分子信号途径可使母胎界面中的TGF-β1和PAI-1分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平。     

宫颈癌组织中survivin和CD44v6的表达及其与HPV16/18感染的相关性

目的研究survivin、CD44v6在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制。方法用免疫组化方法进行survivin和CD44v6的检测,用PCR检测HPV16/18感染情况。结果survivin和CD44v6的阳性率在宫颈癌组织中远高于CIN和正常宫颈组织,差异显著(均P<0.01),其表达率与淋巴结转移有关(均P<0.05)。CD44v6随着临床分期、病例分级的升高阳性率升高(P<0.05),survivin的阳性率则随着病例分级的升高而增加(P<0.05)。HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高(P<0.01),但与临床分期、病理分级、淋巴转移无关。survivin与HPV16/18感染有相关性(P<0.05)。结论宫颈癌组织中survivin的异常表达与HPV16/18感染有关。survivin和CD44v6与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查预后判断的有利指标。     

大学生艾滋病知识、态度和高危行为调查及健康干预需求评价

[目的]了解大学生艾滋病知识、态度和高危行为现状,为学校艾滋病健康教育提供依据。[方法]自行设计调查问卷,采用分层整群抽样的方法选取大学生共2300名进行问卷调查。[结果]只有42.4%的学生知道世界艾滋病日具体的时间,23.7%听说过"四免一关怀政策",48.1%的学生知道蚊虫叮咬不传播艾滋病。愿意与艾滋病患者握手的占41%,赞成婚前性行为的占11%;大学生性行为的发生率为11.3%,性伴侣2个以上的占4%;经常有静脉吸毒经历的占0.7%,偶尔向非正规组织卖过血的占0.9%;与他人共用牙刷、剃须刀等行为发生率比较高。[结论]大学生对艾滋病的基本知识了解还不够全面,对艾滋病的认识和对患者的态度较好,当代大学生的性观念发生了很大的变化,有必要加强学校艾滋病健康教育,尤其加强大学生的心理、道德教育。     

宫颈癌中CDC6、Survivin蛋白的表达与HPV16/18感染的相关性

[目的]研究CDC6、Survivin在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制,进一步寻找有利于宫颈癌诊断的新的分子标志物,以指导其诊断与预后.[方法]采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤样病变CIN1、20例CINⅡ-Ⅲ、20例正常宫颈组织进行CDC6、Survivin的检测,同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况.[结果](1)在宫颈癌组织中CDC6和Survivin表达的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异有统计学意义(均P＜0.05),且CDC6和SurvMn阳性表达率与病理分级、淋巴结转移有关,差异有统计学意义(均P＜0.05),CDC6、Survivin阳性表达率均与年龄分组、临床分期无关(均P＞0.05). (2)HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高,差异有统计学意义(P＜0.05),但与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无关(均P＞0.05). (3)在宫颈癌组织中CDC6与HPV16/18感染呈正相关(P＜0.05),Survivin与CDC6、HPV16/18感染呈正相关(均P＜0.05).[结论]宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌鲴织中CDC6、Survivin表达的改变可能与HPV16/18感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生.     

HPSE和Syndecan-1与人类早期复发性自然流产关系

目的探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPSE)和蛋白聚糖1(syndecan-1)在人类早期复发性自然流产绒毛组织中的表达及两者与复发性自然流产的关系。方法采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测山西大同地区非意愿性正常妊娠者(35例)和早期复发性自然流产者(28例)绒毛组织中HPSE和syndecan-1的mRNA表达水平, 分析探讨两者与自然流产关系。结果HPSE mRNA在正常妊娠组表达的阳性率为85.71%(30/35), 明显高于复发性自然流产组的57.14%(16/28), 差异有统计学意义(P<0.05);而在正常妊娠组syndecan-1 mRNA的阳性表达率为54.28%(19/35), 明显低于复发性自然流产组的82.14%(23/28), 差异亦有统计学意义(P<0.05);HPSE和syndecan-1蛋白表达呈负相关(r=-0.386, P<0.01)。结论在复发性自然流产中HPSE的表达降低, 导致降解细胞外基质能力下降, syndecan-1表达增高, 影响胚泡植入, 导致自然流产的发生。     

流产鼠Caspase-3与laminin B和PAI-1的表达及对妊娠结局的影响

目的:研究阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠母胎界面Caspase-3、laminin B和PAI-1的表达及对妊娠结局的影响。方法:实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗,实验对照组注射大鼠同型IgG2b,正常妊娠组不作任何处理。于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率,用免疫组化测定Caspase-3、laminin B和PAI-1的表达,并进行图像分析、检测免疫组化染色灰度值(A)。结果:①实验组的胚胎吸收率显著低于实验对照组(P<0.05);②实验组中Caspase-3蛋白灰度值明显高于实验对照组(P<0.05),实验组中laminin B和PAI-1蛋白灰度值均明显低于实验对照组(P<0.05)。结论:妊娠早期阻断CD86协同刺激分子可使母胎界面中的Caspase-3、laminin B和PAI-1分别通过各自不同的途径发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平。     

FHIT基因杂合性丢失与宫颈癌关系

目的 探讨脆性组氨酸三联体基因(Fragile histidine triad,FHIT)杂合性丢失(Loss of heterozygosity,LOH)及人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染与宫颈癌的关系。方法 选取FHIT基因的2个微卫星多态标记,采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)法对50例宫颈癌及40例宫颈上皮内瘤样病变(Cervical in-traepithelial neoplasia,CIN)组织进行杂合性丢失及HPV16感染的检测。结果 在D3S1234和D3S4103位点上宫颈癌的杂合性丢失发生率分别为46%(23/50)、40%(20/50);宫颈上皮内瘤样病变的杂合性丢失发生率分别为40%(16/40),37.5%(15/40)。宫颈癌与CIN在D3S1234位点上的LOH差异无统计学意义(P>0.05);在D3S4103位点上也无统计学意义(P>0.05)。但宫颈癌在2位点上LOH发生频率均高于CIN,且高级别CIN发生率高于低级别CIN。HPV16感染的阳性组中LOH发生率为79.5%(35/44);阴性组LOH发生率为33.3%(2/6),组间LOH的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 FHIT基因的变异可能发生在宫颈癌变的晚期;FHIT基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。     

新生儿的临床观察及基础护理体会

目的探讨提高新生儿的成活率的有效措施。方法对106例新生儿住院患儿进行临床观察,对其基础护理作回顾性分析。结果早期观察、有效的护理是降低新生儿病死率的重要措施。结论在护理新生儿的工作中,护士准确的观察和做好基础护理,对提高新生儿成活率,预防并发症,尽早康复意义重大。