菲立磁标记兔骨髓基质细胞生物学特性的实验研究

目的初步探索利用菲立磁（FE）和转染试剂多聚赖氨酸（PLL）体外磁性标记兔骨髓基质细胞（BMSC）这一方法的可行性．并确定其标记BMSC的最佳浓度。方法无菌条件下行股骨取髓，采用梯度密度离心法分离获取兔BMSC，体外培养、诱导分化为神经干细胞（NSC），使用不同浓度（5、12．5、25、37．5μg／m1）的FE-PLL标记BMSC。采用普鲁士蓝染色、CCK-8法、流式细胞仪、透射电镜、免疫细胞染色等方法，检测FE—PLL标记兔BMSC的效率及其对细胞生长、分化、凋亡的影响。结果FE可以高效率标记BMSC，被标记的细胞在显微镜下呈淡黄或深黄，颜色深浅与所加FE的剂量呈正相关。流式细胞仪结果显示：5、12．5、25μg／ml各组FE对细胞无不良影响，而37．5μg／ml组凋亡细胞明显增加。CCK一8测定的生长曲线表明：除37．5μg／ml组外，其他各组细胞之间差异无统计学意义。普鲁士蓝染色显示：各组FE-PLL标记BMSC胞质内均可见到细小的蓝色铁颗粒。电镜结果显示：各组FE-PLL标记的BMSC胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡，其含铁囊泡的数量依FE浓度增加而增加。结论FE可以用来体外标记兔BMSC;其标记效率随FE浓度增加而增高，最佳浓度为25μg／ml。     

42例高血压脑出血患者的临床分析

总结高血压性脑出血的临床特征,选取我院1998年7月—2006年7月就诊的42名患者为对象,分析高血压性脑出血的危险因素和保护因素,探讨适宜高血压性脑出血的治疗方法。     

重型颅脑损伤与常规生命体征80例临床监测分析

我科对1997年-2000年收治的80例重型颅脑损伤患者常规生命体征监测与发生严重神经科事件之间相关性进行分析,探讨患者呼吸、循环等全身情况与脑组织血供及氧代谢等因素之间的关系,为鉴定颅脑损伤治疗方案提供依据。     

内镜辅助下枕下远外侧髁上-髁旁入路颈静脉孔区的解剖学研究

目的探讨内镜辅助下枕下远外侧髁上-髁旁入路进行颈静脉孔区手术的可能性及入路的显微外科解剖学基础。方法 25例干性成人颅底标本,33例成人干性寰枢椎标本进行枕下远外侧髁上-髁旁入路相关骨性结构的解剖学测量;10具灌注后成人尸体头标本模拟进行髁上-髁旁手术入路逐层解剖至颈静脉区,内镜辅助下对解剖结构进行精确测量和图片采集。结果骨性颈静脉孔形态多变,右侧略大于左侧。通过切除颈静脉结节和磨除部分枕髁可以充分暴露颈静脉孔内外口。结论内镜辅助下枕下远外侧髁上-髁旁入路能够对颈静脉孔内外口进行充分暴露,并对寰枢关节、面听神经等重要结构损伤小,是一种理想的安全微创手术入路。     

顿服含缓释淀粉的肠内营养乳剂对颅脑损伤患者血糖水平的影响：120例随机对照临床研究

目的探讨含缓释淀粉的肠内营养（EN）乳剂对颅脑损伤患者血糖水平的影响。方法2010年1月至6月我院神经外科收治的120例重型颅脑损伤并发高血糖患者参加本研究,按随机表分别进入对照组（n=60）和研究组（n=60）。两组患者在受伤后48h内分别给予相同热量的EN,研究组用含缓释淀粉的EN乳剂,对照组用普通EN乳剂,每天入量分6次用注射器推注,共使用15d。分别于EN前、EN后第7天和第15天检测空腹血糖（FBG）、餐后2h血糖（2hPG）和糖化血红蛋白（HbAlc）水平。结果研究组营养支持前2hPG水平为（12．26±2．36）mmol／L,EN第7天、第15天的2hPG水平分别为（9．76±2．90）mmol／L和（9．78±1．86）mmol／L,明显低于营养支持前（P〈0．05）;研究组营养支持前后FBG和HbAlc差异无统计学意义（P〉0．05）。对照组EN第7天、第15天的2hPG水平分别为（11．70±2．80）mmol／L和（11．39±2．44）mmol／L,研究组与对照组相比,2hPG水平明显下降（P=0．033,P=0．020）。两组间FBG和HbAlc比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论含缓释淀粉的EN乳剂能促进颅脑损伤并发高血糖患者的血糖控制,改善患者的餐后血糖水平。     

显微手术切除30例小脑幕脑膜瘤的治疗体会

目的 探讨小脑幕脑膜瘤的手术治疗体会.方法 回顾性分析东莞市人民医院神经外科自2004年7月至2011年9月显微手术治疗的30例小脑幕脑膜瘤患者的临床资料,包括病理资料、手术经过、术后效果及随访研究等,并总结治疗体会.结果 肿瘤全切19例,近全切6例,部分切除5例.术后患者症状均有不同程度的改善.经过8个月～5年的随访研究,无一例患者死亡,均无明显手术并发症发生.结论 对于小脑幕脑膜瘤,由于其自身特点,应当选择适当的手术人路,术中采用显微手术技巧,并妥善处理和保护静脉窦、神经、脑干等,这是提高手术疗效和患者术后生活质量的关键.     

20%吡拉西坦注射液降低颅脑损伤患者颅内压的临床研究

目的探讨20%吡拉西坦注射液降低颅脑损伤患者颅内压(ICP)的效果。方法将颅脑损伤患者60例分为治疗组和对照组,治疗组快速静脉滴注20%吡拉西坦注射液,对照组快速静脉滴注20%甘露醇,所有患者均采用无创ICP监测仪监测ICP,同时观察药物的安全性、有效性及可能出现的各种副作用。结果治疗组和对照组给药后均能迅速降低ICP,两组临床疗效差异无显著性(P<0.05);治疗组无局部及全身不良反应的发生,对照组出现尿素氮及肌酐增高2例。结论 20%吡拉西坦注射液治疗颅脑损伤ICP增高疗效安全可靠,比甘露醇更适合有肝肾功能损害的患者。     

兔骨髓基质细胞Feridex标记及体外MRI成像的实验研究

目的使用超顺磁性氧化铁菲立磁（FE）和转染试剂多聚赖氨酸（PLL）对骨髓基质细胞（BMSCs）进行体外标记．并在体外对标记细胞进行MRI示踪，确定其标记BMSCs的适宜浓度。方法使用不同浓度（10、25、50、75μg／mL）的FE复合PLL，形成FE-PLL并标记新西兰大白兔BMSCs后，分为5组（A：纯BMSCs组；B：5μg／mLFE＋0．75μg／mLPLL组；C：12．5μg／mLFE＋0．75μg／mLPLL组；D：25μg／mLFE＋0．75μg／mLPLL组；E：37．5μg／mLFE＋0．75μg／mLPLL组）。对各组细胞分别进行普鲁士蓝染色、流式细胞仪检测、透射电镜观察．检测FE-PLL标记兔BMSCs的效率及其对凋亡的影响。体外扫描采用4．7TMR机，扫描序列为轴面T2WI。结果FE可以高效率标记BMSCs，被标记的细胞显微镜下呈淡黄或深黄，颜色的深浅与所加FE的剂量呈正相关；胞质内散在分布许多含膜的囊泡样包涵体结构．囊泡内有浓聚细小的铁颗粒．从B组～E组依次增多。流式细胞仪结果显示，5、12．5、25μg／mL各组FE对细胞无不良影响，而37．5μg／mL组凋亡细胞明显增加。体外4．7TMRI显示未标记组无信号改变，呈显著高信号．标记组随FE浓度的增高信号改变增大，信号降低的越明显。结论FE可以用来体外标记兔BMSCs．在适宜浓度下对其生物学活性无明显影响。并能在MRI下达到示踪的目的。     

超顺磁性氧化铁对大鼠神经干细胞生物学活性的影响

目的 初步研究利用超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓基质细胞来源的神经干细胞及其对细胞活力、增殖等生物学活性的影响,并确定最佳标记浓度.方法 无菌条件下取大鼠股骨骨髓,梯度密度离心法分离得到骨髓基质细胞.体外培养、诱导成神经干细胞,使用不同终浓度的(6.25、12.5、25、37.5、50μg/ml)Ferumoxides(超顺磁性氧化铁)标记神经干细胞,采用普鲁士蓝染色、MTT法、流式细胞仪、透射电镜等方法鉴定Ferumoxides标记神经干细胞的效率及对细胞活力、增殖等生物学特性的影响.结果 Ferumoxides可以高效率标记神经干细胞,标记效率在90%以上.普鲁士蓝染色显示标记的神经干细胞胞质内存在细小蓝色铁颗粒,细胞呈淡蓝至深蓝色,颜色的深浅与所加Ferumoxides的剂量成正相关.电镜结果显示标记的神经干细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡,主要集中在胞体上.当Ferumoxides终浓度高于25 μg/ml时,Ferumoxides颗粒在细胞内聚集成团块状,量较多,在一定程度上影响了细胞超微结构的观察;低于25 μg/ml时,Ferumoxides颗粒散布于细胞胞质内,并随着浓度的降低,Ferumoxides颗粒在胞质内分布越分散,量越少.MTT及流式细胞仪结果显示Ferumoxides终浓度大于25 μg/ml时则对细胞活力、增殖、凋亡有一定影响,小于等于25 μg/ml时对细胞活力、增殖无明显影响.结论 利用Ferumoxides在体外标记神经干细胞是一种可行的实验方案,其最佳终浓度为25 μg/ml.     

大鼠骨髓源神经干细胞的Sinerem体外标记及磁共振成像研究

目的 应用超小超顺磁性氧化铁(USPIO)Sinerem和转染试剂多聚赖氨酸(PLL)复合物标记大鼠骨髓源神经干细胞,初步评价磁共振成像活体示踪Sinerem标记干细胞的可行性.方法 分离SD大鼠骨髓基质干细胞,体外培养诱导成骨髓源神经干细胞.将制备的Sinerem-PLL复合物以浓度Sinerem 200μg/ml和干细胞共孵育培养过夜.采用普鲁士蓝染色和透射电镜确定细胞内铁的摄取、定位情况;并对细胞增殖、凋亡检测评价.体内外以SE序列T2WI与T2*WI行4.7T磁共振干细胞成像.结果 该方法标记干细胞效率为95%以上,普鲁士蓝染色显示铁颗粒存在胞质中,电镜显示铁颗粒集中于内涵体和溶酶体中;该浓度时Sinerem对细胞的活性影响与未标记细胞相比差异无统计学意义(P＞0.05).标记后细胞体内外的T2WI与T2*WI信号强度明显降低.结论 利用Sinerem对比剂经PLL介导标记骨髓源神经干细胞高效易行,磁共振可用于活体示踪神经干细胞.