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TAT-N24穿膜融合多肽的表达与鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 表达并纯化TAT-N24穿膜融合多肽,初步探讨其生物学活性.方法 构建pTAT-HA-N24原核表达载体,在BL21大肠埃希菌中表达并纯化TAT-N24融合多肽,利用SDS凝胶电泳检测纯化蛋白的纯度,利用免疫细胞化学和流式细胞术检测TAT-N24融合蛋白的穿膜能力和生物学活性.结果 在原核表达系统中成功构建并表达纯化了TAT-N24穿膜融合多肽,其在6 mol/L尿素和DMSO中均具有较好的溶解性,纯化的融合多肽经SDS凝胶电泳分析未见明显杂蛋白混入,利用免疫细胞化学染色可见TAT-N24处理结肠HT29细胞12 h后90%以上的细胞中可检测到TAT-N24,流式细胞术检测细胞周期可见TAT-N24能够有效地诱导细胞周期阻滞,抑制结肠癌细胞生长.结论 TAT-N24具有高效的穿膜能力,并能有效抑制结肠癌细胞增殖,可望开发成为有效的肿瘤分子治疗药物. 相似文献
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摘要目的观察全反式维甲酸(ATRA)对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶(PI)染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为(0.5±0.6) cm3,对照组为(1.9±1.7) cm3(P<0.05);体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为(27.3±3.2)%,对照组(5.1±3.2)%(P<0.01);ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期(G0/G1期)细胞比例为(57.6±1.5)%,对照组(43.0±2.0)%(P<0.01)。结论ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。 相似文献
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Insulin-like growth factor-Ⅰ (IGF-Ⅰ) is a mitogenic and anti-apoptotic factor. Serum IGF-I concentration is related to some cancer risk and tumor progression. The aim of this research was to study the association of preoperative serum IGF-Ⅰ concentration with clinicopathological parameters and prognosis of non-small cell lung cancer (NSCLC). Preoperative serum IGF-Ⅰ concentration was measured in 80 consecutive patients with NSCLC who underwent radical lung cancer resection, and 45 patients with benign pulmonary lesion (BPL) by using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). The results showed that the serum IGF-Ⅰ concentration was elevated and correlated with clinicopathological parameters and overall survival (OS) in NSCLC patients. Serum IGF-Ⅰ concentration was significantly higher in patients with NSCLC than in those with BPL. The IGF-Ⅰ concentrations were significantly higher in NSCLC patients with ≥T2, N1-3, and in ⅢA-Ⅳ but not in those with 相似文献
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目的 观察磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)的调节亚单位p55γ-N末端24个氨基酸抑制人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞增殖的作用.方法 构建含有PI3K-p55γ-N末端24个氨基酸的腺病毒载体AD-N24-GFP及对照病毒AD-GFP,感染HaCaT细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU/PI双掺入法检测其对细胞DNA合成的影响,CFDA-SE(细胞增殖示踪荧光探针)标记法检测细胞增殖情况.结果 AD-N24能有效阻滞HaCaT细胞周期进程于G 0/G 1期,S期和G 2/M期细胞减少,AD-N24-GFP组各期细胞分布为:G 0/G 1期(84.18±1.73)%,S期(7.60±1.47)%,G 2/M期(8.22±1.33)%,而AD-GFP组各期细胞分布为:G 0/G 1期(61.14±2.76)%,S期(24.54±1.29)%,G 2/M期(14.32±1.61)%,空白对照组各期细胞分布为:G 0/G 1期(65.78±2.11)%,S期(22.22±1.92)%,G 2/M期(12.00±1.19)%,AD-N24-GFP组与AD-GFP组及空白对照组间G 0/G 1期和S期细胞比例的差异有显著性意义(P <0.05);BrdU阳性细胞比例显示:AD-N24-GFP组R2为:(5.89±1.33)%,AD-GFP组R2为:(27.09±2.61)%,空白对照组R2为:(24.91±2.04)%,提示AD-N24能有效抑制HaCaT细胞的DNA合成;CFDA-SE检测显示AD-N24-GFP组增殖指数(PI)为:(33.60±2.52),AD-GFP组PI为:(52.47±4.41),空白对照组PI为:(55.29±7.61),提示AD-N24能有效抑制HaCaT细胞的增殖.结论 在HaCaT细胞中过表达N24能有效阻滞HaCaT细胞周期进程,干预其细胞DNA合成,抑制其细胞增殖. 相似文献
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恒康正清加服胃复安肠道清洁效果的观察 总被引:1,自引:0,他引:1
近年来恒康正清(聚乙二醇电解质散)广泛应用于临床肠道准备,作者在采用恒康正清进行肠道准备的过程中发现,部分肠道运动功能障碍(如便秘)患者升结肠、横结肠内存有较多气泡及粪水,影响了肠黏膜病变的观察。为此,作者依据胃复安的药理作用,在服用恒康正清肠道清洁剂前30min加服5mg胃复安,收到较好效果。 相似文献
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静脉留置针与硅胶管在泪小管断裂中的应用对比 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:应用静脉留置针与硅胶管应用于泪小管断裂吻合术中的临床疗效。方法:将泪小管断裂患者100例(100眼)按照随机的原则分成2组:A组(静脉留置针组)50眼,B组(硅胶管组)50眼,观察手术后6mo溢泪及冲洗泪道通畅情况。结果:A组中治愈49眼(98.0%);B组中治愈46眼(92.0%)。A组与B组疗效相比差异有显著意义(P<0.05)。结论:静脉留置针治愈率最高,留置于吻合道中,对防止粘连、抑制纤维化及减轻吻合口收缩起重要作用,是较为安全,有效,使用方便理想的留置物。 相似文献
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目的 研究美沙拉嗪缓释剂对2,4,6 三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro picrylsulfonic acid,TNBS)诱导的溃疡性结肠炎肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL) 1β、IL-6表达的影响,探讨美沙拉嗪缓释剂的抗炎机制. 方法 应用TNBS/乙醇建立大鼠溃疡性结肠炎模型,实验设正常对照组、模型组、药物治疗组(给予美沙拉嗪溶液100 mg8226;kg-18226;d-1), 阳性对照组(给予5-对氨基水杨酸100 mg8226;kg-18226;d-1),每组10只,每天灌胃2次,给药时间从造模后第1天开始至实验结束,共7 d,观察大鼠疾病活动指数(disease index,DAI)、体质量变化及结肠病理学改变,生化法检查大鼠结肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的表达水平. 结果 与正常对照组比较,模型组大鼠结肠组织MPO活性及TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达量明显增多(P<0.05).与模型组和阳性对照组比较,药物治疗组MPO活性及结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA的表达明显减少(P<0.05).模型组和阳性对照组差异无统计学意义. 结论 美沙拉嗪缓释剂对大鼠实验性溃疡性结肠炎具有治疗作用,其机制与通过降低中性粒细胞的浸润、抑制促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA等的表达有关. 相似文献
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目的观察复方甘草口服溶液联合复方甲氧那明治疗肺切除术后持续咳嗽(CAP)的临床有效性。方法选取非小细胞肺癌肺切除术后持续咳嗽患者110例,随机分为2组。对照组52例口服复方甲氧那明胶囊,每次2粒,每日3次,治疗组58例在对照组基础上加用复方甘草口服溶液(每次10 mL,每日3次,po),两组均治疗7 d。指导患者填写中文版莱斯特咳嗽量表(LCQ-MC),对评分进行比较;并分别于治疗前、治疗后、治疗结束后1周比较两组患者日间咳嗽与夜间咳嗽评分,并对咳嗽症状消失时间进行对比分析。结果对照组及治疗组治疗后LCQ-MC总分显著上升(P<0.05);治疗后两组LCQ-MC总分比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组与治疗组治疗后日间咳嗽评分差异无统计学意义(P>0.05),夜间咳嗽评分差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗结束1周后日间咳嗽评分差异无统计学意义(P>0.05),夜间咳嗽评分差异有统计学意义(P<0.05);治疗后咳嗽不明显患者中,对照组咳嗽症状消失(4.80±0.68) d,治疗组为(4.54±1.37)d(P>0.05);对照组... 相似文献